不孕症子宫内膜类器官建立与验证

目的 构建非免疫因素致不孕症和免疫因素致不孕症子宫内膜类器官培养体系,并比较两者免疫细胞因子的差异。方法 标本采自海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院生殖医学中心行宫腔镜检查的不孕症患者,获取非免疫因素致不孕症患者(n=3)与反复着床失败(RIF)患者(n=5)子宫内膜组织,通过洗涤、消化、重悬及接板,将组织嵌入基质胶中进行3D培养;在倒置显微镜下观察两组子宫内膜类器官生长情况;利用免疫荧光染色技术检测子宫内膜特异性标志物雌激素受体(ER)、角蛋白和上皮钙黏蛋白表达情况;利用ELISA法测定两组细胞因子水平,并比较两组细胞因子的差异。结果 在子宫内膜类器官体外培养过程中,类器官体积逐渐增大、细胞数量逐渐增多,培养7~10 d的类器官体积达到稳定状态且形状逐渐趋于圆形。在相同时间内,非免疫因素致不孕症子宫内膜类器官数量较RIF子宫内膜类器官多。免疫荧光染色显示类器官中子宫内膜相关标志蛋白ER、角蛋白和上皮钙黏蛋白均表达,提示子宫内膜类器官构建成功。ELISA检测结果显示,两组间干扰素γ、IL-10、TNF-α、IL-4水平和TNF-α/IL-4比值的差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),TGF-β1、IL-17水平及IL-17/TGF-β1、干扰素γ/IL-10、TNF-α/IL-10比值差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 在体外成功培养获得了具有增殖能力的非免疫因素致不孕症与RIF子宫内膜类器官,为免疫性不孕症的基础研究提供了新模型。

子宫内膜类组装体的研究进展

子宫内膜类器官是子宫内膜细胞自组织形成的三维聚集物,再现部分子宫内膜的结构与功能.子宫内膜类组装体在此基础上整合了其他细胞类型,如基质成纤维细胞、内皮细胞和免疫细胞等,更好地模拟了子宫内膜的细胞组成与功能.类器官和类组装体克服了体内子宫内膜的复杂性与伦理的限制,成为新的理想研究模型.本文综述了子宫内膜类组装体的培养方法、在植入等方面的应用,讨论了子宫内膜类组装体的研究进展与应用前景.