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贻贝启发接枝骨形态发生蛋白2成骨活性肽的介孔生物玻璃修复股骨髁缺损
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作者 俞磊 张巍 +3 位作者 秦毅 葛高然 柏家祥 耿德春 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第22期4629-4638,共10页
背景:骨形态发生蛋白2在胚胎发育、骨骼形成和再生修复中具有重要作用,但高剂量应用与癌症发病密切相关。骨形态发生蛋白2成骨活性段L20能够有效减少癌症等不良反应,并可显著促进骨组织再生。目的:将骨形态发生蛋白2活性肽段以贻贝衍生... 背景:骨形态发生蛋白2在胚胎发育、骨骼形成和再生修复中具有重要作用,但高剂量应用与癌症发病密切相关。骨形态发生蛋白2成骨活性段L20能够有效减少癌症等不良反应,并可显著促进骨组织再生。目的:将骨形态发生蛋白2活性肽段以贻贝衍生肽模拟策略接枝在介孔生物玻璃表面,探究其对组织工程成骨性能的影响。方法:(1)采用模板法合成介孔生物玻璃纳米颗粒,采用一步法合成负载骨形态发生蛋白2成骨活性肽L20的介孔生物玻璃纳米颗粒,表征负载骨形态发生蛋白2成骨活性肽L20介孔活性玻璃纳米颗粒的形貌与体外缓释性能。(2)分离提取SD大鼠骨髓间充质干细胞,传2代后分别与PBS(空白组)、介孔生物玻璃纳米颗粒(对照组)、负载骨形态发生蛋白2成骨活性肽L20介孔生物玻璃纳米颗粒(实验组)共培养,采用细胞活死荧光染色和CCK-8法检测细胞毒性和细胞增殖,扫描电镜观察细胞黏附;成骨诱导分化后,进行碱性磷酸酶染色、茜素红S染色与成骨相关基因表达检测。(3)取15只SD大鼠,建立双侧股骨髁缺损模型,采用随机数字表法分为3组:空白组(n=5)不植入任何材料,对照组(n=5)植入介孔生物玻璃纳米颗粒,实验组(n=5)植入负载骨形态发生蛋白2成骨活性肽L20介孔生物玻璃纳米颗粒。术后8周,进行股骨Micro-CT扫描与组织形态观察。结果与结论:(1)扫描电镜下可见负载骨形态发生蛋白2成骨活性肽L20介孔生物玻璃纳米颗粒为球形、单分散颗粒,透射电镜下可见其具有多孔结构,平均粒径为(268.10±0.58) nm,体外可缓释L20。(2)负载骨形态发生蛋白2成骨活性肽L20介孔生物玻璃纳米颗粒无细胞毒性,并且可促进骨髓间充质干细胞的增殖与黏附;与空白组、对照组相比,实验组碱性磷酸酶活性与细胞外基质矿化能力均升高(P <0.05),碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素mRNA表达升高(P <0.05)。(3)股骨Micro-CT扫描结果显示,与空白组、对照组相比,实验组新生骨量与骨密度均升高(P <0.05);苏木精-伊红与Masson染色结果显示,与空白组、对照组相比,实验组新骨生成与胶原纤维均增加。(4)结果表明,负载骨形态发生蛋白2活性肽L20介孔生物玻璃纳米颗粒具有良好的生物相容性及体内外促成骨性能,可促进SD大鼠股骨髁缺损的再生修复。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白2成骨活性肽 生物玻璃 纳米颗粒 邻苯二酚 成骨细胞分化 股骨髁缺损 骨组织工程 生物材料
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葛根蛋白酶解物大孔树脂吸附工艺优化及其体外抗氧化活性研究 被引量:1
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作者 岳奕含 严铭铭 +2 位作者 邵帅 丁奕元 江婷 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2024年第1期167-174,共8页
目的:优化大孔树脂吸附葛根蛋白酶解物工艺及其抗氧化活性研究。方法:采用Box-Behnken响应面法确定大孔树脂吸附葛根蛋白酶解物最佳工艺。以维生素C为对照,测定最佳工艺下纯化前后葛根蛋白酶解物的抗氧化活性。结果:大孔树脂的最佳吸附... 目的:优化大孔树脂吸附葛根蛋白酶解物工艺及其抗氧化活性研究。方法:采用Box-Behnken响应面法确定大孔树脂吸附葛根蛋白酶解物最佳工艺。以维生素C为对照,测定最佳工艺下纯化前后葛根蛋白酶解物的抗氧化活性。结果:大孔树脂的最佳吸附—解吸工艺为上样液质量浓度10.0 mg/mL,洗脱液流速2.6 mL/min,洗脱液乙醇体积分数74%,纯化后葛根蛋白酶解物含量提升至37.19%。大孔树脂纯化后的葛根蛋白酶解物对DPPH自由基、ABTS+自由基、羟自由基的清除率均强于吸附前的。结论:大孔树脂纯化后的葛根蛋白酶解物抗氧化效果良好,可以作为一种潜在的蛋白多肽应用于食品中。 展开更多
关键词 葛根蛋白 酶解物 树脂 抗氧化活性 吸附
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接枝多胺聚合物制备大孔阴离子交换色谱介质及其蛋白吸附行为评价
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作者 姜泽平 郭旺 +7 位作者 李子炀 侯恒扬 霍文迪 王佳一 马磊 靳海波 黄永东 张荣月 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期360-367,共8页
以环氧活化聚甲基丙烯酸酯大孔微球(FastSep-epoxy)为基质,通过接枝聚(烯丙基胺)(PAA)制备了大孔阴离子交换色谱介质(FastSep-PAA)。考察了介质的合成条件对离子交换容量(IC)及蛋白结合容量的影响,发现IC随PAA浓度、反应时间和溶液pH的... 以环氧活化聚甲基丙烯酸酯大孔微球(FastSep-epoxy)为基质,通过接枝聚(烯丙基胺)(PAA)制备了大孔阴离子交换色谱介质(FastSep-PAA)。考察了介质的合成条件对离子交换容量(IC)及蛋白结合容量的影响,发现IC随PAA浓度、反应时间和溶液pH的增加均表现为增长趋势;同时结合蛋白吸附容量的变化选择了最优合成条件。通过扫描电子显微镜观察介质的表面形貌,发现其孔隙连通性较好,且接枝前后介质孔道结构无明显变化,PAA配基密度对介质结构无明显影响。此外,通过压汞法和氮气吸附法测定接枝前后不同介质的孔径尺寸和孔径分布情况,并考察该类介质的孔径与蛋白吸附行为的关系,发现其蛋白结合容量未出现随介质孔径尺寸增加而显著下降的现象,且孔径尺寸增加更有利于蛋白在介质内部传质。在126 cm/h的流速下FastSep-PAA介质的原始孔径(即FastSep-epoxy的孔径)为400 nm时的蛋白动态结合容量(DBC)最高(70.3 g/L),该孔径下介质比表面积大,蛋白可吸附位点较多;原始孔径为700 nm及以下的介质蛋白DBC均随流速增加而均有一定下降;原始孔径为1000 nm的介质蛋白DBC几乎不受流速影响,流速由126 cm/h增加至628 cm/h时蛋白DBC仅下降3.5%,且在628 cm/h的流速下能保持57.7 g/L,蛋白分子在该孔径下的扩散速率受限较小,传质性能优异,这一特性表明该类大孔聚合物阴离子交换色谱介质在蛋白高通量分离中具有较大的优势。 展开更多
关键词 聚合物微球 阴离子交换色谱介质 接枝法 蛋白结合容量
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纳米孔技术研究蛋白质构象动力学
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作者 张明焜 吕守芹 龙勉 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第S01期211-211,共1页
目的蛋白质在履行生命功能时会形成多种构象态。检测和分析蛋白质的构象和变构对于阐明蛋白质结构和功能的关系至关重要。纳米孔技术具有水环境检测、高时空分辨率、无标记和高通量等优势,在蛋白质检测中具有巨大潜力。本研究将利用纳... 目的蛋白质在履行生命功能时会形成多种构象态。检测和分析蛋白质的构象和变构对于阐明蛋白质结构和功能的关系至关重要。纳米孔技术具有水环境检测、高时空分辨率、无标记和高通量等优势,在蛋白质检测中具有巨大潜力。本研究将利用纳米孔传感技术探索αXβ2整合素的不同构象态和变构过程。方法利用分子动力学(MD)模拟建立了纳米孔传感系统,以检测αXβ2的不同构象态。此外,基于拉伸分子动力学(SMD)模拟建立了纳米孔传感和原子力探针拉伸联用的方法,调控并探测了蛋白质的变构过程,并基于自由能分析了纳米孔空间约束对变构模式的影响。结果成功解耦了αXβ2的构象和取向对纳米孔离子电流的调制,估计了3种构象态的近似椭球形貌。利用椭球体积和形状特征区分了不同的构象态。此外,分析了纳米孔内的电导率的分布,厘清了孔壁和蛋白质对电导率的影响规律。进一步,建立了一种基于电、力耦合传感的新方法,以探测纳米孔中蛋白质的构象动力学,并通过新型SMD-椭球近似方法实时解析了中间态构象的结构特征。结果表明,纳米孔约束增加了αXβ2构象伸展所需克服的能垒。结论本研究通过对离子电流和蛋白质变构的综合分析,提升了纳米孔技术用于蛋白质构象和变构的检测能力。 展开更多
关键词 拉伸分子动力学 构象动力学 蛋白质构象 离子电流 纳米 中间态 形状特征 传感技术
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纳米孔蛋白质测序
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作者 李梓溢 伊雅琨 +1 位作者 刘蕾 吴海臣 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第10期2498-2518,共21页
基因组计划的成功不仅深化了人类对基因组结构的理解,也促使研究重点逐渐转向对蛋白质组学的解析。鉴于蛋白质在调节生物体内众多生理过程中的核心作用,蛋白质测序技术的发展显得尤为重要。DNA测序领域取得的巨大成就已经激发了研究者... 基因组计划的成功不仅深化了人类对基因组结构的理解,也促使研究重点逐渐转向对蛋白质组学的解析。鉴于蛋白质在调节生物体内众多生理过程中的核心作用,蛋白质测序技术的发展显得尤为重要。DNA测序领域取得的巨大成就已经激发了研究者对纳米孔技术在蛋白质测序应用中的兴趣,特别是其在快速、便捷及成本效益方面的潜力。本文综述了当前蛋白质测序的主要方法,并特别聚焦于纳米孔蛋白质测序面临的挑战、最新的进展以及重大突破。随着纳米孔技术的持续改进,该技术有望在蛋白质组学领域提供更高效和更精准的测序解决方案。 展开更多
关键词 蛋白质测序 纳米 电化学传感 单分子分析
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淋病奈瑟菌外膜蛋白Porin B通过抑制CD4^(+)T细胞增殖调控机体免疫应答的分析
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作者 朱有葱 杨鹏 罗浪 《吉林医学》 CAS 2024年第9期2033-2036,共4页
目的:探究淋病奈瑟菌(NG)外膜蛋白Porin B能否通过抑制CD4^(+)T细胞增殖来调控机体免疫应答。方法:从GenBank中获取NG菌株的Porin B基因的DNA序列,以NG菌株FA1090的DNA为模板,扩增目Porin B基因,并采用1.5%琼脂糖凝胶电泳对Porin B基因... 目的:探究淋病奈瑟菌(NG)外膜蛋白Porin B能否通过抑制CD4^(+)T细胞增殖来调控机体免疫应答。方法:从GenBank中获取NG菌株的Porin B基因的DNA序列,以NG菌株FA1090的DNA为模板,扩增目Porin B基因,并采用1.5%琼脂糖凝胶电泳对Porin B基因进行检测。将得到的PCR产物用Bam HⅠ和Eco RⅠ双酶切后克隆到酶切的载体pET30a中得到重组质pET30a-Porin B,并采用1.5%琼脂糖凝胶电泳对pET30a-Porin B进行检测。从C57BL/6小鼠的脾脏和淋巴结中分离CD4^(+)T细胞,分为对照组、低剂量pET30a-Porin B(LPB)组、中剂量pET30a-PorinB(MPB)组和高剂量PET30a-PorinB(HPB)组,对照组不做任何处理,LPB组、MPB组和HPB组分别与低、中、高剂量的pET30a-Porin B共培养。采用流式细胞术检测各组CD4^(+)T细胞增殖及凋亡情况并进行比较分析。结果:将PCR扩增产物进行1.5%琼脂糖凝胶电泳测定,在1.0 kb处得到一条清晰的条带,表明扩增出了正确的Porin B基因;将pET30a-Porin B进行1.5%琼脂糖凝胶电泳测定,出现1.0 kb的目的片段和5.4 kb的载体片段,说明重组质粒pET30a-Porin B构建成功。与对照组比较,LPB组、MPB组和HPB组的CD4^(+)T细胞增殖指数均显著下降,且随着重组质粒pET30a-Porin B的剂量增加,CD4^(+)T细胞增殖指数下降显著;与对照组比较,LPB组、MPB组和HPB组的CD4^(+)T细胞凋亡比例均显著增加,且随着重组质粒pET30a-Porin B的剂量增加,CD4^(+)T细胞凋亡比例增加更显著。结论:Porin B能够抑制CD4^(+)T细胞的增殖并促进其凋亡,且呈剂量依赖性。这表明Porin B能够通过抑制CD4^(+)T细胞增殖来调控机体免疫应答。后期还需大量研究及临床试验来证明Porin B的临床效果,为临床NG疫苗的研究提供基础临床数据。 展开更多
关键词 淋病奈瑟菌 外膜蛋白 porin B蛋白 CD4^(+)T细胞 免疫
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基于蛋白质组学技术探讨桦褐孔菌提取物治疗克罗恩病的作用机制
7
作者 韩立华 赵晓茹 +2 位作者 彭莉莉 郝渺 原红霞 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第9期43-55,共13页
目的采用蛋白质组学技术研究桦褐孔菌提取物治疗克罗恩病的作用机制。方法采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导建立克罗恩病(Crohn’s disease,CD)模型。48只SD雄性大鼠,随机分为对照组、模型组、桦褐孔菌提取物低(200 mg/kg)、中(400 mg/... 目的采用蛋白质组学技术研究桦褐孔菌提取物治疗克罗恩病的作用机制。方法采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导建立克罗恩病(Crohn’s disease,CD)模型。48只SD雄性大鼠,随机分为对照组、模型组、桦褐孔菌提取物低(200 mg/kg)、中(400 mg/kg)、高(800 mg/kg)剂量组和阳性对照组(美沙拉嗪,225 mg/kg)。药物干预1周后,进行疾病活动指数(DAI)评分和结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分;苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织病理变化;ELISA检测大鼠血清中IL-1β、IL-6和TNF-α炎症因子水平。取对照组、模型组及桦褐孔菌提取物高剂量组的结肠组织,采用非标记蛋白质组学分析鉴定各组大鼠结肠组织中的蛋白,并对其进行生物信息学分析。最后采用Western blot和RT-qPCR对关键蛋白进行验证。结果与模型组相比,桦褐孔菌提取物中、高剂量组的DAI、CMDI及HE染色评分显著降低(P<0.05或P<0.01),其血清中炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的含量也显著降低(P<0.05或P<0.01)。蛋白质组学显示,桦褐孔菌提取物高剂量组与模型组间有199个差异蛋白(DEPs),其中63个DEPs与CD相关,生物信息学结果显示63个DEPs要涉及NOD样受体信号通路、钙信号通路和坏死性凋亡等多条通路。Western blot和RT-qPCR检测各组大鼠结肠组织中Vdac1和Trpv2的蛋白和mRNA水平,与蛋白质组学结果一致。结论桦褐孔菌提取物可能通过干预Vdac1、Trpv2的表达,调节NOD样受体信号通路、钙信号通路和坏死性凋亡,从而达到治疗CD的效果。 展开更多
关键词 桦褐菌提取物 关键蛋白 蛋白质组学 克罗恩病
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一种表征可吸收胶原蛋白材料孔结构的方法研究
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作者 王常斌 王秀秀 +3 位作者 陈洪建 艾冲冲 万敏 卢文博 《中国医疗设备》 2024年第4期8-12,共5页
目的研究一种表征可吸收胶原蛋白材料微观形貌的方法,并分析其孔隙率和孔径。方法利用场发射扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope,SEM),在不同的加速电压下对未喷金样品和喷金样品进行拍摄,使用Image J软件对所得的SEM图像的... 目的研究一种表征可吸收胶原蛋白材料微观形貌的方法,并分析其孔隙率和孔径。方法利用场发射扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope,SEM),在不同的加速电压下对未喷金样品和喷金样品进行拍摄,使用Image J软件对所得的SEM图像的孔隙率和孔径进行分析,并对结果的有效性进行验证。结果样品未喷金时使用低倍加速电压可获得清晰的SEM图像;样品喷金后其耐受电压能力明显提高,即使在较高的加速电压下依然能获得清晰的SEM图像。使用Image J软件可对拍摄的SEM图像的孔径和孔隙率进行分析,其中,平均孔隙率为50.9%,平均孔径为11.9μm;孔隙率离散系数为8.6%,孔径离散系数6.7%。结论场发射SEM结合Image J软件是一种表征可吸收胶原蛋白材料孔结构的有效方法,可解决相关标准中方法缺失的问题。 展开更多
关键词 场发射扫描电子显微镜 可吸收胶原蛋白 结构 Image J软件
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经脐三孔腹腔镜胆囊切除术对慢性胆囊炎伴胆囊结石患者围术期指标及血清淀粉酶 血清淀粉样蛋白A水平的影响
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作者 雷剑辉 宋明华 王新明 《基层医学论坛》 2024年第19期29-32,共4页
目的 观察经脐三孔腹腔镜胆囊切除术(transumbilical laparoscopic cholecystectomy,TULC)对慢性胆囊炎伴胆囊结石患者围术期指标及血清淀粉酶、血清淀粉样蛋白A (serum amyloid A,SAA)水平的影响。方法 选取2019年5月—2022年5月鹰潭... 目的 观察经脐三孔腹腔镜胆囊切除术(transumbilical laparoscopic cholecystectomy,TULC)对慢性胆囊炎伴胆囊结石患者围术期指标及血清淀粉酶、血清淀粉样蛋白A (serum amyloid A,SAA)水平的影响。方法 选取2019年5月—2022年5月鹰潭市余江区人民医院收治的60例慢性胆囊炎伴胆囊结石患者作为研究对象,随机分为对照组和观察组,每组30例。对照组采用传统开腹胆囊切除术(open cholecystectomy,OC),观察组采用TULC,比较2组患者围术期指标、手术前后血清淀粉酶和SAA水平、术后并发症发生情况。结果 观察组切口大小、手术时间、术中出血量、术后排气时间及住院时间均低于对照组(P<0.05);术后,观察组血清淀粉酶、SAA水平低于对照组(P<0.05);观察组术后并发症发生率为3.33%,低于对照组的20.00%(P<0.05)。结论 经脐三孔腹腔镜胆囊切除术能有效改善慢性胆囊炎伴胆囊结石患者的围术期指标,降低血清淀粉酶、SAA水平,且术后并发症较少。 展开更多
关键词 慢性胆囊炎 胆囊结石 经脐三腹腔镜胆囊切除术 血清淀粉酶 血清淀粉样蛋白A
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栉孔扇贝糖蛋白的肿瘤抑制活性和对免疫功能的影响 被引量:36
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作者 顾谦群 方玉春 +1 位作者 辛现良 王长云 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期200-202,共3页
目的 : 通过观察栉孔扇贝糖蛋白 [Chlamys ( Azumapecten) farreri glycoprotein,FGP]的肿瘤抑制作用和对细胞免疫功能的影响 ,探讨肿瘤抑制作用与免疫功能之间的关系。方法 : 采用小鼠 S180 实体瘤模型观察 FGP的体内抑瘤作用 ,并进... 目的 : 通过观察栉孔扇贝糖蛋白 [Chlamys ( Azumapecten) farreri glycoprotein,FGP]的肿瘤抑制作用和对细胞免疫功能的影响 ,探讨肿瘤抑制作用与免疫功能之间的关系。方法 : 采用小鼠 S180 实体瘤模型观察 FGP的体内抑瘤作用 ,并进行了免疫学指标测定。结果 : FGP能显著抑制瘤重 ,并能提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率和 NK细胞的活性 ,增加小鼠免疫器官的重量。结论 : FGP具有显著的肿瘤抑制作用 ,这种作用可能通过增强小鼠细胞免疫功能而实现。 展开更多
关键词 扇贝 蛋白 肿瘤抑制 免疫功能
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子宫肌瘤细胞中孕激素受体M、A/B及porin蛋白表达观察 被引量:23
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作者 封全灵 王智霆 刘慧云 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第15期45-47,共3页
目的观察子宫肌瘤细胞中孕激素受体M(PR-M)、孕激素受体A/B(PR-A/B)及porin蛋白的表达变化,并探讨其意义。方法子宫肌瘤切除术中切取子宫肌瘤组织及瘤旁正常子宫平滑肌组织后冰上尽快送实验室,原代培养子宫肌瘤细胞和正常子宫平滑肌细... 目的观察子宫肌瘤细胞中孕激素受体M(PR-M)、孕激素受体A/B(PR-A/B)及porin蛋白的表达变化,并探讨其意义。方法子宫肌瘤切除术中切取子宫肌瘤组织及瘤旁正常子宫平滑肌组织后冰上尽快送实验室,原代培养子宫肌瘤细胞和正常子宫平滑肌细胞并鉴定。取第3代子宫肌瘤细胞(实验组)和正常平滑肌细胞(对照组),采用Western blotting法检测细胞中的PR-M、PR-A、PR-B、porin蛋白,分析PR-M、PR-A、PR-B蛋白与porin蛋白表达的相关性。结果实验组细胞中PR-M、PR-A、PR-B、porin蛋白相对表达量分别为0.130±0.012、0.432±0.052、0.456±0.045、0.525±0.082,对照组分别为0.086±0.015、0.223±0.036、0.269±0.026、0.202±0.034,实验组细胞中PR-M、PR-A、PR-B蛋白和porin蛋白相对表达量均高于对照组(P均<0.01)。实验组中PRM蛋白与porin蛋白相对表达量呈正相关关系(r=0.464,P<0.05)。结论子宫肌瘤细胞中PR-M、PR-A、PR-B、porin蛋白表达升高,PR-M、PR-A、PR-B、porin蛋白表达异常可能与子宫肌瘤的发病有关,且PR-M蛋白与porin蛋白可能在子宫肌瘤发病中起协同作用。 展开更多
关键词 子宫肌瘤 子宫肌瘤细胞 孕激素受体M 孕激素受体A 孕激素受体B porin蛋白
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大孔吸附树脂法去除淫羊藿多糖中蛋白的研究 被引量:20
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作者 李瑞军 李德耀 +2 位作者 张现峰 任冬春 刘宏民 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第1期67-70,共4页
从4种大孔吸附树脂中筛选出ADS-7,考察了其对淫羊藿多糖中蛋白的去除作用,并讨论了pH值、鞣酸、上样量等对树脂去蛋白效率的影响.结果表明,该方法对淫羊藿粗多糖中的蛋白具有较高的去除效率,淫羊藿粗多糖中的蛋白含量由1.2%下降到0.035%.
关键词 吸附树脂 淫羊藿多糖 蛋白
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多重耐药鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶、膜孔蛋白及β-内酰胺类靶位编码基因研究 被引量:17
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作者 许亚丰 耿先龙 +4 位作者 王春新 陈国千 赵琪 周丽珍 糜祖煌 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期58-64,共7页
目的研究一株多重耐药鲍曼不动杆菌(Multi-drug-resistant Acinetobacter baumannii,MDR-ABA)J65可能存在的β-内酰胺类药物耐药机制。方法 MDR-ABA J65株分离自2011年12月某三甲医院住院患者痰标本,用gyrA和parC基因PCR扩增、测序和BLA... 目的研究一株多重耐药鲍曼不动杆菌(Multi-drug-resistant Acinetobacter baumannii,MDR-ABA)J65可能存在的β-内酰胺类药物耐药机制。方法 MDR-ABA J65株分离自2011年12月某三甲医院住院患者痰标本,用gyrA和parC基因PCR扩增、测序和BLASTn比对确认菌种。用PCR法分析该菌株的PBP1a、PBP2、CarO和33种A^D类β-内酰胺酶编码基因,并对检出的β-内酰胺酶编码基因作了插入序列与β-内酰胺酶编码基因连锁检测。结果 MDR-ABA J65检出β-内酰胺酶编码基因bla TEM-1、bla ADC-62、bla OXA-23、bla OXA-66,插入序列与β-内酰胺酶编码基因连锁检测显示ISaba1-ADC-62和ISaba1-OXA-23为阳性。PBP1a、PBP2和CarO编码基因序列与鲍曼不动杆菌敏感株(SDF)相比均存在有义突变,且三维结构同源建模显示,与SDF株PBP1a、PBP2和CarO蛋白分子立体结构有明显差别。结论 MDR-ABA J65对β-内酰胺类耐药机制为PBPs和孔蛋白CarO变异及可移动遗传元件介异的β-内酰胺酶编码基因。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 Β-内酰胺酶基因 蛋白 外排泵蛋白 青霉素结合蛋白 多重耐药
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生物蛋清蛋白模板合成海绵状大孔无机氧化物 被引量:11
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作者 范杰 余承忠 +1 位作者 屠波 赵东元 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2001年第9期1459-1461,共3页
In this paper, a novel protein templating approach to synthesize macroporous materials has been demonstrated. Sponge like architectured macroporous oxides(silica, titania) have been firstly synthesized by using low co... In this paper, a novel protein templating approach to synthesize macroporous materials has been demonstrated. Sponge like architectured macroporous oxides(silica, titania) have been firstly synthesized by using low cost commercial egg white protein as the template. The pore size of the three dimensional macroporous materials can be tuned from 50 to 400 nm by adding different surfactant. The morphology and the channel of the macroporous materials can also be controlled by the surfactant. The formation of macroporous material is resulted from the phase separation between the protein and inorganic sol. 展开更多
关键词 合成 材料 模板 生物蛋清蛋白 海绵状大无机氧化物 生物大分子 分离
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大孔吸附树脂对草鱼蛋白水解液脱盐的作用 被引量:6
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作者 陈丽丽 赵利 +3 位作者 袁美兰 白春清 冯飞 王璐 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第5期84-88,共5页
为了脱除草鱼蛋白水解液中的盐,本研究筛选了4种型号大孔吸附树脂DA201-C、DA201-M、SQT-67和D002,对水解液中草鱼多肽的吸附能力进行测定,并进行静态吸附和解吸实验。结果表明:大孔吸附树脂DA201-C对草鱼多肽的吸附效果较好,其吸附量... 为了脱除草鱼蛋白水解液中的盐,本研究筛选了4种型号大孔吸附树脂DA201-C、DA201-M、SQT-67和D002,对水解液中草鱼多肽的吸附能力进行测定,并进行静态吸附和解吸实验。结果表明:大孔吸附树脂DA201-C对草鱼多肽的吸附效果较好,其吸附量随草鱼多肽质量浓度的增加而增加;体积分数75%的乙醇对大孔吸附树脂DA201-C的洗脱效果最佳;DA201-C大孔吸附树脂对水解液脱盐的最佳条件为上样流速0.5 BV/h,上样质量浓度为30 mg/m L,水清洗速率为2 BV/h,洗脱采用体积分数75%的乙醇以2 BV/h的流速洗脱,在此条件下大孔吸附树脂DA201-C对水解液的脱盐率达97.17%。 展开更多
关键词 草鱼 蛋白水解液 吸附树脂 吸附 解吸
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介孔材料SBA-15固定化胰蛋白酶的研究 被引量:8
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作者 董颖超 齐涛 +3 位作者 秦玉昌 王丽娜 李军国 张懿 《现代食品科技》 EI CAS 2007年第11期19-21,26,共4页
在酸性条件下以正硅酸乙酯(TEOS)为硅源、非离子表面活性剂Pluronic P123为模板剂合成了介孔分子筛SBA-15,将其作为载体,对胰蛋白酶进行了固定化研究。研究了固定化条件对固定化酶量的影响,以及固定化酶的热稳定性和操作稳定性。结果表... 在酸性条件下以正硅酸乙酯(TEOS)为硅源、非离子表面活性剂Pluronic P123为模板剂合成了介孔分子筛SBA-15,将其作为载体,对胰蛋白酶进行了固定化研究。研究了固定化条件对固定化酶量的影响,以及固定化酶的热稳定性和操作稳定性。结果表明,当酶液浓度大于5mg/mL,固定化时间10h时,胰蛋白酶的固定化效果最好,固定化酶量可达23.6mg/g。固定化酶的热稳定性与游离酶相比有了显著的提高,且固定化酶具有较好的操作稳定性,连续反应6批次后,酶的剩余活性仍保持在40%以上。 展开更多
关键词 材料 SBA-15 蛋白 固定化酶
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铜绿假单胞菌的耐药现状及外膜孔蛋白分析 被引量:6
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作者 余广超 李菊香 +3 位作者 刘菊珍 付强 刘丽玲 温旺荣 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期244-246,共3页
目的:总结分析我院2007年-2009年铜绿假单胞菌对常用抗生素的耐药状况,以指导临床合理选用抗生素,同时探讨外膜孔蛋白缺失介导的铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药机制。方法:采用PCR方法检测外膜孔蛋白OprD的编码基因,利用Whonet 5.4软件... 目的:总结分析我院2007年-2009年铜绿假单胞菌对常用抗生素的耐药状况,以指导临床合理选用抗生素,同时探讨外膜孔蛋白缺失介导的铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药机制。方法:采用PCR方法检测外膜孔蛋白OprD的编码基因,利用Whonet 5.4软件对药敏资料进行统计分析。结果:3年中铜绿假单胞菌每年的分离数量分别为132株、159株和173株,分离率分别为13.6%、14.1%和19.3%,主要分离至呼吸内科和ICU病房,标本类型则以痰液为主,474株铜绿假单胞菌对米诺环素和莫西沙星的耐药率最高,分别是89.50%和81.50%,对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为37.1%和34.80%,多重耐药菌株占49.50%,其中7.80%为泛耐药菌株。随机选择的8株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌中,有一株外膜孔蛋白OprD编码基因出现缺失。结论:铜绿假单胞菌整体耐药现象比较严重,对亚胺培南的耐药率也较高;OprD的缺少是引起本组铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的机制之一。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 外膜蛋白 耐药性
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大孔吸附树脂法去除无梗五加果粗多糖中蛋白的研究 被引量:10
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作者 冯颖 孟宪军 +1 位作者 王建国 李振华 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2008年第5期43-46,共4页
从4种大孔吸附树脂中筛选出HPD-400作为去除无梗五加果粗多糖中蛋白的树脂。考察上样量和洗脱剂用量对树脂去蛋白效率的影响。结果表明,该方法对无梗五加果粗多糖中的蛋白具有较高的去除效率,蛋白去除率达到89.37%,纯化后产品中多糖含... 从4种大孔吸附树脂中筛选出HPD-400作为去除无梗五加果粗多糖中蛋白的树脂。考察上样量和洗脱剂用量对树脂去蛋白效率的影响。结果表明,该方法对无梗五加果粗多糖中的蛋白具有较高的去除效率,蛋白去除率达到89.37%,纯化后产品中多糖含量由原来的20.5%提高到83%。 展开更多
关键词 吸附树脂 无梗五加 多糖 蛋白
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大孔吸附树脂静态吸附草鱼蛋白水解物中氨基酸的研究 被引量:7
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作者 赵谋明 任娇艳 +2 位作者 崔春 曾晓房 游丽君 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期22-26,共5页
研究了4种大孔吸附树脂对草鱼蛋白水解物中氨基酸的吸附情况,结果表明,树脂最大静态吸附量由大到小排序为XDA-200>LSA-800C>XDA-5>LSA-8B,树脂吸附后酶解液的颜色和风味有所改善;进一步研究表明,XDA200型树脂除吸附游离氨基酸... 研究了4种大孔吸附树脂对草鱼蛋白水解物中氨基酸的吸附情况,结果表明,树脂最大静态吸附量由大到小排序为XDA-200>LSA-800C>XDA-5>LSA-8B,树脂吸附后酶解液的颜色和风味有所改善;进一步研究表明,XDA200型树脂除吸附游离氨基酸外,对肽分子也有较强的吸附力;芳香氨基酸主要以游离态形式吸附,其中色氨酸因与其他不易被树脂吸附的氨基酸结合而导致总色氨酸吸附量不高;支链氨基酸也主要以游离态形式吸附;从营养价值角度分析,除色氨酸含量稍偏高外,其他氨基酸含量变化情况均表明草鱼蛋白酶解物经大孔树脂吸附有望实现“高支低芳”的氨基酸组成特点。 展开更多
关键词 吸附树脂 草鱼蛋白水解物 氨基酸
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重庆某三甲医院2014-2016年铜绿假单胞菌耐药表型及金属酶、外膜孔蛋白耐药基因型分析 被引量:12
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作者 李进 胡韦维 +3 位作者 张峰领 陈鸣 邓少丽 鲁卫平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第22期2200-2205,共6页
目的检测亚胺培南耐药铜绿假单胞菌金属酶基因分布和外膜孔蛋白OprD2基因缺失情况,了解铜绿假单胞菌的耐药状况。方法收集第三军医大学大坪医院野战外科研究所2014-2016年临床分离的非重复铜绿假单胞菌1 887株,VITEK-MS质谱仪进行菌株鉴... 目的检测亚胺培南耐药铜绿假单胞菌金属酶基因分布和外膜孔蛋白OprD2基因缺失情况,了解铜绿假单胞菌的耐药状况。方法收集第三军医大学大坪医院野战外科研究所2014-2016年临床分离的非重复铜绿假单胞菌1 887株,VITEK-MS质谱仪进行菌株鉴定,最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)法测定其对10种常用抗菌药物的敏感性,利用WHONET5.6软件对药敏资料进行统计分析,同时采用亚胺培南-EDTA纸片法筛选金属酶表型阳性的菌株,用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)测铜绿假单胞菌金属β-内酰酶(metallo-β-lactamase,MBL)相关基因(IMP、VIM、SPM、GIM、SIM、NDM)和外膜孔蛋白OprD2基因的情况。结果 3年中铜绿假单胞菌每年的分离数量分别为756株(9.4%)、579株(9.5%)和552株(10.7%),主要来自ICU病房和呼吸内科病房,标本类型以痰液为主;2014-2016年分离出的铜绿假单胞菌对妥布霉素、庆大霉素的耐药率逐年下降,其耐药率分别从2014年的11.3%、13.2%下降至2016年的7.8%、9.0%,对左旋氧氟沙星、哌拉西林/他唑巴坦的耐药率呈上升趋势,其耐药率从2014年的10.7%、9.2%上升至2016年的23.5%、11.6%。从基因型分布情况来看,269株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌中MBL基因阳性51株(18.9%),外膜孔蛋白OprD2缺失158株(58.7%);51株产酶菌株中VIM型阳性29株,SPM型阳性22株,未检测出其他基因型。结论铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率较高;产MBL和外膜孔蛋白OprD2基因缺失是引起铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 耐药性 金属酶 外膜蛋白OprD2基因
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