大鼠子宫肌瘤模型造模方法研究进展

子宫肌瘤是女性生殖系统最常见的肿瘤之一。大鼠子宫肌瘤模型是临床前研究的重要载体,对评判药物效能具有重要作用。大鼠子宫肌瘤模型的造模方法以化学诱导法最为常见,此文对化学诱导法中的雌激素单模法,雌孕激素双重造模法,雌孕激素负荷结合多因素刺激法等具体造模方法的差异进行总结,旨在为临床治疗子宫肌瘤提供技术和理论支持。

雌激素制备大鼠子宫肌瘤动物模型

目的建立子宫肌瘤动物模型,明确相关机制。方法性成熟雌性大鼠肌注200μg和300μg雌激素(E2),每周2次,持续8周和10周后处死,观测血清中E2和孕激素(P)水平,及肌瘤中雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)表达水平,计算肌瘤形成率和动物死亡率。HE染色对大鼠子宫肌瘤与人子宫肌瘤进行病理组织学比较,确定E2诱导大鼠子宫肌瘤形成的最佳剂量和给药周期。结果肌注E2 200μg 8周后,大鼠血清E2水平显著升高(P<0.01),肉眼可见肌瘤形成。病理组织学检查显示与人子宫肌瘤相似,肌瘤组织中ER、PR表达明显增强。结论大鼠肌注E2 200μg/只,2次/周,连续8周可建立与人相似的子宫肌瘤动物模型。动物子宫局部组织高浓度ER、PR与子宫肌瘤发生有关。

化瘀消疒徵软胶囊对子宫肌瘤模型大鼠的作用

目的:探讨化瘀消疒徵软胶囊对子宫肌瘤模型大鼠的作用。方法:雌性大鼠用苯甲酸雌二醇加注黄体酮复制子宫肌瘤病模大鼠,造模同时给药治疗。结果:化瘀消疒徵软胶囊能明显降低肌瘤大鼠血清中雌激素水平,降低模型大鼠子宫指数,改善子宫组织病理状况,同时增加凋亡指数。结论:化瘀消疒徵软胶囊对实验性子宫肌瘤有一定的防治作用。

金草片对子宫肌瘤模型大鼠免疫功能的干预作用

目的:探讨金草片对子宫肌瘤模型大鼠免疫功能的干预作用及该模型与临床发病机制的相关性。方法:大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组,金草片高、中、低剂量组,以雌激素和雌、孕激素肌肉注射造成大鼠子宫肌瘤模型,观察模型大鼠胸腺、脾脏、子宫和卵巢质量,用流式细胞仪测定其T细胞亚群CD3,CD4和CD8的水平,用放射配体结合分析法测定雌激素受体水平,进行子宫组织的病理检查。结果:模型组大鼠表现出其免疫器官胸腺质量降低,子宫质量增加,卵巢质量降低;CD3,CD4和CD4/CD8明显降低,CD8明显升高;雌激素及其受体水平升高;子宫组织呈明显病变,金草片剂量组与模型组比较,检测各指标差异显著。结论:金草片对模型大鼠的免疫功能低下状态表现为明显对抗作用,调节免疫功能可能是其治疗子宫肌瘤的作用机制之一。

大鼠荷子宫肌瘤组织移植瘤模型的建立

目的通过对应用免疫抑制剂的大鼠进行组织移植的方法,建立大鼠荷子宫肌瘤组织移植瘤模型,为研究子宫肌瘤的研究提供新的动物模型。方法术前两周开始,大鼠予免疫抑制剂吗替麦考酚酯(mycophenolate mofetil,MMF)灌胃,持续至整个实验结束。将20只Wistar大鼠随机分为4组,按照腹腔移植术后补充的不同激素分别为A组(芬吗通)、B组(雌二醇)、C组(达芙通)、D组(对照组),术后4周取材,观察肌瘤形态及组织形态学。结果 A组造模成功率90%,B组造模成功率40%,C组、D组造模成功率为0。结论大鼠荷子宫肌瘤移植瘤模型成功率高,成本低,可作为新的研究子宫肌瘤移植瘤的动物模型。

橘荔散结丸对子宫肌瘤模型大鼠子宫肌层ER、PR和EGFR表达的影响

【目的】观察橘荔散结丸对子宫肌瘤模型大鼠雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、表皮生长因子受体(EGFR)表达及组织病理学的影响,探讨橘荔散结丸治疗子宫肌瘤的作用机制。【方法】选用SD大鼠,随机分为空白对照组,模型对照组,西药对照组(米非司酮,剂量为4.7 mg/kg),中药对照组(桂枝茯苓胶囊,剂量为0.52 g/kg),橘荔散结丸低、中、高剂量组(中药低、中、高剂量组,剂量分别为9.86、19.73、39.45 g/kg);除空白对照组外,其他组均采用雌、孕激素负荷法复制子宫肌瘤大鼠模型,观察各组大鼠子宫肌层ER、PR和EGFR的表达及病理学改变。【结果】模型对照组大鼠子宫明显增大,子宫肌细胞排列紊乱,子宫肌层ER、PR和EGFR的表达均显著高于空白对照组(P<0.05);橘荔散结丸各剂量组子宫平滑肌排列趋于正常,子宫肌层ER、PR和EGFR的表达明显下降,其中中剂量组与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】橘荔散结丸治疗子宫肌瘤的作用机制可能与其能抑制子宫肌层ER、PR和EGFR的表达有关。

大鼠子宫肌瘤两种模型比较与免疫功能的相关性研究

目的:比较雌激素和雌、孕激素合用所致大鼠子宫肌瘤模型与其免疫功能的相关性。方法:分别以雌激素和雌、孕激素肌肉注射造成大鼠子宫肌瘤模型,并在此模型上观察大鼠免疫器官,用流式细胞仪测定其T细胞表面分化群CD3、CD4和CD4/CD8的水平,用放射配体结合分析法测定雌激素受体水平。结果:雌、孕激素致大鼠子宫肌瘤模型表现出其免疫器官胸腺重量降低;CD3、CD4和CD4/CD8明显降低,CD8明显升高;雌激素及其受体水平升高。结论:雌、孕激素致子宫肌瘤模型大鼠表现为免疫功能明显低下,雌激素受体水平是其主要影响因素之一。

长期与短期双模法子宫肌瘤大鼠模型制备的比较

目的:比较2种双模法子宫肌瘤大鼠模型的制备方法。方法:采用2种不同双模法制备子宫肌瘤大鼠模型。短期模型组每日腹腔注射苯甲酸雌二醇注射液,0.5 mg/g,每日1次,连续25 d后改为腹腔注射黄体酮注射液4 mg/g,每日1次,连续5 d;对照组腹腔注射等量灭菌花生油。长期模型组隔日肌注苯甲酸雌二醇注射液0.5 mg/g,3次/周,12周后加肌注黄体酮注射液5μg/g,2次/周,连续4周;对照组肌注等量灭菌花生油。结果:造模后大鼠全血黏稠度明显降低,以长期模型组较为显著,2造模组血浆黏度均有所增高;短期模型组大鼠虽子宫肌层呈现不同程度的增厚及改变,但以长期造模法改变明显,综合评价优于短期造模法。结论:2造模组大鼠都可能有血瘀的改变,与短期双模法相比,长期双模法可成功造成大鼠子宫肌瘤模型,且出现贫血改变。

金草片对子宫肌瘤模型大鼠子宫组织一氧化氮合酶表达的影响

目的:探讨金草片对子宫肌瘤模型大鼠子宫组织一氧化氮合酶(NOS)表达的影响,及该模型与临床发病机理的相关性。方法:以雌激素和雌、孕激素肌肉注射造成大鼠子宫肌瘤模型,测定子宫组织的总型NOS和诱导型NOS(iNOS)的水平;用放射配体结合分析法测定子宫组织雌激素受体(ER)水平;用放射免疫法测定血清雌二醇(E2)和孕酮(P)水平。结果:模型组大鼠子宫组织总型NOS和诱导型iNOS表达均明显增强,E2、ER和P水平升高;P水平与NOS表达相关,与iNOS表达不直接相关。金草片组可明显降低子宫组织NOSi、NOS和ER表达,降低血清E2和P水平,与模型组比较差异显著。结论:金草片可抑制子宫肌瘤模型大鼠子宫组织NOS表达,其作用可能是该品种治疗子宫肌瘤的作用机理之一。

大鼠子宫肌瘤模型的建立以及雌孕激素两种联用方法造模结果的比较

目的:建立子宫肌瘤大鼠模型并比较两种模型制备方法的优劣。方法:27只SD大鼠随机分为正常对照组、全程联用组、后期加入孕激素组。正常对照组:每周3次仅肌注生理盐水,持续12周。全程联用组:全程每周3次肌注苯甲酸雌二醇0.05m L,及每周1次肌注黄体酮0.05 m L,连续12周进行造模。后期加入孕激素组:开始每周3次仅肌注苯甲酸雌二醇0.05 m L,连续8周,从第9周起每周1次加注黄体酮0.05 m L,连续4周,整个造模过程持续12周。观察大鼠子宫形态,检测血清雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)水平及大鼠子宫ER、PR的表达。结果:正常对照组大鼠子宫质地均匀,未见结节或囊肿,后期加入孕激素组和全程联用组2个模型组大鼠解剖时可见子宫形态改变、增生,个别子宫角可见肿块。正常组大鼠子宫平滑肌肌层较薄,平滑肌细胞细长,排列整齐。后期加入孕激素组、全程联用组大鼠子宫平滑肌呈不同程度的增生,平滑肌细胞排列紊乱,肌纤维排列疏松,肌纤维或较长或粗短,肌纤维束之间有或多或少的结缔组织纤维。与正常对照组比较,后期加入孕激素组、全程联用组大鼠血清雌激素受体(ER)与孕激素受体(PR)水平均明显升高,子宫ER和PR的阳性表达率明显较高,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:两种方法均能成功制备子宫肌瘤大鼠模型,其中全程联用法较优。

子宫肌瘤大鼠模型制备方法之比较

目的比较两种子宫肌瘤大鼠模型的制备方法。方法采用单用己烯雌酚肌注(单模法)和己烯雌酚与黄体酮共同肌注(双模法)的方法制备子宫肌瘤大鼠模型。结果两种方法均能制备子宫肌瘤大鼠模型,子宫肌瘤大鼠出现血清性激素水平升高、免疫功能低下及肌细胞高度增生活跃的病理状态,综合评价双模法优于单模法。结论两种方法均能成功制备子宫肌瘤大鼠模型。

子宫肌瘤病因分析及其大鼠模型的制备研究

目的探讨子宫肌瘤病因及其大鼠模型的制备。方法20只健康未孕SD大鼠随机分成两组:空白组和模型组。模型组给予己烯雌酚0.1m1,黄体酮0.1ml,股内侧肌肉肌注,每只每日1次,共30日。实验结束后,检测血清雌激素(E2)、孕激素(P)、促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、血清IL-2、TNF-α水平。结果模型组与空白组比较,血清FSH、LH、E2及P含量均明显升高,血清IL-2值降低,TNF-α明显升高,具有显著性差异。结论大鼠子宫肌瘤模型制造成功。肌瘤的发生、发展上雌激素、孕激素均有重要作用。

植物性雌激素对子宫肌瘤模型大鼠血清中E_2、P及EGF的影响

目的观察植物性雌激素对子宫肌瘤模型大鼠雌二醇(E2)、孕激素(P)及表皮生长因子(Epidermal Growth Factor,EGF)的影响。方法采用Fujii的方法复制子宫肌瘤大鼠模型,并连续给予豆类植物性雌激素12周后观察各组大鼠血清中E2、P及EGF的含量。结果植物性雌激素能提高子宫肌瘤模型大鼠血清中E2、P及EGF的含量,且以高剂量组效果最显著(P<0.01)。结论植物性雌激素对子宫肌瘤模型大鼠具有加重的作用。

肌瘤消颗粒对子宫肌瘤模型大鼠干预作用的研究

目的 :观察经验方肌瘤消颗粒对子宫肌瘤模型大鼠的干预作用 ,评价其临床使用价值。方法 :( 1)同种大鼠根据Fujii方法造模后 ,分成高、中、低剂量组 ,模型组 ,桂枝茯苓胶囊对照组 ,进行子宫肌瘤生长情况的形态学观察 ;( 2 )同种大鼠造模后分成模型组 ,桂枝茯苓胶囊对照组和肌瘤消颗粒七个不同剂量组 ,用放射免疫法测定雌二醇水平。结果 :( 1)肌瘤消颗粒显著抑制模型大鼠瘤样增生 ,以高剂量组效果最显著 (P<0 .0 1) ;( 2 )能明显抑制模型大鼠子宫形态与重量的改变 (P <0 .0 1) ;( 3 )能显著降低模型大鼠血液中雌激素的水平 (P <0 .0 1)。结论

桂枝茯苓丸对子宫肌瘤模型大鼠的作用机制

目的:评价桂枝茯苓丸对子宫肌瘤模型大鼠的疗效,同时观察其对子宫组织病理及PI3K-AKT信号通路的作用。方法:选取90只雌性SD大鼠并随机分为空白组、模型组及中药组,每组30只。模型组及中药组大鼠进行苯甲酸雌二醇注射液腹腔注射模拟子宫肌瘤模型,空白组大鼠接受等剂量生理盐水腹腔注射,造模成功后中药组大鼠进行桂枝茯苓丸灌胃,空白组及模型组大鼠接受等剂量生理盐水灌胃,1次/d,连续灌胃18d。比较各组大鼠子宫湿重、子宫系数、子宫平滑肌层厚度变化,用Masson染色比对各组大鼠子宫组织病理的变化,用Westernblotting检测子宫组织PI3K、AKT、p-AKT水平的变化,免疫组织化学法检测各组雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达。结果:与空白组比较,模型组及中药组的子宫湿重、子宫系数及子宫平滑肌层厚度明显增加,中药组上述指标明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);Masson染色显示空白对照组子宫组织切片着色为红色,极少量染色纤维组织;模型组大鼠子宫环行肌和纵行肌可见大量的深蓝色纤维组织,甚至部分肌层组出现明显的团块状纤维结构;中药组大鼠子宫组织的纤维化程度明显受到抑制。与空白组比较,模型组及中药组大鼠子宫组织的PI3K、p-AKT水平上调,T-AKT各组水平差异无统计学意义(P>0.05),其中中药组PI3K、p-AKT水平较模型组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白组比较,模型组及中药组子宫平滑肌ER及PR阳性表达率升高,其中中药组低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:桂枝茯苓丸可明显抑制子宫肌瘤的发生发展,其作用机制可能是通过PI3K-AKT信号通路介导孕激素/雌激素受体实现的。

子宫肌瘤动物模型相关生物标记物的研究

目的:寻找与大鼠子宫肌瘤模型相关的生物标记物,探讨标志模型成功及药物有效性评价的动态和无损伤性指标。方法:采用基于核磁共振谱(NMR)的代谢组学方法,动态收集大鼠子宫肌瘤模型造模不同时间点的尿液,测定其NMR,并结合组织病理学检查,验证其生物标记物。结果:与空白组比较,在造模不同时间点,模型组大鼠尿液的代谢状态和代谢产物表型有显著性差异,其尿液中与模型相关的乙酸酯、牛磺酸、二甲胺和氧化三甲胺的NMR谱峰在造模后8周有显著改变;空白组、模型组和米非司酮组在主成分分析图上可明显分开,其中米非司酮组位于模型组和空白组之间;同时在造模不同时间点,子宫组织出现不同程度的病理改变。结论:NMR图谱中的谱峰变化能反映不同造模阶段的整体状态,其中乙酸酯、牛磺酸、二甲胺和氧化三甲胺的谱峰改变可作为子宫肌瘤大鼠模型的早期生物标记物及药物有效性评价的动态观察指标。

化瘀消疒徵软胶囊对子宫肌瘤大鼠血液流变性的影响

目的探讨化瘀消疒徵软胶囊对子宫肌瘤模型大鼠血瘀证的影响。方法雌性大鼠雌、孕激素负荷复制子宫肌瘤动物模型,采用比浊法测定血小板聚集率,血流变仪检测血液流变学指标。结果化瘀消疒徵软胶囊能明显抑制肌瘤大鼠的血小板聚集;改善血液流变学各项指标。结论化瘀消疒徵软胶囊能改善子宫肌瘤大鼠的血瘀病理变化,有明显的活血化瘀功效。

子宫肌瘤动物造模的研究进展

子宫肌瘤是子宫平滑肌组织增生而形成的良性肿瘤,是女性最常见的肿瘤。目前子宫肌瘤发生的确切病因尚未明确。子宫肌瘤是子宫切除术常见的临床特征,但子宫切除术会严重损害女性的生育力。对于无症状以及有生育需求的女性,药物治疗仍然是最佳选择。因此,需要借助动物模型探寻肌瘤的发病机制并筛选有效的药物服务于临床。

子宫肌瘤大鼠血浆的代谢组学研究

目的:研究子宫肌瘤模型大鼠造模过程中血浆代谢表型的动态变化及其与组织病理和生化指标的相关性,探讨标志模型成功及药物有效性评价的动态和无损伤性生物标记物指标。方法:于造模过程中4个不同时间点收集大鼠血浆,采用基于核磁共振谱(nuclear magnetic resonance,NMR)的代谢组学方法,测定其NMR,同时进行组织病理学检查和相关生化指标测定。结果:造模不同阶段模型组大鼠血浆的代谢谱与空白对照组比较均有显著差异,随着造模时间的延长,模型组大鼠血浆的代谢谱呈现出不同变化,其变化与子宫组织病理学和免疫组化指标改变相一致。结论:子宫肌瘤模型大鼠血浆代谢谱的谱峰变化能反映造模不同阶段动物的整体病理状态,并且该代谢谱的检测较病理检测便捷、无损伤,可作为子宫肌瘤大鼠模型的早期生物标记物性指标和药物有效性筛选的动态观测指标。