子宫珠蛋白相关蛋白1联合抗甲状腺过氧化物酶抗体定量检测在自身免疫性甲状腺疾病诊断中的应用

目的探讨并分析子宫珠蛋白相关蛋白1(UGRP1)联合抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)定量检测在自身免疫性甲状腺疾病诊断中的应用。方法回顾性选取2020年2月至2021年2月在本院确诊的52例自身免疫性甲状腺疾病患者作为观察组,根据病因不同分为毒性弥漫性甲状腺肿(Grave)组30例,桥本甲状腺炎(HT)组22例,另选同期在本院收治的42例非自身免疫性甲状腺疾病患者作为对照组。检测并比较三组患者的UGRP1、TPOAb水平,检测观察组患者的总三碘甲状腺原氨酸(TT3)、血清总甲状腺素(TT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)和促甲状腺激素(TSH)水平,ROC分析UGRP1联合TPOAb水平对自身免疫性甲状腺疾病的预测价值,采用Pearson相关性分析UGRP1、TPOAb与自身免疫性甲状腺疾病甲状腺功能的关系。结果HT组和Grave组的UGRP1、TPOAb水平均显著高于对照组(P<0.05);UGRP1、TPOAb及其联合检测诊断自身免疫性甲状腺疾病的AUC分别为0.773、0.813、0.898(P<0.05);HT组、Grave组患者的TT3、TT4、FT3、FT4水平均显著低于对照组,TSH水平显著高于对照组(P<0.05);UGRP1、TPOAb水平与甲状腺功能呈负相关关系(r=-0.224、-0.284,P<0.05)。结论UGRP1联合TPOAb诊断自身免疫性甲状腺疾病有较高的价值,可作为临床上检测的有效指标。

子宫珠蛋白与猫主要过敏原Fel d 1之间关系的生物信息学分析

目的:分析人子宫珠蛋白与猫主要过敏原Fel d 1之间关系。方法 :运用ClustalW 1.83和MEGA5.1 Beta3软件比较人分泌球蛋白家族序列及猫过敏原Fel d 1两个亚基P30438和P30440之间的进化树形图;采用在线软件平台NetMHCII 2.2比较分析P30438与子宫珠蛋白典型序列P11684之间抗原性差异;利用Swiss-Model程序模拟并比较P11684、P30438和P30440的三级结构。结果 :分泌球蛋白家族充斥着大量冗余数据,经逐步聚类收缩至13个代表性序列进一步分析发现,整个分泌球蛋白家族划分成两个大家族三个亚家族,而子宫珠蛋白典型序列与猫主要过敏原Fel d 1的一个亚基P30438之亲缘关系最近,两者均具有与HLA高亲和力结合位点,而且三级结构相似。结论:子宫珠蛋白具有潜在的过敏原性。

外源性子宫珠蛋白基因对宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨人子宫珠蛋白(UG)基因对宫颈癌Hela细胞系细胞增殖及凋亡的影响。方法构建真核细胞表达载体pcDNA3.1-UG(+),以脂质体介导法稳定转染体外培养的人宫颈癌Hela细胞,同时转染空载体pcDNA3.1质粒,以未转染细胞为对照,转染成功后分别命名为pcDNA3.1-UG(+)/Hela组、pcDNA3.1/Hela组、Hela组。应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、Westernblot方法分析目的基因表达,并采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞术检测细胞增殖和细胞凋亡。结果pcDNA3.1-UG(+)/Hela组UGmRNA及UG蛋白出现明显的高表达,与对照组细胞相比差异有统计学意义(P<0.05);pcDNA3.1-UG(+)/Hela组细胞生长速度明显慢于未转染Hela细胞,其细胞凋亡率与未转染Hela细胞相比差异也有统计学意义;然而pcDNA3.1/Hela组细胞生长速度和凋亡率均无明显变化。结论转染UG基因能诱导Hela细胞凋亡及抑制Hela细胞生长。

小鼠子宫珠蛋白结合蛋白真核表达载体构建及其在COS-1细胞的表达

目的:构建小鼠子宫珠蛋白结合蛋白(mouse uteroglobin binding protein,mUGBP)真核表达载体,观察其在COS-1细胞中的表达和定位。方法:用RT-PCR方法扩增mUGBP的cDNA序列,将其插入pEGFP-N1载体的多克隆位点构建pEGFP-UGBP重组质粒。采用脂质体转染法将重组质粒转染到无内源性mUGBP表达的非洲绿猴肾成纤维细胞株COS-1中,观察其在细胞内的表达,并用Western免疫印迹方法进行验证。结果:pEGFP-UGBP重组质粒经酶切鉴定以及测序证实,插入的目的基因序列完全正确。激光共聚焦显微镜观察发现,转染了pEGFP-UGBP重组质粒的细胞株可见绿色萤光蛋白的表达;Western免疫印迹检测发现细胞膜组分中可检获上述转染了重组质粒的细胞所表达的融合蛋白。结论:成功构建了pEGFP-UGBP重组质粒并进行了真核表达。

地塞米松对子宫珠蛋白相关蛋白1在哮喘小鼠的表达及影响的研究

目的观察子宫珠蛋白相关蛋白1(UGRP-1)基因在小鼠肺组织的表达及地塞米松对其的影响。方法将36只小鼠随机分为哮喘模型组、地塞米松干预组、空白对照组。用实时荧光定量PCR法分别检测小鼠末次激发后6 h和24 h肺组织UGRP-1 mRNA的量:用ΔΔCt法计算其相对值,作为标本的UGRP1基因在mRNA水平上的相对表达量,并用酶联免疫吸附法(ELISA)测肺泡灌洗液(BALF)中UGRP1水平。结果在末次激发后6 h处死的哮喘模型组及地塞米松干预组间UGRP-1 mR-NA量比较差异无统计学意义(P>0.05),但均显著低于空白对照组(P<0.05);在24 h处死的哮喘模型组、地塞米松干预组和空白对照组间肺组织UGRP-1 mRNA含量两两间比较差异有统计学意义(P<0.05),空白对照组表达最高,哮喘模型组最低。6 h处死的小鼠BALF中UGRP-1的量:地塞米松干预组和哮喘模型组差异无统计学意义(P>0.05),空白对照组含量最高;24 h处死的小鼠地塞米松干预组UGRP-1量较6 h批有明显升高(P<0.05),与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),哮喘模型组含量最低(P<0.05)。结论哮喘小鼠肺组织UGRP-1及其基因表达在6 h和24 h均较空白对照组明显降低;地塞米松能促进UGRP-1基因的表达,并能维持其蛋白的稳定。

子宫珠蛋白的结构与功能

子宫珠蛋白 (UG)是类固醇激素诱导的、进化保守的多功能蛋白 ,从其基因结构、蛋白质结构、分布调节、合成的机制及其功能等方面来看 ,UG通过其假定受体介导自分泌和旁分泌途径发挥作用 ,它可能属于细胞因子 /趋化因子家族 ,关于UG结构、调节和功能的阐明将为揭示人类一般疾病。

子宫珠蛋白相关蛋白1在肺癌中的研究进展

子宫珠蛋白相关蛋白1(UGRP1)为同型二聚体蛋白,是同源域转录因子甲状腺转录因子的下游靶点,在哺乳动物谱系肺组织中高表达。有研究表明,UGRP1与肺部病变的发生发展关系密切。本文从肺癌着手,介绍了UGRP1作为肺癌标志物、抑制肺癌生长等方面的相关研究,为肺癌的诊治提供新思路、新靶标。

子宫珠蛋白的生理和病理学意义

子宫珠蛋白作为一种进化过程中高度保守的分泌性蛋白 ,在生物体的多种组织器官有着不同的功能 ,对于维持胚胎发育的子宫环境、抑制正常细胞和一部分肿瘤细胞细胞外基质的侵入、阻止或抑制肿瘤细胞的侵袭与转移 ,以及抑制肾小球内纤维连结蛋白和胶原的沉积均有作用。

子宫珠蛋白与炎症控制

子宫珠蛋白（UG）是一种进化保守的分泌型蛋白，它的结构已为人们所知，现在其生理功能吸引了大批学者研究。大量研究集中在对其抗炎症和免疫调节方面的功能上。UG具有抗趋化、抗变应性、抗肿瘤生成，并可刺激胚胎生长，是一种多功能蛋白质。

子宫珠蛋白与子宫内膜癌

子宫珠蛋白(UG)是类固醇激素诱导分泌的、进化上高度保守的多功能蛋白。UG具有肿瘤抑制、抗炎及免疫调节等多种生物学活性,人的UG基因定位在染色体11q12.3-13.1,此区域是在许多癌症中被经常重排和删除的区域。本文就UG的结构、分布、生物学功能及其在正常子宫内膜和子宫内膜癌中的表达等方面的进展进行综述。

小鼠子宫珠蛋白结合蛋白的生物信息学分析及其多克隆抗体制备

本文旨在制备小鼠子宫珠蛋白结合蛋白(mouse uteroglo binbinding protein,mUGBP)多克隆抗体,为后续研究工作奠定基础。通过生物信息学分析方法预测mUGBP蛋白的跨膜结构、理化特性、疏水性等因素,设计出两段多肽,分别与匙孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)交联后免疫新西兰兔,结果显示其中一个含13个氨基酸残基的多肽序列(221st～233rd)可用作抗原免疫动物,并成功获得高效价的抗mUGBP多克隆抗体。通过ELISA法检测其效价为1:108,亲和层析纯化后Westernblot检测抗体特异性,并将制备的抗体应用于免疫印迹及人和小鼠肺组织免疫组织化学和免疫荧光检测,结果显示本研究制备的抗体具有特异性,且用该抗体成功在人和小鼠气道上皮细胞和肺血管内皮细胞检测到UGBP蛋白表达。结果表明,本研究通过生物信息学方法成功预测了抗原表位,并据此预测成功制备了高效价、高特异性的抗mUGBP多克隆抗体。

子宫珠蛋白结合蛋白在antiflammin-1促进LPS诱导的RAW264.7细胞IL-10表达和分泌中的作用

本文旨在观察antiflammin-1(AF-1)预处理对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的RAW264.7细胞白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)分泌的影响,并探讨子宫珠蛋白结合蛋白(uteroglobin-binding protein,UGBP)在介导AF-1对LPS诱导的巨噬细胞IL-10分泌及表达影响中的作用。将RAW264.7细胞分为空白对照组、LPS组(1μg/mL LPS)、AF-1组(100μmol/LAF-1)、AF-1+LPS组(100μmol/LAF-1预处理2h后,加入LPS)及抗UGBP抗体+AF-1+LPS组(抗-UGBP抗体预处理30min后,再依次用AF-1和LPS处理),用ELISA法、RT-PCR法分别检测各组IL-10蛋白分泌和mRNA表达。结果显示,AF-1预处理呈剂量依赖性显著增加LPS诱导的RAW264.7细胞IL-10分泌,并上调IL-10mRNA水平;而抗UGBP抗体预处理可显著抑制AF-1的促IL-10分泌和上调mRNA表达作用。以上结果提示,AF-1可促进LPS诱导的巨噬细胞IL-10的分泌和mRNA表达,且该作用依赖于UGBP的介导。

子宫珠蛋白相关蛋白1在肺部炎性疾病及其发育中的作用

子宫珠蛋白相关蛋白1（UGRP-1）为子宫珠蛋白／clara细胞分泌蛋白（UG／CCSP）超家族成员，分布于人类肺组织，为一同型二聚体蛋白，含91个氨基酸残基，人类UGRP-1基因定位于染色体5q31-34。UGRP-1与气道变态反应关系密切，在肺部表达可抑制变态炎症反应，在动物哮喘模型中其含量显著降低；最近研究发现UGRP-1为一肺生长因子，在肺发育全过程均发挥作用。本文就UGRP-1的结构特点，生物学功能以及在肺部疾病，尤其是涉及气道变态反应机制的研究进展进行综述。

过敏性紫癜与子宫珠蛋白基因多态性的相关性研究

目的探讨子宫珠蛋白基因多态性与过敏性紫癜、紫癜性肾炎发病易感性和临床、病理表型的联系。方法过敏性紫癜患儿118例，包括80例肾炎患者（紫癜性。肾炎患者）和38例无肾炎患者，正常儿童100例。提取静脉血白细胞基因组DNA，PCR—RFLP法确定子宫珠蛋白基因G38A基因型。用χ^2检验比较各组子宫珠蛋白不同基因型频率及不同基因型的紫癜性肾炎患者临床和肾脏病理特征。结果过敏性紫癜各组分别与正常对照组比较，肾炎组与无肾炎组比较，子宫珠蛋白基因3种基因型（38GG、38AG、38AA）频率差异无统计学意义（P〉0．05）。三种基因型与过敏性紫癜四种临床表型以及紫癜性肾炎患者肉眼血尿、肾病综合征等临床表型和肾脏病理损害等级无关（P〉0．05）。过敏性紫癜伴血清IgE增高组38AA型频率较血清IgE正常组明显升高（χ^2=21．95，P〈0．01，OR=15．51，95％CI为4．93．48．84）。紫癜性肾炎伴高血压组38GG型频率较无高血压组显著升高（χ^2=26．17，P〈0，01，OR=13．61，95％CI为5．01～37．01）。结论子宫珠蛋白基因G38A多态性与过敏性紫癜、紫癜性肾炎易感性及肾脏病理损害程度无关，而子宫珠蛋白基因38AA型的过敏性紫癜患者可能容易出现血清IgE增高，38GG型的紫癜性肾炎患者可能容易出现高血压。

血液CC16、PCT、FKN水平与慢性阻塞性肺疾病患者衰弱的临床研究

目的探讨血清Clara细胞分泌蛋白(Clara cell secretory protein,CC16)、降钙素原(procalcitonin,PCT)、不规则趋化因子(fractalkine,FKN)水平与慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者衰弱的预测价值。方法选取老年COPD患者142例,依据入院时Frail衰弱筛查量表分为2组,评分3~5分为衰弱组43例,评分<3分为非衰弱组99例(随机选取43例为对照组),对比2组肺功能、血清CC16、PCT及FKN水平差异,采用Pearson相关性分析血液指标与COPD患者肺功能的相关性,Logistic回归分析诱发COPD患者衰弱的影响因素,利用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析阳性指标在预测衰弱风险的价值。结果衰弱组血清CC16显著低于对照组,而PCT及FKN水平明显高于对照组,数据差异有统计学意义(P<0.05);COPD伴衰弱组第1秒用力呼气容积(exhale volume by force 1 second,FEV1),用力肺活量(forced vital capacity,FVC)及FEV1/FVC水平均显著低于对照组(P<0.05);Pearson相关性分析显示,血清CC16与肺功能指标均呈正相关(P<0.05);血清PCT、FKN水平与肺功能指标均呈负相关(P<0.001)。Logistic回归分析显示,血清学指标CC16、PCT、FKN均是影响老年COPD患者衰弱的影响因素,其中CC16为保护性因素(P<0.05);CC16、PCT及FKN水平与老年COPD患者衰弱发生密切相关,并且均可作为预测衰弱风险的检ROC曲线分析显示,PCT曲线下面积最大0.890(0.824~0.956),FKN次之为0.830(0.742~0.914),CC16最小0.771,3项指标均具有预测老年COPD患者衰弱的价值(P<0.05)。结论血清CC16、PCT及FKN水平与老年COPD患者衰弱发生密切相关,并且均可作为预测衰弱风险的检测指标。

血清 SP-D、CC16在 AECOPD 患者中的表达及其意义

【目的】探讨血清肺表面活性物质相关蛋白 D（SP-D）、人克拉拉细胞蛋白（CC16）在慢性阻塞性肺疾病急性加重（AECOPD）患者中表达水平及其意义。【方法】选择 AECOPD 患者69例（观察组）,另外选取同期健康体检者50例（对照组）,采用双抗体夹心法（ELISA）检测两组治疗前后血清 SP-D、CC16水平和肺功能指标如用力肺活量（FVC）、第1秒用力呼气容积（FEV1）、FEV1/FVC 及 FEV1占预计值的百分比（FEV1%）,并分析 SP-D、CC16水平与肺功能指标的相关性。【结果】与对照组相比,AECOPD 患者的血清 SP-D 水平显著升高,而 CC16水平显著下降；经治疗病情好转后,患者血清 SP-D 水平下降,而 CC16水平上升,但仍未到达对照组的正常水平；治疗后,观察组 FEV1%及 FEV1/FVC 均升高,但仍低于对照组,差异有统计学意义（P ＜0.05）。SP-D 与 FEV1%及 FEV1/FVC 呈负相关性（P ＜0.05）；CC16与 FEV1%及 FEV1/FVC 呈正相关性（P ＜0.05）。【结论】SP-D、CC16的水平是反映 AECOPD 疗效的重要指标,可通过检测血清 SP-D、CC16水平可评估 COPD 患者病情严重程度。

IL-10对LPS诱导的急性肺损伤大鼠肺UGRP1及炎症因子的影响

目的探讨白介素-10(IL-10)对急性肺损伤大鼠肺子宫珠蛋白相关蛋白1(UGRP1)及炎症因子的影响。方法将30只6周龄雄性Wistar大鼠分为对照组(C组)、急性肺损伤组(M组)、IL-10干预组(T组),每组各10只。M组及T组通过气管插管内给予2 mg/kg的LPS建立急性肺损伤模型,C组给予等量的生理盐水;T组在建模前30 min,腹腔注射IL-10溶液。观察各组肺组织病理学改变,检测各组肺泡灌洗液中炎症因子[白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]及肺组织UGRP1基因及蛋白表达水平。结果与C组比较,M组肺泡灌洗液中炎症因子表达增加,肺组织UGRP1基因及蛋白表达降低(P<0.05);与M组比较,T组肺泡灌洗液中炎症因子表达减少,肺组织UGRP1基因及蛋白表达升高(P<0.05);相关性分析显示,大鼠肺UGRP1表达与炎症因子(IL-1β、IL-6及TNF-α)均呈负相关(P<0.05)。结论IL-10能抑制急性肺损伤大鼠肺炎症反应,可能与增加肺UGRP1表达有关。

sTREM-1联合CC16对老年AECOPD患者预后不良的预测效能

【目的】探讨可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)联合Clara细胞分泌蛋白(CC16)对老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期(AECOPD)患者预后不良的预测效能。【方法】选取2019年2月至2020年3月在本院诊治的206例COPD患者,其中AECOPD患者108例(A组),稳定期COPD患者98例(B组),另外选择同一时间段在本院进行体检的95例健康志愿者(C组)。对比三组血清sTREM-1、CC16水平;统计AECOPD患者预后不良发生情况,并依据预后情况分为预后不良组和预后良好组;对比预后不良组和预后良好组临床资料;Logistic回归分析AECOPD患者预后的影响因素;制作受试者工作特征曲(ROC),分析sTREM-1联合CC16对老年AECOPD患者预后不良的预测效能。【结果】A组、B组sTREM-1水平均明显高于C组(P<0.05),CC16水平均明显低于C组(P<0.05);A组sTREM-1水平明显高于B组(P<0.05),CC16水平明显低于B组(P<0.05)。AECOPD患者中预后不良发生率为25.93%(28/108);预后不良组机械通气时间、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、sTREM-l水平显著高于预后良好组(P<0.05),预后不良组肺活量(FVC)、第一秒用力呼气容积(FEV1)、CC16水平则显著低于预后良好组(P<0.05)。Logistic回归显示CRP、sTREM-1、CC16均为AECOPD患者预后不良的影响因素(P<0.05);ROC分析显示,sTREM-l、CC16水平预测老年AECOPD患者预后不良的最佳截断点分别为161.25 ng/L、65.83μg/L。sTEEM-1、CC16两者联合的特异度为96.25%,显著高于血清sTEEM-1、CC16水平单独进行评估的特异度,且sTREM-1、CC16两者联合预测老年AECOPD患者预后不良的曲线下面积(AUC)为0.923,高于血清sTREM-l、CC16水平单独预测的AUC(P<0.05)。【结论】STREM-1联合CC16预测老年AECOPD患者预后不良的预测效能较高,可用于对老年AECOPD患者预后不良的预测。

重组人胰岛素样生长因子1对高氧暴露下新生大鼠肺组织Clara细胞分泌蛋白表达的影响

目的探讨重组人胰岛素样生长因子1(rh-IGF-1)对高氧暴露下的新生大鼠肺损伤的影响。方法将生后2d 的 Wistar 大鼠80只,随机分为4组。Ⅰ组:空气组;Ⅱ组:高氧组;Ⅲ组:空气+rh-IGF-1组;Ⅳ组:高氧+rh-IGF-1组。Ⅱ组和Ⅳ组大鼠持续暴露于85%O_2中,Ⅰ组和Ⅲ组大鼠呼吸空气。Ⅲ组和Ⅳ组从第3天起每日腹腔注射rh-IGF-1,1μg/Kg。于高氧暴露后7d 取肺组织,用免疫组化方法检测肺内 CC10表达变化,用 TUNEL 方法检测肺细胞凋亡。结果免疫组化结果阳性染色主要分布于终末及呼吸性细支气管上皮细胞。Ⅱ组终末和呼吸性细支气管上皮 Clara 细胞占上皮细胞的百分率(32.17±3.19)%和免疫阳性强度(29.45±5.56),均明显少于Ⅰ组的测定值(68.32±2.04)%和(42.37±3.24),差异均有统计学意义(P<0.01);Ⅱ组肺组织细胞凋亡指数(55.77±6.09)%明显高于Ⅰ组的测定值(16.41±4.01)%,差异有统计学意义(P<0.01);Ⅳ组的Clara 细胞百分率(52.98±2.68)%和免疫阳性强度(41.22±6.36)较Ⅱ组明显增加,Ⅳ组的细胞凋亡指数(27.98±3.09)%明显低于Ⅱ组的测定值,差异均有统计学意义(P<0.01)。而Ⅰ组与Ⅲ组之间差异无统计学意义(P>0.01)。结论高氧诱导肺细胞凋亡、抑制肺内 CC10分泌,而 rh-IGF-1通过抑制肺细胞凋亡,能够有效抑制 CC10分泌的减少,减轻气道炎症反应,抑制肺泡化阻滞,对高氧性肺损伤起保护作用。