S-8大孔树脂-C18柱联用分离牡丹籽壳中短叶松素及抗氧化研究

以牡丹籽壳为原料,利用大孔树脂和C18反相键合硅胶柱(C18柱)联合分离短叶松素,回收率为(98.33±0.64)%。用70%(体积分数)乙醇提取牡丹籽壳粗黄酮(Mu Dan Ke Flavonoids,MDKF),得率最高为(10.54±0.13)%;比较了6种大孔树脂(AB-8、S-8、DM301、HPD600、HPD100和D101)的吸附率和解析率,发现S-8大孔树脂的吸附率和解析率最佳,分别为83.47%和84.46%;优化S-8大孔树脂分离MDKF的最佳条件为:上样液质量浓度1.6 mg/mL,上样液流速2.0 mL/min,洗脱剂乙醇体积分数60%,洗脱液流速1.5 mL/min,洗脱液体积100 mL;对经过C18柱分离后的组分进行LC-MS分析得到短叶松素,回收率为(98.33±0.64)%;分离前后抗氧化能力比较:C18纯化物>S-8大孔树脂纯化物>MDKF粗提物;分子对接实验表明,短叶松素与超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶、谷胱甘肽过氧化物酶均有结合能力,过氧化氢酶的结合能力最强为-9.1 kcal/mol。实验表明,短叶松素具有较好的抗氧化能力,可作为食品、药品或化妆品等抗氧化剂的添加,应用前景非常广泛,对牡丹籽壳的进一步开发利用提供理论支持。

AB-8大孔树脂-C18柱联用分离干腌牛肉抗氧化肽的研究

该文利用盐酸提取法提取了干腌牛肉多肽,借助AB-8型大孔树脂及C18球形硅胶柱的分离纯化出4种抗氧化肽,利用分子对接模拟了4种抗氧化肽与超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的结合位点。利用盐酸提取法提取了抗氧化肽并测试其在1、2、3、4、5 mg/mL的抗氧化能力,发现在5 mg/mL时,DPPH自由基、ABTS阳离子自由基和超氧阴离子自由基(·O_(2)^(-))清除率分别为86.24%、35.62%和54.34%。对比了AB-8、D101、S-8、X-S、HPD-500、NKA-9的吸附率与解吸率,AB-8的吸附率与解吸率最好,分别为92.55%和82.88%。研究优化了AB-8的上样流速、上样量、乙醇洗脱浓度和洗脱流速,在4 BV/h上样流速、39 mL上样量、75%(体积分数)乙醇溶液洗脱剂和1 mL/min洗脱流速时,可以分离出3个组分(A、B和C),测试3个组分的抗氧化能力,B组分的DPPH自由基、ABTS阳离子自由基和·O_(2)^(-)清除能力最高,分别为73.33%、21.01%和63.33%。对B组分进行C18柱分离,分离出4个抗氧化肽:FDGDF、TGPGPW、FLSDH和KPFDAK。与SOD(PDB ID;1E9O)进行分子对接,发现FDGDF、TGPGPW、FLSDH和KPFDAK均可以与SOD形成氢键,结合能分别为-6.7、-6.55、-6.6、-7.35 kcal/mol,1 mg/mL的FDGDF可以有效增加SOD活力11.64%,酶活力单位增加697 U/mL,研究结果为干腌牛肉制品的开发提供理论基础。

凝胶涂层包覆大孔树脂固定化脂肪酶的制备及在风味酯合成中的应用

风味酯是一种重要的香料化合物,在食品、化妆品和制药等行业具有重大的应用价值。酶法合成风味酯具有反应条件温和、选择性高以及污染少等优点,但在有机溶剂中,游离脂肪酶的活性会有极大的损失。为了提高脂肪酶的稳定性,该研究首先使用大孔树脂通过吸附作用固定化脂肪酶,然后对酶蛋白表面进行丙烯酰化修饰和聚合反应,在固定化脂肪酶的表面形成凝胶涂层的包覆。此种方式制备的固定化脂肪酶稳定性有了较大提高。利用该固定化酶分别通过酯化反应合成乙酸丁酯和转酯反应合成乙酸异戊酯,结果显示,以正庚烷为溶剂,乙酸和丁醇浓度均为0.1 mol/L,并添加1 g固定化酶,在45℃经过12 h的反应,乙酸丁酯的合成率达到93.05%,重复利用4次后仍然有70.83%的酯合成率;在3 mL乙酸乙烯酯溶液中加入0.8 mol/L异戊醇和0.5 g固定化酶,在45℃经过14 h的反应,乙酸异戊酯的合成率达到92.35%,重复利用4次后仍然有84.80%的酯合成率,研究建立了一种固定化脂肪酶的新方法,并为风味酯的制备奠定了基础。。

大孔树脂吸附法纯化酸枣仁总黄酮的工艺研究

利用7种大孔树脂对酸枣仁的总黄酮进行纯化,依据其吸附能力及解吸能力,选出最佳的大孔树脂型号,研究了上样液浓度、上样速度、上样液体积对大孔树脂吸附率的影响以及洗脱剂类型、洗脱剂浓度、洗脱速度、洗脱剂体积对大孔树脂解吸率的影响,采用正交试验对酸枣仁总黄酮的纯化工艺进行了优化。试验结果表明,DM301大孔树脂纯化酸枣仁总黄酮效果最佳,在上样液浓度为0.1 mg/mL、上样速度为1 BV/h、上样液体积为30 mL、洗脱剂为丙酮、洗脱剂浓度为100%、洗脱速度为2 BV/h、洗脱剂体积为55 mL的条件下,获得的酸枣仁总黄酮纯度最高,相较于纯化前提高了约1.1倍。

大孔树脂对纺织印染废水吸附性能研究

研究XDA-11树脂对次甲基蓝纺织印染废水的吸附行为,考察吸附时间、pH值、温度、流速等对树脂吸附性能的影响。结果显示,在静态吸附条件下,调节温度48℃,pH值为11.0,吸附4.5 h,使用0.120 0 g树脂处理80.0 mL,质量浓度为50.0 mg/L的废水,废水脱色率约为99.66%。在动态吸附条件下,在常温,调pH值为11.0,吸附流速为2BV/h时,处理质量浓度为500.0 mg/L的废水,废水处理量达到126 BV,脱色率约为99.98%。用盐酸-碱性乙醇对树脂进行多次再生,再生率达70.39%以上。

插田泡花色苷的大孔树脂纯化及体外抗氧化活性

采用AB-8型大孔树脂分离纯化插田泡果实花色苷,并对其抗氧化活性进行了研究。结果显示,采用体积分数70%乙醇为洗脱液,花色苷上样液pH值为1时,插田泡花色苷的最佳纯化条件为:动态吸附解吸流速均为1 mL/min,上样液浓度为0.75 mg/mL,用6倍柱体积的70%乙醇洗脱。纯化前后插田泡花色苷的色价比为1∶15.7,达到了很好的纯化效果。在实验范围内,纯化后的花色苷对DPPH和ABTS+·自由基均有非常强的清除作用,清除率随质量浓度的升高而快速增大,呈正效线性相关;纯化花色苷对2种自由基的清除能力大小为ABTS(IC 50=0.6349μg/mL)>DPPH(IC 50=0.9044μg/mL),均远远高于阳性对照VC。结果表明,插田泡纯化花色苷具有十分显著的抗氧化活性。

酱渣大豆异黄酮大孔树脂纯化工艺及其抗氧化活性研究

研究酱渣大豆异黄酮的纯化工艺及其抗氧化活性。选用5种树脂(AB-8、HPD300、ADS-7、DM301、D101)进行静态吸附试验,筛选吸附效果最好的树脂,再以动态吸附试验筛选最佳纯化工艺,最后研究纯化后酱渣大豆异黄酮的抗氧化活性。结果表明,AB-8树脂的吸附效果最好,在流速1.5 mL/min、pH 3的条件下吸附0.6 mg/mL的样品溶液75 mL,再用100 mL 60%乙醇溶液解吸,样品纯度可由11.37%提升到55.84%;纯化后的酱渣大豆异黄酮具有较好的抗氧化活性,其浓度为0.07 mg/mL时,对DPPH自由基和ABTS自由基的清除率分别为93.35%和98.67%。AB-8树脂可用于酱渣大豆异黄酮的分离纯化且效果较好,酱渣大豆异黄酮具有较强的抗氧化活性。

鲍鱼多糖的大孔树脂纯化工艺及其免疫调节活性分析

目的:为提高鲍鱼多糖品质,对鲍鱼多糖的大孔树脂纯化工艺进行优化,并对纯化前后多糖的免疫调节活性分析评价。方法:以多糖保留率、蛋白质脱除率和色素脱除率的加权综合得分为指标,考察6种不同型号的大孔树脂对鲍鱼多糖的纯化效果,利用单因素实验和响应面分析法优化大孔树脂的纯化工艺条件,并通过体外细胞实验对纯化前后鲍鱼多糖的免疫调节活性进行研究。结果:HPD100的加权综合得分最高,对鲍鱼多糖的纯化效果最佳;HPD100纯化多糖的最佳工艺参数为多糖与树脂质量比1:42、吸附时间3.10 h,吸附温度35℃,在此条件下多糖保留率为97.58%±1.58%,蛋白质脱除率为30.20%±0.66%,色素脱除率为45.78%±1.01%,加权综合平均得分61.83%;体外细胞实验结果表明,纯化后鲍鱼多糖的免疫调节活性显著增强,RAW264.7巨噬细胞的增殖活力提高,NO、TNF-α和IL-6细胞因子分泌水平大幅增加。结论:本研究获得鲍鱼多糖的最佳大孔树脂纯化工艺条件,纯化后鲍鱼多糖的生物活性显著增强,可为高活性鲍鱼多糖的制备提供理论依据。

微滤联合大孔树脂纯化蓝莓果脯糖浆中花色苷的工艺优化

本文使用微滤技术联合大孔树脂技术对蓝莓果脯糖浆分离纯化,以回收其中的蓝莓花色苷。首先通过静态试验对大孔树脂进行筛选,并在动态试验中以花色苷回收率和总糖去除率为指标,在单因素和Box-Behnken响应面试验的基础上,优化了上样流速、乙醇浓度和洗脱流速等工艺参数。结果表明:微滤透过液中花色苷含量为6.84 mg/100 mL,总糖含量为31.76 mg/mL。AB-8、D101、HPD600三种树脂中,优选出AB-8用于蓝莓果脯花色苷的纯化,大孔树脂纯化花色苷最佳工艺条件为:上样流速2.0 mL/min、乙醇浓度83%、洗脱流速2.0 mL/min,该条件下花色苷的回收率为86.68%,总糖去除率为84.13%。花色苷解吸液经旋转蒸发浓缩后,花色苷质量浓度为5.56 mg/100 mL,总糖浓度为5.24 mg/mL,花色苷的色价为31.43,约为原料中花色苷色价的5倍。微滤联合大孔树脂纯化蓝莓果脯糖浆花色苷效果明显,本研究为蓝莓花色苷的分离纯化提供了一定的技术参考。

响应面法优化大孔树脂纯化仿刺参中皂苷工艺研究

为优化大孔树脂纯化皂苷Holotoxin A_(1)(HA_(1))的最佳工艺条件,选择常用于纯化海参皂苷的4种不同结构的大孔树脂(AB-8、HP-20、D101和NKA-9),以皂苷HA_(1)为标准品,采用高效液相色谱法测定HA_(1)的含量,通过比较其静态吸附-解吸能力和静态吸附曲线,筛选合适树脂后,以粗皂苷质量浓度、乙醇体积分数和醇洗体积为因素,在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken响应面试验确定最佳动态纯化工艺条件。试验结果显示,AB-8树脂对HA_(1)纯化效果最好,最佳纯化工艺为:粗皂苷质量浓度25mg/mL、流速1mL/min、上样体积25mL、水洗体积2倍柱体积、乙醇体积分数73%、醇洗体积7倍柱体积,此条件下,HA_(1)回收率为91.40%,纯度由0.16%提高至0.58%。本试验得到的纯化工艺适用于仿刺参中皂苷HA_(1)的纯化。

葛根蛋白酶解物大孔树脂吸附工艺优化及其体外抗氧化活性研究

目的:优化大孔树脂吸附葛根蛋白酶解物工艺及其抗氧化活性研究。方法:采用Box-Behnken响应面法确定大孔树脂吸附葛根蛋白酶解物最佳工艺。以维生素C为对照,测定最佳工艺下纯化前后葛根蛋白酶解物的抗氧化活性。结果:大孔树脂的最佳吸附—解吸工艺为上样液质量浓度10.0 mg/mL,洗脱液流速2.6 mL/min,洗脱液乙醇体积分数74%,纯化后葛根蛋白酶解物含量提升至37.19%。大孔树脂纯化后的葛根蛋白酶解物对DPPH自由基、ABTS+自由基、羟自由基的清除率均强于吸附前的。结论:大孔树脂纯化后的葛根蛋白酶解物抗氧化效果良好,可以作为一种潜在的蛋白多肽应用于食品中。

大孔树脂纯化信阳绿茶中多酚的热力学及动力学研究

以信阳绿茶为原料,优化大孔树脂对茶多酚的纯化工艺。通过比较10种大孔树脂对茶多酚的静态吸附-解吸性能,筛选出CAD-40型大孔树脂为纯化树脂。热力学研究表明,该吸附为放热、熵减的自发物理吸附过程,低温有利于吸附的进行。动力学研究表明,吸附符合一级动力学模型,吸附饱和时间为300 min。最佳纯化工艺为茶多酚质量浓度11 mg/mL、pH 7.0、上样体积40 mL(2 g树脂)、上样速度2.0 BV/h;最佳洗脱剂为体积分数80%乙醇、pH 5.0、洗脱剂用量6.0 BV、洗脱速度3.0 BV/h。茶多酚纯度由24.7%提高到76.8%,RSD为2.73%。

大孔树脂纯化秦皮香豆素工艺研究

目的考察大孔树脂纯化秦皮中秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素工艺。方法静态吸附实验筛选树脂型号,单因素试验优化纯化工艺,UPLC-QTOF-MS/MS法鉴定主要成分,绘制热图。结果最佳树脂型号为ADS-5。最佳纯化工艺为上样量1.1 BV,上样液质量浓度0.75 g/mL,2 BV纯水清洗杂质,4 BV 25%乙醇洗脱有效成分,香豆素总转移率为84.42%,纯度为53.28%,得率为4.79%。共鉴定出37种成分,其中香豆素类、苯乙醇苷类主要富集在25%乙醇洗脱液中,有机酸类、环烯醚萜类、黄酮类主要富集在95%乙醇洗脱液中。结论该方法稳定、可行、准确,可表征大孔树脂不同洗脱液中秦皮香豆素分布规律,为后续相关药学研究提供指导。

超声辅助酶提取、双水相萃取及大孔树脂纯化天麻素的工艺研究

目的:优化超声辅助酶提取天麻中天麻素工艺并通过双水相萃取和大孔树脂进一步纯化,为精制天麻素提供工艺参考。方法:通过单因素试验考察和正交优化试验得到最佳超声辅助酶提取条件。通过双水相工艺考察得到最佳双水相萃取条件。通过大孔树脂工艺考察对大孔树脂型号进行筛选,对上样条件、洗脱条件进行优化。结果:超声辅助酶提取选择α-淀粉酶,最佳提取条件设定为料液比为1∶30,加酶量为0.8%,酶解时间为80 min,酶解温度为60℃,酶解pH值为5.5。最佳双水相萃取条件设定为乙醇体积分数为47.5%,硫酸铵质量分数为15.0%,萃取液浓度为0.2 g/mL,大孔树脂筛选型号为HPD100,最佳上样浓度为0.2 g/mL,径高比为1∶5,上样流速为3 BV/h,上样量为100 mL,最佳洗脱液体积分数为30.0%,洗脱流速为4 BV/h,洗脱液用量为230 mL。结论:本研究对超声辅助酶提取工艺优化结果较好,采用双水相体系和大孔树脂纯化,使天麻素纯度明显提高。且这一系列工艺稳定可靠,可为后续制剂及新药研发奠定基础。

大孔树脂富集大花红景天总黄酮及抗氧化活性研究

本研究旨在建立一种大花红景天中总黄酮的含量测定方法,运用大孔吸附树脂富集大花红景天中总黄酮,从5种大孔树脂中筛选出最优树脂,并对其纯化工艺进行初步优化,对富集得到的红景天总黄酮的抗氧化活性进行测定。以芦丁作为对照品,采用亚硝酸钠-硝酸铝显色反应比色法,测定大花红景天中的总黄酮含量。运用静态吸附-解吸附、动态吸附-解吸附方法筛选出最优大孔树脂,对洗脱剂浓度、用量等工艺进行优化,并测定大花红景天中总黄酮的抗氧化活性。西藏产大花红景天中总黄酮含量为12.91%,青海产红景天中总黄酮含量为9.85%,D101型大孔树脂为富集大花红景天中总黄酮的最优树脂,最佳洗脱剂浓度为80%乙醇溶液,最佳洗脱剂用量为5 BV。经D101型大孔树脂纯化后,西藏产大花红景天中总黄酮含量达到24.64%,其对DPPH自由基的清除率可达到95.51%。D101型大孔树脂对富集大花红景天中总黄酮具有较好的效果,大花红景天中总黄酮具有较好的抗氧化活性,该研究可为丰富大花红景天的质量评价标准和加快对大花红景天中黄酮类组分的开发利用提供参考。

大孔树脂对莽草酸发酵液纯化研究

莽草酸是莽草酸途径中重要的代谢产物,本位以透光率和莽草酸成品含量为指标,对4种大孔树脂进行了筛选,并通过静态吸附和动态吸附两种试验对筛选出的树脂进行考察对比,得出D296大孔树脂和CAD-40大孔树脂效果最好。然后再对莽草酸发酵液经过一系列预处理,进行结晶,结果表明,D296大孔树脂处理效果最好,其含量达到98.5%,纯度为99.823%。

大孔树脂吸附对大豆清品质的改善作用

为降低大豆加工副产物大豆清中的二价阳离子含量和豆腥味,通过分析大豆清的钙离子脱除率、镁离子脱除率、蛋白损失率,结合感官评价对8种大孔树脂进行筛选,得到较为合适的大孔树脂类型。对筛选出的大孔树脂吸附大豆清的工艺条件进行优化,并利用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用技术对吸附前后大豆清中的豆腥风味物质进行评价。结果表明D851大孔树脂对大豆清的吸附效果较好。当150 mL大豆清采用4 g树脂吸附40 min时,钙、镁离子脱除率分别为76.03%和85.88%,蛋白损失率为7.27%。经大孔树脂吸附后大豆清的感官风味得到明显改善,豆腥风味物质反式-2-己烯醛、正己醇和1-辛烯-3-醇经大孔树脂吸附后含量分别下降了3.92%、24.33%和31.21%。豆清中原有的反,反-2,4-癸二烯醛、反,反-2,4-壬二烯醛、苯甲醛等物质经吸附后未被检出。大豆清经过D851大孔树脂在合适的条件下吸附可以有效降低大豆清中钙、镁离子含量,改善豆腥味并较好地保留豆清中的蛋白质。本研究可为大豆清工业化利用提供理论指导。

大孔树脂对砷还原后液中铼的吸附研究

研究了MTA1701型和RCX5143型大孔弱碱性阴离子树脂对砷还原后液中铼的吸附和解吸性能。通过静态吸附,考察了预处理方式、时间、温度、酸度、平衡浓度对树脂吸附铼的影响;采用氨水静态解吸,考察了氨水浓度、解吸体积比、解吸时间、解吸次数对负载树脂解吸率的影响。结果表明:2种树脂性能相近,树脂经过硫酸浸泡预处理后吸附砷还原后液,吸附反应符合准二级反应动力学模型;热力学研究结果表明,降低温度对吸附铼有利,静态平衡吸附量随酸度增大而降低,随平衡浓度增大而提高;在氨水浓度10%、解吸液固体积比V(氨水)∶V(树脂)=2∶1、解吸时间20 min条件下解吸2次,2种树脂的解吸率均大于99.5%。

大孔树脂分离纯化毛酸浆叶黄素及其抗氧化活性评价

目的:研究大孔树脂分离纯化毛酸浆叶黄素的工艺条件,提高毛酸浆叶黄素的抗氧化活性。方法:在单因素实验的基础上,采用正交实验优化大孔树脂HP-20静态吸附毛酸浆叶黄素的工艺条件;以解析率为参考指标,探究毛酸浆叶黄素动态解析的工艺条件;通过测定毛酸浆叶黄素对OH自由基和DPPH自由基的清除率,评价其纯化前后的抗氧化活性。结果:静态吸附叶黄素最佳条件为:HP-20型树脂与叶黄素粗提液比例3∶1(g/mL)、叶黄素浓度400 mg/mL、吸附温度20℃、吸附时间4 h,此条件下吸附率达到63.44%。动态解析叶黄素最佳条件为:洗脱流速0.42 mL/min、洗脱剂60%乙醇溶液、上样液质量浓度800 mg/mL,此时解析率为56.16%。体外抗氧化研究结果显示,纯化前后叶黄素对OH自由基的最高清除率分别是97.66%和98.33%,对DPPH自由基的最高清除率分别是88.21%和90.47%。可见,纯化后的叶黄素能更好地清除OH自由基和DPPH自由基,且对OH自由基的清除效果更强。结论:优选大孔树脂分离纯化毛酸浆叶黄素工艺条件合理可行,且纯化后的叶黄素具有更强的抗氧化活性。

大孔树脂纯化大蓟总黄酮工艺优化及其纯化前后抗氧化活性比较

目的 研究大孔树脂纯化大蓟总黄酮的最佳工艺条件并比较提取物与纯化物的体外抗氧化活性。方法 通过静态吸附-解吸实验选择适宜型号的大孔树脂后,采取动态吸附-解吸实验探讨大蓟黄酮提取物的最佳纯化条件,同时测定不同产物对羟自由基(·OH)和1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH·)自由基的清除率。结果 AB-8大孔树脂动态吸附-解吸大蓟黄酮提取物的工艺条件为:上样液浓度为2mg·mL^(-1)、上样流速为1mL·min^(-1)、上样液体积为60mL、乙醇体积分数为75%、洗脱流速为1mL·min^(-1)和洗脱液体积为80mL。纯化后大蓟黄酮的含量由17.6%提高至61.2%。体外实验结果表明,当大蓟黄酮纯化物浓度为1.0mg·mL^(-1)时,对DPPH·和·OH的清除率分别为88.9%、95.1%,较提取物均有提高。结论 采用最佳工艺条件纯化大蓟黄酮粗提物简便可行,且能进一步增强大蓟总黄酮的抗氧化活性。