电子转移黄素蛋白脱氢酶基因突变所致的核黄素反应性脂质沉积性肌病的临床、病理和基因特征分析

目的分析电子转移黄素蛋白脱氢酶(ETFDH)突变所致的核黄素反应性脂质沉积性肌病(RR-MADD)的临床特点、肌肉病理以及血、尿质谱筛查结果和基因突变特点,旨在为早期诊断和治疗提供帮助。方法回顾性分析该院2009年至2019年确诊的15例ETFDH突变所致的脂质沉积性肌病患者的各项资料。结果15例患者平均发病年龄为(32.1±13.6)岁,均以肢体无力为首发症状,其中四肢起病者占53.3%,双下肢起病者占46.7%。所有患者的肌酶水平均升高;肌电图结果提示80%呈肌源性损害,13.3%为肌源性合并神经源性损害,6.7%结果正常。血、尿质谱的阳性检出率分别为66.7%和22.2%;基因检测提示所有患者存在ETFDH基因不同位点突变,其中单一杂合突变和复合杂合突变各占40%,纯合突变占20%。结论该病以波动性肌无力伴肌酶升高为主要表现,患者应尽快行肌肉病理检查,同时联合血、尿代谢筛查和基因检测有助于RR-MADD患者早期诊断和及时治疗。

核黄素反应性脂质沉积性肌病20个家系的电子转移黄素蛋白脱氢酶基因存在热点突变

目的报道20个核黄素反应性脂质沉积性肌病（RR-LSM）患者的电子转移黄素蛋白脱氢酶（ETFDH）基因检查结果。方法对2003年1月至2010年5月我院神经科收治的24例RR—LSM患者（来自20个我国大陆北方地区RR—LSM家系，其中16个家系各有1例患者，其余4个家系各有2例发病者）的临床特点进行分析。对24例患者、11名无症状家系成员以及100名健康人行ETFDH基因检查。结果24例患者发病年龄为（27．9±9．9）岁，主要症状为四肢无力（21例，87．5％）、咀嚼困难（15例，62．5％）、颈肌无力（14例，58．3％）和肌痛（14例，58．3％）等。18例患者的血代谢筛查均提示脂酰肉碱升高，17例患者中有15例存在戊二酸尿症。我们发现19个家系存在17种ETFDH基因点突变，包括13种错义突变、2种剪切突变和2种无义突变。其中患者的C．998A〉G、c．1450T〉C、c．1703T〉C、c．1717C〉T、c．821G〉A、12．643G〉A、c．251C〉T、c．1763A〉T、c．IVS7＋2T〉C、c．IVS6＋1G〉A没有出现在100名健康人中。有9个家系存在c．770A〉G（p．Y257C）突变；5个家系存在c．1227A〉C（p．IA09F）突变。结论诸多ETFDH基因新突变提示国人RR-LSM可能存在特殊的基因突变谱，其中p．Y257C与p．L409F突变可能为我国大陆北方地区的热点突变。

脂质沉积性肌病35例的临床特点及电子转移黄素蛋白脱氢酶基因突变分析

目的探讨脂质沉积性肌病（LSM）的临床特点及电子传递黄素蛋白脱氢酶（ETFDH）基因突变所致的多种脂酰辅酶A脱氢酶缺乏症在该病中所占比例。方法收集35例经病理明确诊断的LSM患者的临床资料，并对所有患者的ETFDH基因的全部13个外显子进行PCR扩增，产物纯化后直接测序。同时对来自50名健康对照的100条染色体进行检测，以验证发现的ETFDH新突变。结果35例患者均存在不同程度的肌肉无力，包括10例存在咀嚼吞咽无力，28例存在抬头无力。在随访的32例患者中，29例患者经维生素B2及辅酶Q10治疗后症状明显改善。30例（86％）存在不同形式的ETFDH基因突变：8例为纯合突变，20例为复合杂合突变，2例患者仅存在1个杂合突变。本组患者共发现14个新突变：9个错义突变（c．3G〉C、c．152G〉A、c．191G〉A、c．349G〉C、c．433G〉C、c．949C〉A、c．1454C〉G、c．1744A〉T和c．1763A〉G），1个无义突变（c．172G〉T），2个缺失突变（c．1282_1283del和c．1773_1774del）和2个剪切位点突变（c．405＋1G〉T和c．1691-3C〉G）。所有患者中，9例存在c．250G〉A突变，6例存在c．770A〉G突变。结论LSM可表现近端肌受累为主的肢体无力。基因分析发现本组LSM患者以ETFDH突变引起的多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏为主。c．250G〉A和c．770A〉G是其最常见的突变位点。

中国南方晚发型多种酰基辅酶A脱氢酶缺陷的电子转移黄素蛋白脱氢酶基因存在高频热点突变c．250G〉A

多种酰基辅酶A脱氢酶缺陷（multiple acyl—CoA dehydrogenase deficiency，MADD；又称戊二酸尿症2型）是一种影响脂肪酸、氨基酸和胆碱代谢的常染色体隐性遗传病，是引起脂质沉积性肌病（lipid storage myopathy，LSM）的重要分子病因。MADD致病基因包括电子转移黄素蛋白A（electron transfer flavoproteinA，ETFA）、ETFB和电子转移黄素蛋白脱氢酶（electron transfer flavoprotein dehydrogenase，ETFDH）基因。

电子转移黄素蛋白脱氢酶基因新型复合杂合突变的晚发型Ⅱ型戊二酸血症1例

本文报道了一例以晚发型Ⅱ型戊二酸血症(GAⅡ)为特征的进行性肌无力为早期症状的中国青少年患者的电子转移黄素蛋白脱氢酶(EFTDH)基因的新型复合杂合突变。患者19岁开始出现进行性肌无力和肌肉萎缩,从双下肢开始,逐渐进展到上肢。曾有间歇性恶心症状,嗜睡症状不明显。血肌酸激酶、乳酸脱氢酶、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶均高于正常水平;肌电图提示肌源性损害。基因突变分析显示EFDTH基因的新型复合杂合突变,遂确诊为戊二酸血症。患者对核黄素和泛醌(辅酶Q10)治疗表现出良好的反应。

核黄素反应性脂质沉积性肌病20个家系的电子转移黄素蛋白脱氢酶基因存在热点争议

多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症为常染色体隐性遗传，分为3个亚型，I型与Ⅱ型均为新生儿期起病，第Ⅲ型为青少年和成年起病，常表现为核黄素反应性脂质沉积性肌病（RR～LSM）。致病基因包括电子转移黄素蛋白A基因、电子转移黄素蛋白B基因和电子转移黄素蛋白脱氢酶（ETFDH）基因。其中ETFDH基因是RR—LSM的主要致病基因。

脂质沉积性肌病35例的临床特点及电子转移黄素蛋白脱氢酶基因突变分析

为探讨脂质沉积性肌病（LSM）的临床特点及电子传递黄素蛋白脱氢酶（ETFDH）基因突变所致的多种脂酰辅酶A脱氢酶缺乏症在该病中所占比例，奚剑英（复旦大学附属华山医院神经内科）等收集35例经病理明确诊断的LSM患者的临床资料，并对所有患者的ETFDH基因的全部13个外显子进行PCR扩增，产物纯化后直接测序。

浙江省新生儿多酰基辅酶A脱氢酶缺乏症筛查及随访分析

目的:了解浙江省新生儿多酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(MADD)的发病率、临床特征及基因突变特点。方法:采用串联质谱法对2009年1月至2020年12月浙江省新生儿疾病筛查中心3896789名新生儿进行遗传代谢病筛查,结合尿有机酸分析及电子转移黄素蛋白(ETF)或电子转移黄素蛋白脱氢酶(ETFDH)基因检测确诊。确诊患儿进行饮食和生活管理,补充左卡尼汀、核黄素、辅酶Q10治疗,长期随访并评估患儿的生长和智力发育情况。结果:确诊MADD患儿13例,除1例为Ⅱ型,其余均为Ⅲ型(迟发型),发病率为1/299753。13例患儿中,1例死亡,4例因感染诱发以低血糖为主要表现的急性代谢失调,1例出现肌张力降低,其余患儿随访发育良好(随访时间3~45个月)。患儿初筛血C4~C18:1不同程度升高。13例患儿进行基因检测,其中ETFA基因复合杂合突变1例,ETFA基因纯合突变1例,ETFB基因复合杂合突变1例,ETFDH基因复合杂合突变8例,ETFDH基因纯合突变1例,仅检测出一个ETFDH基因突变位点1例。c.250G>A为热点突变。结论:MADD临床表现高度异质,新生儿期发病较为严重,迟发型常无明显临床症状,初筛血C4~C18:1不同程度升高,最常见基因突变为c.250G>A。

福建泉州地区新生儿戊二酸血症Ⅱ型患者的实验室筛查和基因诊断分析

目的了解福建省泉州地区戊二酸血症Ⅱ型(glutaric acidemia typeⅡ,GA-Ⅱ)新生儿发病率、生化表现与基因突变特征。方法2014年1月~2022年12月,采用串联质谱技术对泉州地区643606例新生儿进行遗传代谢病筛查。对于多种酰基肉碱升高的可疑阳性样本采用MassARRAY技术和高通量测序技术诊断。结果研究期间共有247例新生儿表现为多种酰基肉碱升高,经过基因诊断确诊19例GA-Ⅱ患儿。此外,1例新生儿表现为异戊酰基肉碱(isovalerylcarnitine,C5)升高,疑似为异戊酸血症,经过基因诊断证实为GA-Ⅱ。该研究最终确诊20例GA-Ⅱ患儿,GA-Ⅱ在研究人群中的发病率为1∶32180。新生儿筛查结果表明辛酰基肉碱(C8),癸酰基肉碱(C10)和十二烷酰基肉碱(C12)的浓度明显高于参考范围上限,是筛查GA-Ⅱ的关键指标。在GA-Ⅱ患儿中发现了10种不同的电子转移黄素蛋白脱氢酶(electrontransfer flavoprotein dehydrogenase,ETFDH)基因突变,大部分为错义突变。最常见的ETFDH基因突变是c.250G>A(p.A84T),等位基因突变频率达47.5%,其次是c.524G>A(R175H),c.998A>G(p.Y333C)和c.1657T>C(p.Y553H)。结论新生儿筛查是早期检出GA-Ⅱ患儿的重要途径,但GA-Ⅱ患儿可能出现非典型性的生化改变,所有新生儿筛查结果异常的样本应采用高通量测序进行基因诊断。

NADH脱氢酶（泛醌）黄素蛋白2基因突变相关白质脑病一家系报道

目的分析NADH脱氢酶（泛醌）黄素蛋白2（NDUFV2）基因突变所致白质脑病一家系兄弟2例患儿的临床及影像学特点，以提高临床医师对本病的认识及对此病的早期识别。方法收集并分析先证者及其家系成员的临床资料，分析其临床症状和头颅磁共振成像（MRI）特点，并对2例患儿进行长期随访。先后采用Saner测序、靶向捕获二代测序、全外显子组基因测序技术对该家系2例患儿及其父母进行遗传学分析。结果1．临床特点及随访：2例患儿分别于出生后4个月和1岁起病，表现为运动功能快速倒退、肌张力增高、病理征阳性，随访过程中病情相对稳定静止或逐渐好转，鸡尾酒疗法后病情有好转。2．头颅MRI特点：以深部白质受累为主，均为脑室周围长T1、长T2、液体衰减反转恢复序列（FLAIR）高信号，病灶呈团块状对称分布，病灶内信号不均匀，均伴囊性改变，弥散加权像（DWI）病灶呈团块状高信号。随访发现急性期后病灶多逐渐好转，但仍保留囊性改变，DWI呈线状或点状高信号，范围较前缩小。3．基因突变分析：先证者及其弟弟NDUFV2基因均存在复合杂合突变：c．467T〉A和c．404G〉C，其中前者遗传自父亲，后者遗传自母亲，均为国际上未报道的新突变。结论本研究报道的2例患儿与国际上已报道的12例患儿肥厚性心肌病合并脑病及Leigh综合征2种表型截然不同，以亚急性起病之后相对静止的白质脑病为临床表型，扩大了NDUF~基因的临床表型谱。明确了该白质脑病家系中的致病基因为NDUFV2基因突变，为该家庭进行准确的遗传咨询提供了可能。

核黄素反应性脂质沉积性肌病伴感觉共济失调性神经病3例报告

目的研究核黄素反应性脂质沉积性肌病伴感觉共济失调性神经病的临床、电生理、病理和基因改变特点。方法 3例男性患者来自2个家系,其中2例为兄弟,发病年龄41～43岁,主要症状是四肢肌无力,伴随双足麻木和行走不稳。查体发现四肢近端肌力下降、末梢性感觉丧失和Romberg征阳性。3例患者的血尿代谢筛查均提示存在血多种脂酰肉碱水平升高和尿戊二酸水平增高。3例患者均进行了神经电生理、肌肉活检以及电子转移黄素蛋白脱氢酶(ETFDH)基因检查,2例进行腓肠神经活检。结果 3例患者的肌电图分别出现肌源性损害、可疑神经源性损害和无异常。3例患者的四肢感觉神经传导速度显著减慢或不能引出,运动神经传导速度仅在1例出现轻度减慢。3例患者的骨骼肌均可见肌纤维内脂肪滴显著增多,2例有个别破碎红纤维,2例出现小角状肌纤维。2例患者的腓肠神经均可见有髓神经纤维中-重度减少,伴随有髓神经纤维轴索变性和再生。3例患者均携带ETFDH基因的复合杂合突变,其中2兄弟为c.65A>G和c.242T>C,另1例为c.770A>G和c.1450 T>C。结论 ETFDH基因突变导致的核黄素反应性脂质沉积性肌病可以伴随感觉共济失调性神经病。

脂质沉积性肌病临床、病理和基因改变特点分析

目的报道一例脂质沉积性肌病的临床、病理和基因改变特点。方法先证者为33岁男性,亚急性起病,首发颈肌无力,随后出现咀嚼肌和四肢无力,肌酶明显升高,临床酷似多发性肌炎。血尿有机酸分析未见典型氨基酸、有机酸及脂肪酸代谢病改变,对患者进行了神经电生理、神经肌肉活检以及ETFA、ETFB、ETFDH基因检测。结果骨骼肌病理改变为肌纤维内出现大量脂肪滴沉积,伴随肌纤维坏死、再生。出现小组分布的累及两型的小角状萎缩肌纤维提示伴随神经源性损害。ETFA、ETFB基因检查基本正常,ETFDH基因第3外显子发现c.250G>A(Ala84Thr)杂合突变。结论颈部肌肉无力可能是脂质沉积性肌病早期特点,需要引起重视。尿有机酸筛查正常并不能排除该疾病,进一步的肌肉活检和基因检测是诊断的金标准。多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症患者可以出现周围神经的损害,常染色体隐性遗传疾病相应基因的一个杂合突变难以解释,需要进一步研究。

以横纹肌溶解症为首发表现的迟发型多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症1例

患儿男,16岁,以进行性肌无力、疼痛、活动耐力下降及茶色尿为主要表现,尿检异常,血清转氨酶、肌酸激酶和血氨等增高。串联质谱法检测血液多种酰基肉碱增高;气相色谱法检测尿液戊二酸等增高。全外显子组测序提示ETFDH基因5号外显子c.524G>A(p.R175H)和3号外显子c.250G>A(p.A84T)复合杂合突变,最终诊断多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症。予水化、碱化、核黄素、辅酶Q10及左卡尼汀等治疗,患儿肌力及各项生化指标恢复正常。对反复或进展性肌病,横纹肌溶解、急性代谢紊乱、血清肌酸激酶增高的患者,应警惕迟发型代谢性肌病,早期诊断和治疗是改善预后的关键。

多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症发病机制与诊疗研究进展

多种酰基辅酶A脱氢酶缺陷(Multiple acyl CoA dehydrogenase deficiency,MADD)是一种罕见的脂肪酸、氨基酸和胆碱代谢异常的常染色体隐性遗传病,由电子转移黄素蛋白或电子转移黄素蛋白脱氢酶的基因缺陷引起。迟发型MADD患者大多具有ETFDH突变,可出现近端肌肉无力和远端感觉神经病变,对核黄素治疗反应较好。主要机制可能是ETFDH突变导致线粒体中的电子传递链异常,从而无法在线粒体膜中产生能量。核黄素可以减少ETF/ETF-QO蛋白的异常表达,改善患者的发病状况,是理想的治疗方案。但目前对核黄素无反应的MADD患者的发病机制和治疗方案尚不清楚。

樟芝总三萜对长期运动训练导致大鼠心肌损伤的影响

42d龄SPF级Wistar雄性大鼠适应培养4d,再经每天30min初步运动训练3d后,选取活跃大鼠50只,分为5组,分别为空白对照组(C组,安静饲养)、心肌损伤模型组(M组,游泳训练)、低剂量组[LMⅠ组,游泳训练+灌胃0.25g/kg·d樟芝(Taiwanofungus camphoratus)总三萜]、中剂量组(LMⅡ组,游泳训练+灌胃0.5g/kg·d樟芝总三萜)和高剂量组(LMⅢ组,游泳训练+灌胃1.5g/kg·d樟芝总三萜),6周后测定各组大鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CTNK)、a-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)、内皮素(ET)和降钙素基因相关肽(CGRP)水平,以及心肌中肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、ET和CGRP水平,以研究樟芝总三萜对长期运动训练导致大鼠心肌损伤的影响。结果表明:与空白对照组相比较,心肌损伤模型组大鼠血清中ALT、LDH、CK、a-HBDH和ET水平,心肌中cTnⅠ、MDA和ET水平,均显著升高,而血清与心肌中CGRP水平和心肌SOD活性显著降低;与心肌损伤模型组相比,各剂量组大鼠血清中ALT、LDH、CK、a-HBDH和ET水平,心肌中cTnⅠ、MDA和ET水平,均显著降低,而心肌SOD活性显著升高,血清和心肌中CGRP水平则变化不显著。实验结果表明,给予长期运动训练大鼠适当补给樟芝总三萜能够提高大鼠机体抗氧化能力,能够清除机体多余自由基,对大鼠心肌损伤具有保护作用。