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利用子房滴注法获得无载体骨架序列和选择标记的转基因玉米
被引量:
7
1
作者
杨爱馥
苏乔
安利佳
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期95-100,共6页
转基因植物中的载体骨架序列和选择标记基因是引起生物安全性争论的根本原因,最直接、最有效的解决方法是在转化过程中不使用载体骨架序列和选择标记基因。本研究建立并优化了玉米子房滴注转化法,其操作要点是将DNA转化溶液直接滴加在...
转基因植物中的载体骨架序列和选择标记基因是引起生物安全性争论的根本原因,最直接、最有效的解决方法是在转化过程中不使用载体骨架序列和选择标记基因。本研究建立并优化了玉米子房滴注转化法,其操作要点是将DNA转化溶液直接滴加在完全去除花柱的子房上。利用子房滴注法将无载体骨架序列和选择标记的线性GFP基因表达框转化玉米。PCR结果表明:适合子房滴注法转化的玉米品种为9818,最佳转化时间为授粉后18~20 h,在此条件下得到最高的PCR阳性率,为3.01%;Southern blotting结果表明外源基因的整合方式简单(1~2条杂交带);RT-PCR结果表明转基因植株中GFP基因能够在RNA水平上正常表达;在转基因植株的根和幼胚中观察到GFP表达。
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关键词
GFP
无载体骨架
无选择标记
子房滴注法
转基因玉米
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职称材料
题名
利用子房滴注法获得无载体骨架序列和选择标记的转基因玉米
被引量:
7
1
作者
杨爱馥
苏乔
安利佳
机构
大连理工大学环境与生命学院
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期95-100,共6页
基金
辽宁省科技攻关项目(编号:2006208001)资助
文摘
转基因植物中的载体骨架序列和选择标记基因是引起生物安全性争论的根本原因,最直接、最有效的解决方法是在转化过程中不使用载体骨架序列和选择标记基因。本研究建立并优化了玉米子房滴注转化法,其操作要点是将DNA转化溶液直接滴加在完全去除花柱的子房上。利用子房滴注法将无载体骨架序列和选择标记的线性GFP基因表达框转化玉米。PCR结果表明:适合子房滴注法转化的玉米品种为9818,最佳转化时间为授粉后18~20 h,在此条件下得到最高的PCR阳性率,为3.01%;Southern blotting结果表明外源基因的整合方式简单(1~2条杂交带);RT-PCR结果表明转基因植株中GFP基因能够在RNA水平上正常表达;在转基因植株的根和幼胚中观察到GFP表达。
关键词
GFP
无载体骨架
无选择标记
子房滴注法
转基因玉米
Keywords
GFP
vector backbone-free
selectable marker-free
ovary-drip method
transgenic maize
分类号
S513 [农业科学—作物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用子房滴注法获得无载体骨架序列和选择标记的转基因玉米
杨爱馥
苏乔
安利佳
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2009
7
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