超高效液相色谱-串联质谱法测定鱼中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留量

采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法测定鱼中孔雀石绿(MG)、隐色孔雀石绿(LMG)、结晶紫(CV)、隐色结晶紫(LCV)残留。样品加入内标,经乙腈涡旋提取、离心、中性氧化铝柱去除脂肪后,氮吹近干,V(乙腈)∶V(5mmol/L醋酸铵)=50∶50的溶液定容,上机测定。MG、CV及其代谢物在4.0μg/L质量浓度范围内有良好的线性关系,MG、LMG、CV的检出限为0.01μg/kg,LCV的检出限为0.06μg/kg。在空白样品中分别添加0.25、2.0μg/kg混合标准溶液和2.0μg/kg内标溶液进行回收率实验,平均回收率在81.4%～97.8%之间,相对标准偏差RSD(n=6)在5.9%～11.2%之间。对109批次实际鱼样进行检测,4种物质均有不同程度的检出。该方法能够灵敏、准确、可靠的测定鱼中MG、LMG、CV、LCV残留,为鱼类水产品养殖、流通及使用环节的市场监管提供参考依据。

Au@PVP核壳纳米粒子作为表面增强拉曼散射基底检测孔雀石绿

采用水热法合成了粒径均一、壳层厚度可控的Au@PVP核壳纳米粒子,利用壳层PVP分子分散纳米粒子的特性,使其形成均一、排列致密的单层结构,利用其内核金纳米粒子的等离子共振效应实现了孔雀石绿(MG)分子的表面增强拉曼检测。通过优化吸附时间与壳层厚度,在致密的、均匀的核壳纳米粒子表面增强拉曼散射(SERS)基底上实现MG分子高灵敏分析检测,检测线性范围1×10^(-10)~1×10^(-5)mol/L,线性相关系数R2达到0.98,检出限可达1×10^(-12)mol/L。将本方法用于罗非鱼鱼肉中MG含量检测,样品未检出,样品加标回收率为70.8%~126.0%。结果表明,本方法快速准确、操作简单,可用于鱼肉中MG的快速检测。

孔雀石绿及其代谢物在斑点叉尾体内及养殖环境中的消解规律

研究了以全池泼洒的投药方式,孔雀石绿(MG)(池塘中MG的理论浓度为1 mg/L)及其主要代谢物隐性孔雀石绿(LMG)在斑点叉尾(Ietalurus punetaus)肌肉和皮肤以及养殖水体和底泥中的残留消除规律。采用高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)分析MG及其代谢物LMG在斑点叉尾体内及环境中的浓度水平。结果显示:肌肉、皮肤中MG于用药后第1天最高浓度分别为:(42.77±5.26)μg/kg和(6.36±0.11)μg/kg,消除半衰期T1/2分别为57.76 d、31.51 d;皮肤和肌肉中LMG分别在用药后第3天和第1天达到最高(502.27±20.43)μg/kg和(125.26±12.76)μg/kg,消除半衰期T1/2分别为33.01 d、38.51 d。这表明MG在斑点叉尾体内会迅速转化为LMG,且LMG残留在皮肤中的浓度大于肌肉中的浓度。养殖环境底泥中同时存在MG和LMG,以LMG为主,并且LMG呈现蓄积的趋势,在第360天出现最高浓度(5.92±1.23)μg/kg;水体中MG最高浓度出现在第1天,为(46.44±7.39)μg/L,随后急剧降至1μg/L左右,水体中几乎不存在LMG。

硅藻土/丙烯酸水凝胶的合成及其对染料孔雀石绿的吸附研究

以丙烯酸(AA)和硅藻土(DIA)为原料,N,N′-亚甲基双丙烯酰胺(MBA)为交联剂,在水溶液中利用辉光放电电解等离子体引发一步制得硅藻土/丙烯酸(DIA/AA)复合水凝胶,研究了其对阳离子型染料孔雀石绿(MG)的吸附行为,并考察了pH值、吸附时间、初始浓度等因素对吸附性能的影响.结果表明,最佳的吸附pH为5.6,吸附时间为4h,DIA/AA水凝胶对孔雀石绿的吸附行为符合准二级反应动力学方程和Langmuir吸附等温式.

孔雀石绿的毒性及其残留检测研究进展

孔雀石绿因其低廉的价格和良好的效果,被广泛应用于水产养殖业,但因其对动物及人体的严重毒害作用而受到越来越多的关注。文章就孔雀石绿的毒副作用、检测技术的研究进展及其在食品安全性检测中的应用前景进行了综述,旨在促进孔雀石绿检测技术的发展及提高大众食品安全意识。

孔雀石绿对小鼠睾丸超微结构的影响

目的:观察孔雀石绿(malachite green,MG)对小鼠睾丸细胞超微结构的损伤。方法:32只雄性成年BALB/c小鼠随机均分为4组,MG浓度设为:0mg/L(对照组,A组)、100mg/L(B组)、400mg/L(C组)和800mg/L(D组)。连续灌胃给药30d,A组以等量生理盐水代替MG。应用透射电镜观察睾丸超微结构的改变。结果:B组睾丸超微结构与A组的基本相似。C组曲细精管基膜多见皱褶,支持细胞和精原细胞的胞浆空泡化及核固缩较常见。D组曲细精管基膜多呈波浪式皱褶,支持细胞和精原细胞的胞浆空泡化程度加重,核固缩明显甚至降解,管腔中多见畸形精子,间质细胞空泡化、脂滴增多。结论:MG染毒可导致大鼠睾丸曲细精管基膜、支持细胞、精原细胞、精子和间质细胞等发生超微结构的改变,剂量增加时病理改变加重。

孔雀石绿与蛋白质相互作用的电化学行为的研究

在pH4．7的NaAc—HAc缓冲液中，孔雀石绿（MG）能与牛血清白蛋白相互作用形成复合物，使孔雀石绿在-0．72v（vsSCE）处有一极谱还原峰峰电流下降，在最佳条件下，峰电流的下降值同牛血清白蛋白（BSA）的浓度在0．5～20mg／L范围内呈线性关系，其线性回归方程为△ip（nA）=-4．78＋41casA（mg／L），相关系数r=0．996（n=10），检出限为0．4mg／L。可将该方法应用于血清样品的测定，结果满意。

孔雀石绿分子印迹膜—表面等离子体共振传感器构建研究

采用分子印迹和表面等离子体共振技术,构建了用于检测孔雀石绿的分子印迹膜-表面等离子体共振传感器（MIM-SPR）。首先利用表面引发聚合的方法在SPR金片表面合成孔雀石绿分子印迹膜,再对MIM-SPR传感器的吸附响应性、选择性、再生性进行评价。该传感器的响应值与孔雀石绿在1×10-2~5μg·m L-1浓度范围内线性关系良好（R=0.999）,检测限为0.067μg·m L-1,且选择性和再生性好。结果表明以分子印迹膜作为识别元件的MIM-SPR传感器在检测孔雀石绿时操作简单、成本低廉、选择性和再生性好。

玉米须衍生磁性多孔碳的制备及其对海水中孔雀石绿的萃取

以可再生农业废弃物玉米须为碳前驱体,三氯化铁为铁源,通过溶剂热碳化法制备了表面负载Fe3O4纳米粒子的磁性水热碳材料(MHC),再以氢氧化钾(KOH)为化学活化剂,通过高温热解法成功制备了生物质衍生磁性多孔碳(AMC)。该磁性纳米复合材料具有多孔结构,可为目标分析物提供大量的吸附位点,而均匀地分散在碳基质表面的铁氧化物(Fe3O4及Fe2O3)纳米粒子有助于吸附剂及负载分析物从水溶液中快速分离。AMC对孔雀石绿(MG)具有显著的吸附性能,最大吸附量可达312.5 mg/g。采用磁性固相萃取(MSPE)结合超高效液相色谱(UPLC)建立了水中MG的分析方法。优化了影响AMC萃取性能的关键因素,在100 mL pH 7.0的样品溶液中,使用6 mg AMC萃取20 min,以甲醇-乙醇(9∶1,体积比)作为洗脱液,可获得最佳萃取结果。该方法对0.05~5μg/L范围内的MG呈现良好的线性(r=0.999 6),其检出限为0.01μg/L,定量下限为0.03μg/L。使用AMC萃取加标海水样品中的MG,其回收率为104%~106%,RSD为1.7%~3.4%。该方法可用于养殖海水中MG的灵敏检测。

基于纳米复合材料直读显色检测养殖水中的孔雀石绿

为了建立孔雀石绿(MG)快速直读显色检测与半定量方法,本试验基于溶胶-凝胶法首次制备了碘酸钾@二氧化钛纳米复合材料,将其打印在薄层色谱(TLC)条带上隐性孔雀石绿(LMG)的比移值(Rf)处形成自显色区,辅以显色支持液,并结合Iamge J软件对显色后的条带进行分析。针对实际样品检测时,先将MG全量还原成无色的LMG,再进行显色分析。结果表明,显色条带颜色深浅度与MG浓度之间存在明确的线性关系(R2=0.99),即可用肉眼直接判断,实现了养殖水体中MG总量的直读显色半定量检测。该方法的线性范围为2.5~160μg·L^-1,肉眼识别检出限为1.6μg·L^-1。同时,液相-质谱法证实显色分析结果具有可靠性。本研究结果为MG快速检测领域提供了新的参考,为研究其他三苯甲烷类染料的直读显色分析提供了理论依据。

磁性蟹壳碳吸附材料对溶液中孔雀石绿吸附性能研究

对废弃蟹壳进行活化和碳化处理,采用共沉淀的方法将Fe_(3)O_(4)附载到蟹壳炭上,制备磁性蟹壳活性炭(MAC),并探究其对染料孔雀石绿(MG)的吸附性能和机理。研究结果表明:MAC去除水溶液中的MG时具有1876.58 mg/g的最大吸附容量,实验结果与Langmuir吸附等温模型和准二级动力学模型拟合结果高度吻合。MAC的高吸附容量主要归因于活化过程创造的大量微米级孔洞以及蟹壳本身去除碳酸盐后的生物结构,提供了充足的活性位点。磁性分离回收后,MAC可以用无水乙醇脱附再生。经过5次MG吸附脱附循环,MAC保持84.6%的高吸附率。对于废弃物的二次利用和实际的废水处理而言,MAC具有高吸附效率和快速磁分离性能,是一种极具前景的生物质可回收吸附剂。

花生壳基活性炭的制备及吸附孔雀石绿性能分析

以废弃花生壳为原料依据不同温度条件制备活性炭并进行扫描电镜及比表面积(BET)表征.探讨了吸附时间对孔雀石绿(MG)吸附性能的影响,并获得了花生壳活性炭吸附MG的最大饱和吸附量.表征结果表明,经过NaOH改性后花生壳在碳化过程中于内表面产生的孔洞大多属于微孔;当温度达到800℃左右时花生壳表面结构开始被破坏甚至坍塌.花生壳活性炭用于吸附MG的最佳碳化温度为800℃,最大吸附量为306.06 mg/g.花生壳活性炭对MG的吸附为吸热过程,且吸附过程符合Langmuir等温方程(R^(2)=0.9999),准二级动力学方程(R^(2)=0.9936).

高效液相色谱法测定水产品中孔雀石绿及隐色孔雀石绿的残留

探讨水产品中孔雀石绿（MG）及其代谢产物隐色孔雀石绿（LMG）残留的高效液相色谱检测方法。用乙腈、乙酸铵缓冲溶液提取，乙腈再提取，二氯甲烷反萃取；并结合匀浆、振荡提取、固相萃取等一系列提取净化步骤；采用SunFire C18（4．6mm×150mm，5μm）色谱柱、氧化铅柱和二极管阵列检测器（DAD）在619nm处，以乙腈：乙酸铵溶液（0．125mol／L，pH值4．5）80：20为流动相进行分离分析；外标法定量。结果MG和LMG平均回收率为89％～107％，相对标准偏差在4．7％～6．1％。

利用高效液相色谱-串联质谱法同时测定养殖鱼中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留量

目的:建立一种利用高效液相色谱-串联质谱仪的方法,测定养殖鱼中孔雀石绿(Malachite Green,MG)、结晶紫(Crystal Violet,CV)、隐色孔雀石绿(Leuco Malachite Green,LMG)及隐色结晶紫(Leuco Crystal Violet,LCV)残留量,为了解辖区市售水产品中禁用兽药残留情况,为食品安全风险评估提供可靠依据。方法:本方法依据《2017年国家食品污染和有害因素风险监测工作手册》监测方法,样本经乙腈提取,中性氧化铝固相萃取小柱净化,液相色谱分离后进入质谱仪,以电喷雾正离子化模式(ESI+)和多反应检测(Multi Reaction Detection,MRM)扫描模式测定,同位素内标法定量。结果:养殖鱼中孔雀石绿(MG)、结晶紫(CV)及其代谢物共4种成分在0.25~10.00 ng/mL线性关系良好,相关系数r均大于0.998,检出限均为0.5μg/kg,在0.5~2.0μg/kg加标回收率在83.8%~109.7%。对40份养殖鱼(大菱鲆、乌鳢和鳜鱼)进行检测,其中2份隐色孔雀石绿(LMG)有检出,检出率为5%,其他成分无检出。结论:该方法简单快速、定量准确、灵敏度高,可用于养殖鱼中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留定量测定。

农业部发布组织查处“孔雀石绿”等禁用兽药

河南商报记者向农业部反映，湖北省仙桃市、洪湖市和河南省郑州市等地违法经营、使用“孔雀石绿”问题严重。“孔雀石绿”是一种化工产品，具有高毒、高残留及“三致”（致畸，致癌，致突变）作用，2002年我部已将其列入禁用药物清单，禁止用于所有食品动物。针对目前“孔雀石绿”等禁用兽药滥用现象有所抬头的严峻形势，农业部就有关事项通知如下。

翘嘴红鲌鱼苗对几种药物的敏感性试验

通过试验确定了翘嘴红鲌鱼苗对8种药物的最低致死浓度范围、半致死浓度和安全浓度。鱼苗对这8种药物的敏感性大小依次为：孔雀石绿>兴棉宝>硫酸铜>漂白粉>敌百虫>亚甲基蓝>甲醛>食盐。并对各种药物使用的有关问题进行了讨论。

LC-MS/MS法同时测定水产品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留量

[目的]建立测定水产品中孔雀石绿(MG)、结晶紫(GV)及其代谢产物残留量的液相色谱-串联离子阱质谱仪测定法(LC-MS/MS)。[方法]将样品中残留的MG或GV用硼氢化钾还原为其相应的代谢产物隐色孔雀石绿(LMG)或隐色结晶紫(LGV),经净化预处理,用串联离子阱质谱在电喷雾-全扫描二级质谱(MS/MS)模式进行质谱测定,与HPLC方法测定结果比对验证。[结果]在55件可疑样品中,用本法测定有46件为阳性,9件为假阳性,本法测定结果满意。[结论]采用LC-MS/MS法测定水产品中MG、GV及其代谢产物含量,结果准确,灵敏度高。

邵武市向养鳗业主发出健康养殖倡议书

为全面治理整顿和彻底解决鳗鱼养殖中“孔雀石绿”等禁用药品和化合物残留问题，近日，邵武市畜牧水产局向全市各养鳗业主、渔药，饲料等经营单位发出倡议。一是各养鳗业主应自觉遵守国家法律法规，坚决不使用“孔雀石绿”等违禁兽药和化合物。加强行业自律，提高应对国际市场竞争能力；二是各兽药经营单位，坚决遵守国家《兽药管理条例》，坚决不出售“孔雀石绿”等违禁药品以及不合格药、劣质药、过期药，做到诚信服务，守法经营：三是各饲料生产厂和经营户，