弓形虫缓殖子期特异性抗原1基因的克隆、表达及对重组抗原的免疫反应性分析

目的克隆与表达弓形虫缓殖子期特异性抗原1(BAG1)的基因,并分析重组抗原的免疫反应性。方法诱导体外培养的弓形虫RH株速殖子向缓殖子转化,用RT-PCR法从缓殖子期弓形虫扩增BAG1基因片段,进行序列分析;构建表达重组质粒pET32a(+)-BAG1,转入大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达;表达蛋白经次氨基三乙酸镍(Ni-NTA)琼脂糖亲和层析纯化后,蛋白质印迹(Western blotting)分析与ELISA分析其免疫反应性。结果从缓殖子期弓形虫克隆的BAG1基因长690bp,构建的重组质粒pET32a(+)-BAG1经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,可高效表达重组BAG1。Western blotting分析显示纯化的重组BAG1(SAG1)能被弓形虫慢性感染血清识别。ELISA结果表明重组BAG1抗原检测350份人血清弓形虫IgG抗体的阳性率为17.4%,显著高于重组SAG1抗原的阳性率12.6%(P<0.05)。结论原核表达的重组BAG1抗原具有特异的免疫反应性。

弓形虫昆山分离株速殖子期表达型cDNA文库的构建及鉴定

目的 构建弓形虫速殖子期表达的基因的完整长度cDNA文库。方法 用CF - 11纤维素柱快速提纯速殖子 ,以盐酸异硫氰酸胍 (AGPC)一步法抽提总RNA ,oligo -dT纤维素分离mRNA后 ,用ClonTech公司的SmartTMPCRcDNA文库构建试剂盒 ,构建了弓形虫昆山分离株的表达型文库。结果 获得 5× 10 6个独立克隆 ,重组率为 99% ,插入片段的平均长度为 1kb。

广花地区早石炭世石磴子期生态地层特征

基本查明了广花地区下石炭统石磴子组中的古生物化石及其组合面貌、生存期的生活方式、死亡后的埋藏特点以及化石与围岩的相互关系．分析了石磴子期古生物的属种及生态在空间上的变化、在时间上由老到新的连续性和演化更替以及古生物生存发展的机理．对于恢复这一地区石磴子期的古环境，合理划分地层以及掌握碳酸盐岩的形成规律。

伯牙、子期传说的文化解读

有关俞伯牙、钟子期在汉阳江口偶遇,以一曲"高山流水"结成知音的传说故事世代相传,千古不衰。这一传说已被列入中国非物质文化遗产保护的省级名录之中彰显于世。其精妙的音乐艺术,诚信纯真的友情,脍炙人口的知音佳话,既是荆楚历史文化的辉煌一角,也是当今滋润大众心田,促进中国和谐社会乃至和谐世界建设的宝贵精神财富。

我国电子期刊和高校图书馆的发展与利用

对电子期刊的特点、类型及在高校图书馆中的发展特征加以说明,揭示了电子期刊的类型及其服务方式的不同。

观察延续护理对COPD合并呼吸衰竭患者子期管理能力的影响

目的针对COPD合并呼吸衰竭患者采取延续护理的临床效果展开探讨。方法参与本次研究的对象为2017年1月至2018年1月在我院进行医治的COPD合并呼吸衰竭患者100例,从中任意挑选50例患者运用延续护理为研究组,余下50例患者采取常规性护理为参照组。结果数据显示,研究组的子期管理能力评分好于参照组,且SGRQ评分比参照组好。结论在COPD合并呼吸衰竭患者的医治中采取延续护理,能够使得患者的子期管理能力得到提高,并使得患者的心理状态和生存质量得到有效的改善,值得在临床上推荐广泛应用。

不同生育期灵芝子实体水提物与其免疫活性

分析4个灵芝(Ganoderma)菌株不同生育期子实体水提物的提取得率、多糖含量、多糖分子量分布和其对巨噬细胞RAW 264.7 NO释放量的影响。结果表明,随着灵芝的生长发育,其子实体水提物得率呈逐渐降低的趋势,水提物中多糖含量差异显著。水提物经透析后其多糖的分子量分布主要集中在12 kDa至25 kDa之间,但不同生育期间的各分子量多糖的含量存在差异。芝蕾发育初期和成熟后期子实体水提物透析后的免疫活性较好。综合考量,认为成熟后期采收的灵芝子实体虽然多糖含量较低,但生物量较大,可获得较大量活性多糖,所以确定成熟后期为适宜采收期。

光照强度对七子花苗期光合蒸腾特性的影响

对光照强度对七子花苗期光合、蒸腾特性的影响进行了研究,得到如下结果:净光合速率最适温度为25～30℃,高光合有效辐射和高温下光抑制加剧。蒸腾速率随着温度的升高而增大,在同一温度下高光合有效辐射使得蒸腾速率下降。29℃下饱和光强为890μmol m^(-2)s^(-1),表观量子效率为0.0325,光补偿点为44μmol m^(-2) s^(-1),随着光合有效辐射的增强,气孔阻力减小,高光合有效辐射下,气孔阻力有所上升,蒸腾速率与气孔阻力高度负相关。在29℃的饱和光强下,羧化效率为0.0351,CO_2补偿点为173μmol mol^(-1),低于或高于饱和光强,羧化效率下降,CO_2补偿点升高。

围绝经期子宫出血60例临床分析

目的探讨围绝经期子宫出血的病因、诊断和治疗方法。方法对我院60例围绝经期子宫出血病例的临床资料进行回顾性分析。结果60例围绝经期子宫出血患者中,功能性子宫出血(功血)36例(60.0%),生殖道器质性病变14例(23.3%),血液系统疾病6例(10.0%),其他疾病4例(6.7%)。8例经超声检查有异常发现者再接受宫腔镜检查,6例均发现器质性病变。结论围绝经期子宫出血的病因以功血为多,但需排除其他疾病。超声结合宫腔镜检查及病理检查是有力的诊断手段。诊断性刮宫是功血最有效的止血方法。

子前期胎盘的体视学研究现状

妊娠高血压疾病是妊娠特有的一种疾病,子（癎）期是妊娠高血疾病的常见类型,主要临床表现为高血压、蛋白尿、水肿,严重危害母儿健康,是孕产妇死亡的四大原因之一.目前发病机制仍不十分清楚,但随着妊娠的终止,胎盘的娩出,临床症状或体征可逐渐消失,这一特点表明胎盘在子（癎）期的发生发展中起着非常重要的作用,胎盘日益成为妊娠高血压疾病研究的热点.

刚地弓形虫抗缓殖子期抗原1单克隆抗体的制备与应用

目的 制备弓形虫抗缓殖子期抗原1 (BAG1)的单克隆抗体,探究其在弓形虫缓殖子鉴定上的应用。方法分别收集碱性培养基(pH 8.2)诱导5 d后的弓形虫ME49虫株(体外诱导)和慢性感染后2个月的小鼠脑组织匀浆中的ME49虫株(体内形成)。提取体外诱导的弓形虫ME49虫株缓殖子总RNA, RT-PCR扩增bag1开放读码框片段,亚克隆至原核表达载体pET-28a (+),转化至BL21 (DE3)大肠埃希菌,用1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达BAG1,采用Ni-NTA柱纯化重组蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测重组蛋白BAG1表达情况。取6只BALB/c小鼠,皮下注射纯化的重组BAG1蛋白(20μg/鼠) 3次后(首次免疫用弗氏完全佐剂,后两次免疫用等量弗氏不完全佐剂,每隔2周免疫1次),选择血清抗体效价高的小鼠,取脾组织分离脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合后,用纯化的BAG1蛋白经间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞,经多次亚克隆筛选稳定分泌抗BAG1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,收集培养上清,间接ELISA法检测抗体效价和抗体亚型。取BALB/c小鼠4只,液体石蜡腹腔注射(0.5 ml/鼠) 1周后,腹腔注射单克隆杂交瘤细胞106个/鼠,2周后收集腹水,亲和色谱法纯化抗BAG1的单克隆抗体。制备体外诱导和体内形成的弓形虫裂解蛋白,以纯化后的抗BAG1单克隆抗体为一抗,蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测ME49虫株中BAG1蛋白的表达情况,间接免疫荧光试验(IFA)检测ME49虫株缓殖子情况。结果RT-PCR扩增获得bag1的开放读码框片段,长690 bp,编码229个氨基酸。重组质粒pET-28a (+)-bag1经菌落PCR和测序后鉴定正确。SDS-PAGE结果显示,重组BAG1蛋白相对分子质量(Mr)约为27 000,以可溶性蛋白和包涵体形式表达。间接ELISA检测结果显示,纯化的BAG1蛋白免疫小鼠3次后,血清抗体平均效价可达1∶102 400。融合筛选获得4株阳性单克隆杂交瘤细胞株,分别为mAb1H03、 mAb4B04、 mAb5H07、 mAb8B12,以mAb4B04单克隆抗体效价最高,达1∶25 600,该抗体亚型为IgG1型。Western blotting结果显示,mAb4B04单克隆抗体可识别体外诱导和体内形成的ME49虫株BAG1蛋白。IFA结果显示,mAb4B04单克隆抗体可检测到体外诱导和体内形成的ME49虫株缓殖子。结论 制备了抗弓形虫BAG1的单克隆抗体,其中效价最高的mAb4B04单克隆抗体能特异性识别弓形虫ME49虫株的BAG1蛋白和缓殖子。

孕期孤立性蛋白尿与子痫前期相关性研究

选择2009年1月～2012年12在我院进行产前检查并于孕12～20w发现孤立性蛋白尿的孕妇126例(观察组),以及孕周匹配的正常孕妇138例(对照组),对两组孕妇均随访观察至分娩结束,比较两组孕妇发展成子痫前期的概率以及妊娠结局的情况。结果于孕12～20周出现孤立性蛋白尿的孕妇有18.7%最终发展成子痫前期,而同期正常妊娠孕妇有3.7%出现子痫前期,前者子痫前期发生率明显高于后者(P<0.05)。此外,与正常妊娠孕妇相比,孤立性蛋白尿孕妇的剖宫产率、新生儿窒息发生率以及低体重新生儿发生率均明显增加(P<0.05)。妊娠期孤立性蛋白尿容易发展成子痫前期,是子痫前期发生的危险因素。

子脾营养不良的鉴别

蜂群在断子期后复繁，以及人工促繁的情况下，由于蜂王大量产卵，而适龄吐浆哺育蜂过少，导致子脾上幼虫营养跟不上，可见部分子脾封盖盖面下陷，可以判定子脾营养不良。

基于TOPSIS和灰色关联投影法的区域碳效率动态综合评价——以泛珠三角为例

为弥补传统碳效率评价偏向绝对量指标或者少数几个指标的单点式评价的不足,选取相对量指标,从经济、人口、福利多个维度并兼顾地区发展实际与公平原则,构建区域碳效率评价指标体系。将TOPSIS法与灰色关联投影分析相结合,并利用时间序列平均算子二次加权以实现对泛珠三角9省(自治区)2011—2020年碳效率的动态综合评价。静态与动态评价研究结果显示:该区域碳效率发展水平存在差异,其中海南省碳效率总体水平较高,为0.530;贵州省碳效率相对较低,为0.162;海南省比贵州省高出227%。福建省碳效率呈上升趋势,由2011年的0.327上升至2020年的0.498,增长了52.3%。研究认为,应该制定差异化减排策略、加大技术经费投入、增强社会福利、引进人才以实现低碳经济发展。

高粱受精过程及其经历的时间

应用常规石蜡切片技术,对高粱花粉管生长途径、双受精过程及其经历的时间进行研究。结果表明,高粱开花即授粉,花粉随即萌发,花粉管进入羽状柱头分支结构的细胞间隙,向下生长于花柱至子房顶部引导组织的细胞间隙中;进入子房腔后,在子房壁与外珠被之间的缝隙中向珠孔方向生长;花粉管破坏一个助细胞后,在卵细胞与中央细胞之间的空隙中释放连续的球状内容物;两个精核分别进入卵细胞和中央细胞分别与卵核和极核融合。受精过程经历的时间为开花后0.5～3h左右,花粉管破坏一个助细胞进入胚囊,并释放精子;1～3h精核与极核融合形成初生胚乳核,精卵融合形成合子;4h左右初生胚乳核分裂;14h左右合子分裂。4～14h为合子静止期,该期为物理、化学诱变及花粉管通道法转基因技术实施的合适时间。

霸王别姬

序幕 [幕启.天幕上画着装饰性很强的江流线条,画面风格质朴、疏朗.天幕前有一只巨大的青铜古鼎,散发出神秘的幽光.古鼎上方飘荡着一面楚军的帅旗.……