子宫内膜自然杀伤细胞受体研究进展

自然杀伤(natural killer,NK)细胞是一类不需要抗原刺激和抗体参与即能发挥杀伤作用的非T非B类淋巴细胞。子宫内膜和蜕膜中均含有NK细胞,从增生晚期到分泌晚期NK细胞的比例由26.4%上升到83.2%。近年研究表明,母体免疫系统尤其是子宫局部的免疫细胞能否识别并耐受胚胎抗原,直接影响妊娠的建立与维持,而子宫NK细胞参与蜕膜发生及子宫血管的重铸,在正常妊娠中起着十分重要的作用。NK细胞表面表达多种能与主要组织相容性复合物或非主要组织相容性复合物类配体结合的受体,调节自然杀伤细胞的功能、影响妊娠。

子宫内膜自然杀伤细胞与人类生殖

人类子宫内膜含有大量的CD56bright大颗粒自然杀伤细胞,它的产生可能受到多种激素的调节。子宫内膜自然杀伤细胞在表型和功能上有别于外周血自然杀伤细胞。子宫内膜自然杀伤细胞不表达CD16和CD3,对靶细胞K562具有较低的杀伤活性,并显示出独特的基因表达类型。目前,世界范围内的学者都致力于子宫内膜自然杀伤细胞在生理、病理学上的研究。非孕子宫内膜自然杀伤细胞周期性变化已被认为是子宫内膜周期性更新及月经期脱落中的一个环节。在正常妊娠过程中,子宫内膜自然杀伤细胞通过产生细胞因子、趋化性细胞因子、血管生成因子等起到有利于妊娠的作用。该文现对其起源、激素调节以及在生殖相关方面的作用研究作以综述。

反复种植失败患者与复发性流产患者分泌期子宫内膜自然杀伤细胞数量分析

目的研究子宫内膜自然杀伤细胞(uNK)在反复种植失败(RIF)患者与复发性流产(RM)患者分泌期子宫内膜的表达情况。方法选取2013年3月至2016年10月于本院生殖医学助孕中心的RIF患者(20例)和RM患者(35例),对照25例。于患者尿LH试纸检测峰值出现后第7~9天,利用子宫内膜取样器刮取少量子宫腔内膜组织;根据子宫内膜形态学Noyes标准,确定RIF患者组(n=20)、RM患者组(n=35)与对照组(男性因素不孕患者,n=25)子宫内膜分期;以CD56作为uNK的表面标记物,免疫组化技术检测3组患者分泌期子宫内膜CD56阳性细胞的数量,并利用Vectra~自动病理成像定量分析系统计算细胞阳性细胞率。结果 3组患者内膜形态学分期均有早、中、晚分泌期病例;RIF组与RM组患者分泌期子宫内膜CD56阳性细胞率[分别为(17.59±12.59)%、(16.54±11.37)%]显著高于对照组[(8.01±7.19)%](P<0.01);3组患者子宫内膜CD56阳性细胞率从分泌早期到分泌晚期均呈显著递增趋势(P<0.05);RIF组与RM组分泌早期、中期及晚期CD56阳性细胞率均显著高于对照组(P<0.05)。结论 RIF与RM患者子宫内膜分泌早、中、晚期uNK细胞数量异常升高,提示其可能影响子宫内膜容受性,从而导致妊娠失败。

子宫内膜自然杀伤细胞研究进展

子宫内膜自然杀伤细胞(uNK细胞)是最丰富的蜕膜淋巴细胞,其高度表达穿孔素,为早孕期间滋养层细胞侵入蜕膜提供帮助。且分泌多种细胞因子如集落刺激因子(CSF),肿瘤坏死因子(TNF),白血病抑制因子(LIF),转移生长因子(TGF),干扰素(INF)等,形成一个网络,彼此协调,在母胎界面的免疫调控中起重要作用。就uNK细胞的生物学特征、分化、聚集增生、激活和在子宫内的作用等方面综述该领域的研究进展。

子宫内膜自然杀伤细胞对不明原因反复种植失败患者妊娠结局的影响

目的研究子宫内膜自然杀伤细胞(uNKC)对不明原因反复种植失败(RIF)患者胚胎移植后妊娠结局的影响。方法回顾性分析行uNKC检查的不明原因RIF患者224例的临床资料,分析uNKC的四分位分布区间。纳入86例行解冻胚胎移植的不明原因RIF患者,根据uNKC四分位区间浓度将患者分为四组,分别为W25%区间组、26%-50%区间组、51%-75%区间组及>75%区间组,比较四组解冻胚胎移植后临床妊娠率、流产率及继续妊娠率。结果224例患者平均年龄34.62岁,平均移植次数3.63次,平均uNKC浓度3.84%。根据224例患者的uNKC数据,计算uNKC的四分位区间,W25%分布区间W1%;26%~50%分布区间1%~3%;51%~75%分布区间4%~5%;>75%分布区间>5%。86例行解冻胚胎移植的不明原因RIF患者,根据uNKC的分布区间分为四组,其中W25%区间组28例;26%~50%区间组25例;51%-75%区间组21例;>75%区间组12例。四组临床妊娠率、流产率及继续妊娠率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论uNKC无法预测不明原因RIF患者妊娠结局,其浓度与妊娠结局无显著关联。

人子宫内膜自然杀伤细胞研究进展

在月经黄体期和早孕期,子宫内膜中集聚大量CD56^+自然杀伤(NK)细胞。子宫内膜NK细胞与外周血NK细胞表型存在差异,功能不尽相同。本文综述子宫内膜NK细胞的表型、发生、功能以及在妊娠、特别是病理妊娠中的作用。

子宫自然杀伤细胞在复发性流产中的研究进展

复发性流产(RSA)是一种早期妊娠并发症,其病因复杂,包括遗传、内分泌、解剖异常、感染和免疫等因素。其中,T淋巴细胞、树突状细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)等免疫因子在RSA发生发展中的作用受到广泛关注,尤其是NK细胞,是人体免疫系统的重要组成部分。子宫NK细胞(uNK细胞)是着床时子宫内膜中数量最多的免疫细胞,在妊娠早期蜕膜血管生成、滋养层侵袭和胎盘螺旋动脉重塑中发挥重要作用。随着研究的进展,了解uNK细胞的起源、分类、功能及与RSA的关系可能为RSA的治疗和预防提供靶点。

负载MAGE-A3抗原的树突状细胞与细胞因子诱导杀伤细胞共培养对子宫内膜癌肿瘤干细胞及恶性进展的影响

目的:探究负载黑色素瘤相关抗原基因A3(MAGE-A3)的树突状细胞(DC)与细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)对子宫内膜癌肿瘤干细胞及恶性进展的影响。方法:采集人外周血分离单个核细胞,利用细胞因子分别诱导生成DC和CIK;MAGE-A3孵育DC后与CIK共培养,流式细胞仪检测DC-CIK、MAGE-A3-DC-CIK的表型;流式细胞仪分选子宫内膜癌细胞系Ishikawa的CD133^(+)干细胞,以子宫内膜癌干细胞作为靶细胞,分别以CIK、DC-CIK及MAGE-A3-DC-CIK作为效应细胞,MTT法检测效靶比为10∶1、20∶1、40∶1的细胞杀伤活性,ELISA法检测联合培养细胞上清液中IFN-γ、IL-2、IL-12、IL-17水平,Annexin V-FITC/PI双染法检测子宫内膜癌干细胞凋亡;建立子宫内膜癌干细胞移植瘤裸鼠模型,尾静脉注射DC-CIK或MAGE-A3-DC-CIK,观察裸鼠肿瘤生长情况,每隔2 d测量瘤体大小,21 d后取肿瘤组织,电子天平称重,HE染色观察肿瘤组织病理形态学变化,免疫组织化学染色检测肿瘤组织内Ki-67表达。结果:分离获得细胞表面CD80、CD86、HLA-DR表达分别达到88%、86%和90%的DC;MAGE-A3-DC-CIK组细胞表面CD8^(+)CD3^(+)、CD56^(+)CD3^(+)比例均高于DC-CIK组(P<0.01);经磁珠分选后获得CD133^(+)细胞比例高达90.23%的子宫内膜癌干细胞;与CIK组和DC-CIK组比较,MAGE-A3-DC-CIK组在不同效靶比下对子宫内膜癌干细胞的杀伤能力升高,细胞上清中IFN-γ、IL-2、IL-12及IL-17的分泌水平升高,培养液上清处理的子宫内膜癌干细胞凋亡率增加,差异均具有统计学意义(P<0.01);同时,与对照组和DC-CIK组比较,MAGE-A3-DC-CIK组移植瘤裸鼠的肿瘤体积小,肿瘤重量轻,肿瘤组织内细胞稀疏,Ki-67阳性细胞率减小,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:负载MAGE-A3的DC与CIK联合培养能促进CIK成熟,提高对子宫内膜癌干细胞的杀伤性,并抑制移植瘤裸鼠的恶性进展。

子宫内膜自然杀伤细胞与药物流产出血关系的研究

目的探讨米非司酮药物流产后子宫出血与子宫内膜自然杀伤细胞(uNK)的关系。方法选取自愿终止妊娠的停经8周之内的早孕妇女,自愿选择药物流产或人工流产二种方法,分为负压吸引人工流产组、药流不完全组(出血组)、药流完全组。收集三组蜕膜组织进行甲醛固定,石蜡包埋,uNK细胞的表达采用免疫组化染色,图象分析仪定量分析。结果米非司酮药流不完全出血区uNK细胞的数量多于药流不完全非出血区、药流完全组及人流组,差异具有统计学意义(P<0.05)。药流完全组uNK细胞的数量多于人流组,二者间差异有统计学意义(P<0.01)。结论米非司酮的作用可以使uNK细胞数量异常增多,使子宫局部微环境发生改变,导致异常血管生成,孕囊与蜕膜剥离不全,从而引起出血。

子宫内膜异位症中在位和异位内膜自然杀伤细胞的分布及数量变化

目的 :探讨子宫内膜异位症 (内异症 )患者异位、在位内膜组织中自然杀伤 (NK)细胞的数量变化及其在内异症发生、发展中可能的作用。方法 :采用CD57单克隆抗体 ,应用免疫组织化学法标记内异症患者的在位和异位子宫内膜组织中NK细胞 ,观察其分布特点并计数其密度 ,并与正常妇女子宫内膜对照研究。结果 :CD57阳性的NK细胞存在于内异症组和正常对照组的增殖期与分泌期子宫内膜组织中。内异症患者在位、异位内膜之间及与正常对照组子宫内膜中NK细胞的数量均无统计学差异(P>0.05) ,但内异症组的异位内膜NK细胞密度有增多的趋势。结论 :(1)内异症患者的子宫在位内膜和异位内膜的NK细胞的数量无明显变化 ;(2)内异症患者异位内膜中的NK细胞的功能可能受抑制 。

自然杀伤T细胞与子宫内膜异位症分期的关系

目的探讨自然杀伤T细胞（NKT）在子宫内膜异位症（EMT）发病机制的作用及其与分期的关系。方法I～Ⅳ期EMT患者各15例，采用流式细胞术检测其外周血及腹腔积液内NKT含量，用ELISA法检查细胞因子IFN-γ及IL-4的含量，并选取同龄段的20例健康志愿者作为对照。结果与对照组比较，I～Ⅳ期EMT患者外周血NKT、IFN-γ及IL-4均明显降低，且外周血及腹腔积液内以上三者的含量均呈现Ⅰ〉Ⅱ〉Ⅲ〉Ⅳ的关系，两组间的含量存在统计学差异（P〈0．05）。Spearman相关性分析显示，NKT、IFN-γ，及IL-4当中任意一个因素均与I、Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ的任意一期呈显著负相关性（r均大于0．06，P均小于0．05）。结论NKT及其细胞因子IFN—γ及1L-4在EMT发病机制当中具有重要作用，并且与EMT的分期密切相关，可能是该病的一组保护性因素。

异位子宫内膜组织自然杀伤细胞和造血祖细胞对子宫内膜异位症合并不孕术后妊娠结局的影响

目的探讨异位子宫内膜组织自然杀伤细胞和造血祖细胞(HPCs)对子宫内膜异位症(EMs)合并不孕术后妊娠结局的影响。方法选择116例EMs合并不孕症患者作为研究对象,采集患者异位子宫内膜组织和外周血,分离异位子宫内膜组织和外周血单个核细胞,采用流式细胞术检测子宫自然杀伤细胞(uNKs)和外周循环自然杀伤细胞(pbNKs)表型,同时检测异位子宫内膜组织和外周血HPCs比例,分析异位子宫内膜组织HPCs与妊娠结局的关系。结果 116例患者中,50例(43.1%)于术后自然妊娠(自然妊娠组),66例(56.9%)于术后行辅助生殖技术(ART)。66例行ART的EMs合并不孕症患者最终妊娠(辅助妊娠组)46例(69.7%),未妊娠(未妊娠组)20例(30.3%)。uNKs主要表型为CD56bright CD16-,pbNKs主要表型为CD56dimCD16+;未妊娠组、辅助妊娠组和自然妊娠组CD56bright CD16-和CD56dimCD16+的uNKs细胞和pbNKs细胞比例差异均无统计学意义(均P>0.05)。辅助妊娠组和自然妊娠组异位内膜组织CD34+HPCs比例明显高于未妊娠组,差异具有统计学意义(P<0.05);但3组外周血HPCs比例差异无统计学意义(均P>0.05)。异位子宫内膜组织HPCs细胞比例预测ART妊娠的曲线下面积(AUC)为0.889(95%CI:0.788～0.953),预测EMs患者术后总体妊娠的AUC为0.821(95%CI:0.739～0.886)。结论异位子宫内膜组织HPCs细胞比例在EMs术后成功妊娠和未妊娠的MEs患者中存在显著差异,有望成为预测EMs术后妊娠结局的预测指标之一。

子宫内膜异位症患者外周血及腹腔液中自然杀伤细胞的测定

很多证据表明子宫内膜异位症（ＥＭ）与免疫机能的改变有着密切的关系。自然杀伤（ＮＫ）细胞是人体免疫的第一线防御细胞，在体内多种生理及病理过程中均发挥着重要作用。本研究对ＥＭ患者外周血及腹腔液ＮＫ细胞活性及数量进行检测，以探讨ＮＫ细胞在ＥＭ发病机制中的作...

子宫内膜异位症患者腹腔液中自然杀伤细胞活性及细胞因子测定

目的 了解子宫内膜异位症 (内异症 )患者腹腔液中自然杀伤细胞 (NK细胞 )活性以及白细胞介素 -6(IL-6)、白细胞介素 -8(IL -8)、肿瘤坏死因子α(TNF -α)水平的变化及其意义。方法 从 3 2例内异症患者 (轻度组 13例 ,为Ⅰ ,Ⅱ期 ,重度组 19例 ,为Ⅲ ,Ⅳ期 )和 19例对照者 (对照组 ,为行输卵管结扎术和吻合术患者 )的腹腔液中获取自然杀伤细胞 ,同时收集上清液。用放射性同位素法测定NK细胞活性 ,用酶联免疫吸附法测定IL -6,IL -8和TNF -α的水平。结果 内异症轻度组和重度组NK细胞活性均显著低于对照组 (P <0 .0 1) ,重度组显著低于轻度组 (P <0 0 1) ,轻度组和重度组IL -6,IL -8及TNF -α水平均明显高于对照组 ,差异有极显著性 (P <0 0 1) ;重度组显著高于轻度组 (P <0 0 1)。结论 内异症患者腹腔液中免疫功能紊乱 ,NK细胞活性受损 ,细胞因子IL -6,IL -8,TNF -α产生过量 ,且NK细胞活性受损程度及产生细胞因子的量随疾病分期的增加而增高 。

子宫内膜自然杀伤细胞与妊娠关系的研究进展

子宫内膜自然杀伤(uNK)细胞是胚胎植入前内膜和早孕期蜕膜中数量最多的一类免疫细胞。母体的uNK细胞与胎儿的滋养层细胞相邻且相互作用。uNK细胞分泌一系列细胞因子和血管生长因子,调控滋养层细胞入侵并参与子宫螺旋动脉的重塑。uNK细胞数量的增多与反复种植失败(RIF)、复发性流产(RSA)有关。但仍需更多的研究阐明uNK细胞在胚胎种植过程中的具体作用、对内膜容受性的影响,以此作为临床治疗的依据。

活血化瘀、软坚散结法对子宫内膜异位症自然杀伤细胞活性影响的实验研究

目的 观察活血化瘀、软坚散结法 (代表方为妇痛宁颗粒 )对大鼠子宫内膜异位症模型自然杀伤 (NK)细胞活性的影响 ,分析其获效机制。方法 采用手术移植法制备大鼠子宫内膜异位症模型。实验共分 6组 ,即正常对照组、模型对照组和妇痛宁高、中、低剂量组及丹那唑组 ,每组 1 0只 ,观察 6组脾脏NK细胞活性。结果 模型对照组大鼠脾脏NK细胞活性显著低于正常对照组 (P <0 .0 1 )。妇痛宁高、中、低剂量组能够明显提高模型大鼠的脾脏NK细胞活性 ,与模型对照组比较有显著性差异 (P <0 .0 1 ) ,其中中剂量组疗效明显优于高剂量组 (P <0 .0 5 )。结论 子宫内膜异位症大鼠模型存在NK细胞功能异常。活血化瘀、软坚散结法的代表方妇痛宁颗粒冲剂对子宫内膜异位症模型大鼠脾脏NK细胞活性具有显著的调整作用 ,提示可能通过提高NK细胞活性达到治疗子宫内膜异位症的目的。

子宫内膜异位症患者腹腔液对正常自然杀伤细胞活性的抑制及与白介素-6、前列腺素的关系

目的 探讨子宫内膜异位症 (EM)患者的腹腔液 (PF)对自然杀伤 (NK)细胞的作用 ,以及与腹腔液中白细胞介素 6 (IL 6 )、前列腺素 (PGs)的关系。方法 采用乳酸脱氢酶 (LDH)释放法测定与EM患者PF共同孵育后正常人血NK细胞活性的变化。放免法测定腹腔液中PGs和IL 6的含量。结果 在作用 2h时 ,非EM患者和EM患者的PF对正常人外周血NK细胞活性的抑制率分别为 (37.1± 18.9) %和 (6 5 .2± 2 1.8) %,两者相比 ,差异具有显著性 (P <0 .0 1)。抑制率与EM临床分期呈正相关 (r=0 .6 0 2 3,P <0 .0 5 )。延长PF与淋巴细胞的作用时间 ,则PF对NK细胞活性的抑制率也随之升高。EMⅠ Ⅱ期的患者PF的IL 6含量 (0 .6 1± 0 .47)μg/L明显高于对照组 (0 .43± 0 .39) μg/L ,差异具有显著性 (P <0 .0 1) ,Ⅲ Ⅳ期组 (0 .49± 0 .36 ) μg/L与对照组相似 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。PF中IL 6的含量与其对NK细胞活性的抑制率之间差异无显著性 (r=0 .2 38,P >0 .0 5 )。EM患者PF中PGE2 和PGF2a含量均明显升高 ,其中Ⅰ Ⅱ期患者PF对NK抑制率与PGE2 含量呈正相关 (r=0 .5 13,P <0 .0 5 ) ;与PGF2α呈正相关 (r =0 .42 5 ,P <0 .0 5 )。结论 EM患者的PF对NK细胞活性具有明显的抑制作用 ,Ⅰ

T淋巴细胞、自然杀伤细胞和巨噬细胞在子宫内膜异位症在位内膜中的表达

目的通过观察子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)患者在位内膜中免疫细胞CD45RO、CD3、CD4、CD8、CD56和CD68阳性细胞数量表达,探讨T淋巴细胞、自然杀伤细胞和巨噬细胞在子宫内膜异位症在位内膜中的表达变化以及意义;方法应用免疫组织化学染色方法,采用CD45RO、CD3、CD4、CD8、CD56、CD68单克隆抗体对45例EMs患者在位内膜中的阳性细胞进行标记,测定其在EM患者在位内膜中的表达数量。同期选取16例宫颈原位癌非EMs患者作为对照;结果 EMs组和对照组在位内膜中均有CD45RO、CD3、CD4、CD8、CD56和CD68阳性细胞表达,EMs组在位内膜中的CD45RO、CD8、CD68阳性细胞数量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),CD3、CD4阳性细胞数量略高于对照组,差异无统计学意义(P>0.05),CD56阳性细胞数量较对照组无明显改变,差异无统计学意义(P>0.05)。CD4+/CD8+比值较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者分泌期内膜中CD45RO、CD3、CD4、CD8、CD56、CD68阳性细胞数量较增殖期增加,但差异无统计学意义(P>0.05);结论 EMs患者在位内膜中免疫细胞的数量变化影响机体免疫功能的改变,在EMs的发生、发展中起着重要作用。

子宫内膜异位症中骨桥蛋白对自然杀伤细胞杀伤功能的抑制作用

目的:观察骨桥蛋白(OPN)对自然杀伤(NK)细胞杀伤活性的影响,以探讨OPN在子宫内膜异位症中的作用。方法:用乳酸脱氢酶释放法测定不同浓度OPN及其抗体对NK细胞杀伤活性的影响;测定子宫内膜异位症患者腹水以及腹水中加入OPN抗体后对NK细胞杀伤活性的影响。结果:当OPN浓度为25、50、75、100、125、250、500ng/ml时,与对照组相比,NK细胞杀伤活性逐渐降低(P<0.05);但当OPN浓度为1 000ng/ml时,与浓度为500ng/ml时相比,NK细胞杀伤活性有所升高(P<0.05),但仍低于对照组(P<0.05)。当OPN与抗OPN的单克隆抗体共同孵育后,NK细胞的杀伤活性均有所升高(P<0.05)。子宫内膜异位症患者腹水可抑制NK细胞的杀伤活性(P<0.05);当在腹水中加入一定量的抗OPN单克隆抗体后,NK细胞的杀伤活性有所升高,但仍低于对照组(P<0.05)。结论:OPN可抑制NK细胞的杀伤活性,是子宫内膜异位症患者腹水中抑制NK细胞活性的因子之一。

子宫内膜异位症患者腹腔液中自然杀伤细胞活性及前列腺素和白介素-6水平的研究

目的探讨子宫内膜异位症(EM)患者的腹腔液(PF)中白细胞介素-6(IL-6)、前列腺素(PGs)的含量变化与PF对自然杀伤细胞(NK)活性影响的关系.方法选择42例EM患者作为观察组(EM组),13例症状相似的非EM患者作为对照组,采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定NK细胞活性.放射免疫法测定PF中PGs和IL-6的含量.结果作用2 h时,非EM患者和EM患者的PF对NK细胞活性的抑制率分别为34.8%±26.2%和66.1%±30.4%,两者比较有显著性差异(P<0.01).EM组抑制率与EM临床分期呈正相关(r=0.6207,P<0.01).EMⅠ～Ⅱ期患者PF的IL-6含量为0.62±0.45 μg/L,Ⅲ～Ⅳ期患者为0.48±0.35 μg/L,对照组为0.41±0.38 μg/L,三者间差异无显著性(P>0.05).PF中IL-6的含量与其对NK细胞活性的抑制率之间无显著相关(r=0.2231,P>0.05).EM患者PF中PGE2和PGF2ɑ含量均较对照组明显升高(P均<0.01),其中Ⅰ、Ⅱ期患者PF对NK细胞抑制率与PGE2、PGF2ɑ含量呈正相关(r=0.5098或0.4102,P均<0.01).结论 EM患者的PF对NK细胞活性具有明显的抑制作用,Ⅰ、Ⅱ期患者PF中PGs的增高可能对NK细胞活性有一定的抑制作用.