大鼠孕期尼古丁暴露致成年雌性子代抑郁症易感机制研究

目的:探讨大鼠孕期尼古丁暴露(PNE)致成年雌性子代抑郁症易感的宫内发生机制。方法:将受孕Wistar大鼠随机分为对照组和PNE组,PNE组大鼠于孕9~20 d皮下注射尼古丁2 mg/(kg·d),2次/日。部分子代大鼠于孕20 d取脑切片Neu N免疫荧光染色观察前额叶皮质和海马形态改变;部分大鼠正常出生喂养至3月龄,给予慢性不可预见性温和刺激(CUMS),检测刺激前后雌性子代大鼠行为学改变,实时定量PCR检测前额叶皮质和海马组织中与突触生长发育相关基因的表达。结果:与对照组相比,旷场试验中PNE组成年雌性子代大鼠CUMS后表现为总路程、总速率和直立次数明显减少(P<0.05),粪便粒数增加(P<0.05),强迫游泳实验中不动时间明显延长(P<0.01),表现出抑郁行为;PNE组孕20 d胎鼠前额叶皮质变薄,海马细胞层结构不清,轴突不连续;CUMS后PNE组成年子代前额叶皮质和海马,突触生长发育相关基因NR1、NR2A、NR2B、Syn I和Snap25 m RNA转录水平明显下降(P<0.01)。结论:PNE导致大鼠成年雌性子代应激后抑郁症易感性增加,可能与子代前额皮质和海马神经元和突触形成发育等基因转录水平降低,所致前额叶皮质和海马结构和功能改变有关。

孕期尼古丁暴露加重高脂饮食所致成年子代大鼠肾上腺功能紊乱及其性别差异

目的通过观察孕期尼古丁暴露(PNE)所致的宫内发育迟缓(IUGR)仔鼠出生后,在高脂饮食(HFD)模型下,血中皮质酮(CORT)浓度和肾上腺甾体合成功能的变化及其性别差异,从胰岛素样生长因子^(-1)(IGF^(-1))信号通路角度探讨其发生机制。方法 PNE(2.0 m L·kg^(-1)·d^(-1))建立大鼠IUGR模型,子代断奶后给予HFD喂养直至出生后第24周。检测仔鼠血CORT含量、肾上腺甾体合成功能、IGF^(-1)信号通路及11β-HSDs/CR系统表达。结果与HFD对照组相比,PNE组♂子代血CORT浓度呈降低趋势,♀呈升高趋势;PNE组♂子代肾上腺甾体合成酶表达(如St AR、3β-HSD、P450c11)明显降低,PNE组♀子代肾上腺甾体合成酶表达(如SF^(-1)和P450c21)增加;PNE组♂子代IGF^(-1)信号通路中IGF^(-1)、IGF^(-1)R升高,PNE组♀子代IGF^(-1)信号通路各基因表达明显增加;PNE组♂子代11β-HSD2、GR表达降低,11β-HSD1/11β-HSD2比值升高,而PNE组♀子代相应的基因表达以增加为主。结论 PNE可致HFD子代大鼠肾上腺甾体合成功能异常变化,并呈现较明显的性别差异,其发生机制与尼古丁所致的肾上腺甾体合成低功能宫内编程及出生后IGF^(-1)介导的追赶性生长有关。

孕期尼古丁暴露对新生儿神经、智力及生长发育的影响

目的探讨孕期尼古丁暴露(PNE)对新生儿神经、智力及生长发育的影响。方法选取本院行产前保健并分娩的500例单胎妊娠孕妇作为研究对象,根据孕妇PNE情况,将其分为有PNE组与无PNE组,每组各250例,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定孕妇体内可替宁含量,并在产后随访12个月,比较两组新生儿神经、智力、生长发育及疾病易感性。结果有PNE组孕晚期静脉血、尿和脐带血COT-HRP含量均明显高于无PNE组(P<0.05);两组新生儿3、15和27日龄时,有PNE组新生儿NBNA评分、CDCC评分均明显低于无PNE组(均P<0.05);有PNE组新生儿身长、头围均明显小于无PNE组,体质量明显轻于无PNE组(P<0.05);有PNE组新生儿出现低体质量、窒息、畸形、死胎的发生率(25.60%)明显高于无PNE组(5.60%)(P<0.05)。结论孕妇存在PNE时,其体内COT-HRP含量明显高于正常值,极易导致新生儿神经、智力发育延迟,并影响其生长发育,增加新生儿疾病易感性。关注孕妇孕期生活环境对新生儿生长发育具有重要意义。

孕期尼古丁暴露、高脂饮食和性别三种因素在胎源性高胆固醇血症发生过程中的交互作用研究

目的探讨尼古丁暴露(PNE)、高脂饮食(HFD)和性别在胎源性高胆固醇血症发生过程中的交互作用。方法孕鼠在GD11开始皮下注射尼古丁2 mg·kg^(-1)·d^(-1)直到自然生产,仔鼠从出生后4周开始断奶,雌雄分笼,在对照组和PNE组随机挑选仔鼠给予HFD饲料饲养(含89.5%玉米粉、10%猪油和0.5%TC),并在出生后24周处死大鼠,取血和肝脏检测。ELISA法检测血清皮质酮(CORT)水平,生化法检测血总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,实时定量PCR法检测胎盘、肝组织胆固醇代谢和胰岛素样生长因子1(IGF1)信号通路的相关基因mRNA表达。结果正常饮食和HFD下血胆固醇表型:正常饮食下,PNE雌、雄子代血TC均升高(P<0.01),雄性血LDL-C升高(P<0.01)。HFD下,PNE雌雄子代血TC、LDL-C均升高(P<0.01)。正常饮食和HFD下肝脏胆固醇代谢:正常饮食下,PNE组Apo B、CYP7A1的mRNA表达升高(P<0.01),雌性SR-B1和LDLR的mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01)。高脂饮食下,PNE组HMGCR、CYP7A1、SR-B1的mRNA表达均下降(P<0.05,P<0.01),雄性LDLR的mRNA表达也降低(P<0.05)。HFD可加重PNE所致的血TC、HDL-C水平升高,并进一步抑制肝脏HMGCR和SR-B1的mRNA表达。雄性PNE组子代血LDL-C水平以及肝脏SR-B1表达的变化较雌性PNE组明显。此外,雄性HFD组的HMGCR、CYP7A1和SR-B1的表达改变较雌性明显。结论HFD可加重PNE所致的成年子代胆固醇水平升高,且HFD可影响PNE子代肝脏胆固醇代谢基因的功能,部分存在性别差异。

电针“足三里”穴对孕期及哺乳期尼古丁暴露新生鼠肺发育不良的影响

目的观察电针"足三里"穴对孕期及哺乳期尼古丁暴露新生鼠肺功能、肺指数和肺组织形态学的影响。方法将20只成年SD雌鼠采用随机数字表法分为生理盐水组(S组)、生理盐水加电针"足三里"组(S+ST36组)、尼古丁组(N组)、尼古丁加电针"足三里"组(N+ST36组),采用皮下注射尼古丁注射液[1 mg/(kg·d),100μL]造模,从妊娠第6天至新生鼠出生后21 d,用动物肺功能分析系统检测各组新生鼠肺功能,根据肺组织重量和体重计算各组新生鼠肺指数,采用HE染色法观察各组新生鼠肺组织形态学变化。结果与S组比较,N组呼气峰值(PEF)、肺动脉顺应性(Cdyn)显著降低(P<0.05),气道阻力(RL)显著增高(P<0.05),肺指数显著降低(P<0.05);新生鼠肺组织中肺泡数明显减少,肺泡体积增大,部分肺泡壁破裂相互融合。与N组比较,N+ST36组PEF、Cydn显著升高(P<0.05),RL显著降低(P<0.05),肺指数显著升高(P<0.05);新生鼠肺组织中肺泡数量增多、肺泡面积减小和肺泡壁破裂融合情况减少。结论电针孕期和哺乳期尼古丁暴露大鼠"足三里"穴可能通过改善新生鼠肺功能、肺指数及肺组织形态学变化发挥对新生鼠肺发育的保护效应。

电针对围产期尼古丁暴露新生鼠肺功能及肺形态的影响

目的:通过比较电针孕期及哺乳期尼古丁暴露母鼠"足三里"和"尺泽"穴对新生鼠肺功能和肺形态影响的差异,探讨能改善围产期尼古丁暴露引发新生鼠肺发育变化的特异效应穴位。方法:将24只雌性孕期SD大鼠随机分为正常组、模型组、足三里组、尺泽组,每组6只。自孕期第6天起,正常组皮下注射0.9%氯化钠溶液,余组均皮下注射尼古丁至产后第21天(生产当天不注射)制备孕期及哺乳期尼古丁暴露模型。采用每日2Hz/15Hz、1mA电针母鼠双侧"足三里"穴或"尺泽"穴治疗,与造模同时进行。实验结束后采用小动物肺功能测定仪测定子代鼠肺功能,HE染色法光镜下观测子代鼠肺泡化程度。结果:与正常组相比较,模型组吸气峰值流速(PIF)值、肺总阻力(RL)值和呼气相气道阻力(RE)值均显著升高(P<0.01),呼气峰值流速(PEF)值和肺动态顺应性(Cdyn)值均显著降低(P<0.01),模型组子代鼠肺泡数量减少,肺泡变形破裂融合,肺泡直径显著增加(P<0.01)。与模型组比较,足三里组PIF值、RL值和RE值均显著降低(P<0.01),PEF值和Cdyn值均显著升高(P<0.01,P<0.05),且肺泡数量明显增多,肺泡破裂现象改善,肺泡直径显著降低(P<0.01);尺泽组PIF值显著降低(P<0.01),RL值和RE值均明显降低(P<0.05),PEF值和Cdyn值有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),尺泽组肺泡数量明显增多,肺泡破裂现象改善,肺泡直径有减小趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:电针"足三里"和电针"尺泽"均能通过改善孕期及哺乳期尼古丁暴露新生鼠肺功能及肺形态,防护子代鼠肺发育不良,且电针"足三里"穴效果优于电针"尺泽"穴。