孕期应激及对子代HPA轴的影响及机制探讨

动物实验表明,孕期应激可以改变子代下丘脑-垂体-肾上腺轴的功能,并与人类和动物的认知障碍、行为和精神疾病相关。本研究讨论了孕期应激对子代HPA轴的影响及可能的机制,其中,母体糖皮质激素、胎盘、子代HPA轴负反馈调节受损是重要因素。各种因素的具体机制及各因素间的相互作用仍需进一步研究。

丰富环境对孕期应激大鼠子代海马糖皮质激素的影响

目的：检测丰富环境对孕期应激大鼠子代海马糖皮质激素受体（GlucocorticoidReceptor，GR）的影响。方法：SD孕鼠随机分为2组，正常组和实验组。正常组动物不做任何处理，其子代断乳后在标准环境下喂养；实验组动物在孕第13～19天接受限制性应激，其子代断乳后一半在标准环境下喂养（构成应激组），另一半子代在丰富的环境下喂养（构成应激＋丰富环境组）。所有子代出生后第35天被处死。用ABC免疫组织化学和Westernblot方法分别检测海马GR的表达。结果：GR阳性产物广泛分布于海马各区神经元，应激组GR表达明显少于正常组；应激＋丰富环境组海马GR的表达明显多于应激组，与正常组相比差别无统计学意义。结论：丰富环境能有效逆转孕期应激造成的子代海马GR的表达降低。

孕期应激对子代影响及相关机制的探讨(英文)

孕期应激对子代的影响受到多种因素的影响。虽然目前机制尚不清楚,但是大量实验证明其可能与HPA轴活性的改变, NPY能系统,多巴胺系统和5-HT神经元有关。此外,研究影响孕期应激的各种因素之间的互相作用和联系有助于明确孕期应激对子代影响的具体机制。本文从神经内分泌、情绪、学习记忆等多方面综合分析了孕期应激对子代影响的特点,包括应激强度依赖性、时间差异性和个体差异性。

孕期应激对子代雌鼠成年后钙结合蛋白Parvalbumin和Calretinin表达的影响

目的探讨孕期应激对子代雌鼠成年后钙结合蛋白阳性神经元表达的影响。方法 6只SD孕鼠随机分为孕期应激组(PS组)和对照组(CON组)。PS组孕鼠在妊娠晚期接受限制性应激,CON组不给予孕期应激。子代成年后,PS组和CON组雌性子代随机分别又分为PS-S组,PS-NS组,CON-S组和CON-NS组(n均=6)。PS-S组和CON-S组动物先后接受限制性应激和冰水应激。动物在接受应激后均给与水和酒精喂养,用Western blot检测海马钙结合蛋白Parvalbumin(PV)和Calretinin(CR)蛋白的表达,进一步结合共聚焦免疫荧光组织化学方法检测PV和CR在海马CA1、CA3区和齿状回(dentate gyrus,DG)的表达。结果与CON-NS组相比,海马区PV和CR的蛋白表达在CON-S,PS-NS和PS-S组下降,以PS-S组表达最低。PV在海马CA1、CA3区和DG的免疫荧光结果与PV的蛋白表达呈一致性,免疫阳性细胞明显减少;而CR的表达除了在海马CA1区的PS-NS组略有升高外,在其余各组的表达均较减少。与CON-NS组相比,PV和CR在其它各组的蛋白表达和免疫阳性细胞计数差异有统计学意义,其中以PS-S组的表达降低最为有统计学意义(P<0.05)。结论孕期应激可影响子代雌鼠成年后海马结构钙结合蛋白PV和CR的表达。

环境富集对孕期应激大鼠青年期子代海马p—CREB表达的影响

目的：检测环境富集对孕期应激子代海马磷酸化的环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（p-CREB）表达的影响.方法：将SD孕鼠随机分为2组,一组动物不做任何处理,其子代断乳后在标准条件下喂养,为正常组;另一组动物在孕第13～19天接受限制性应激,其子代断乳后,一半在标准条件下喂养,构成应激组,另一半在子代环境富集条件下喂养（构成应激＋环境富集组）.子代在生后35d,用免疫组织化学和免疫印迹方法分别检测海马p-CREB的表达.结果：p-CREB阳性产物广泛表达于海马各区神经元.免疫印迹方法显示应激组p-CREB表达量明显少于正常组;应激＋环境富集组海马p-CREB的表达量也明显多于应激组,与正常组的差别无统计学意义.结论：环境富集能有效逆转孕期应激导致的子代海马p-CREB表达下调.

不同环境对小鼠孕期应激子代海马CREB磷酸化的影响

目的：检测不同环境对小鼠孕期应激子代海马磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（pCREB）的影响。方法：将12只孕小鼠随机分为对照组和实验组。对照组动物不做任何处理,其子代断乳后喂养于标准环境;实验组动物在孕第12~18天实施限制性应激,其子代断乳后一半喂养于标准环境（应激＋标准环境组）,另一半子代喂养于丰富的环境（应激＋丰富环境组）。子代出生后5周被处死,用免疫印迹和免疫组织化学显色法检测海马内p-CREB的表达。结果：p-CREB免疫阳性产物广泛分布于海马各区神经元。免疫印迹显示应激＋标准环境组p-CREB表达明显少于对照组（P〈0.05）;应激＋标准环境组海马p-CREB的表达也明显少于应激＋丰富环境组（P〈0.05）,应激＋丰富环境组与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：丰富环境能有效改善孕期应激造成的子代海马p-CREB表达降低。

甘丙肽及其受体在孕期应激大鼠新生子代前额叶皮层和海马脑区表达的性别差异

目的探讨SD大鼠孕期应激对子代前额叶皮层(PFC)和海马脑区发育的影响。方法 SD雌鼠12只,随机分为对照组和孕期应激组,建立大鼠孕期应激模型(孕8~21d期间,束缚应激2h/d),子代出生当天,称量体重,计算雌雄比例;各组按窝别随机取雌雄子鼠各6只,取PFC和海马,采用实时定量PCR(Q-PCR)方法检测两组的雌雄性子代PFC和海马脑区甘丙肽(GAL)、甘丙肽受体(GALRs)、脑源性神经营养因子(BDNF)和酪氨酸激酶B(TrkB)的表达,分析两组子代各指标的差异。结果与对照组比较,孕期应激组子代大鼠体重明显降低[(6.45±0.19)vs.(7.57±0.23)g],差异具有统计学意义(P<0.01);孕期应激组雌性子代有增加趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。孕期应激组雄性子代PFC脑区的TrkB mRNA表达较对照组显著增加[(1.35±0.12)vs.(1.00±0.07)],雌性子代PFC脑区GALR1mRNA及BDNF mRNA表达水平较对照组显著降低[分别为(0.51±0.13)vs.(1.04±0.11)、(0.73±0.07)vs.(1.11±0.10)](P均<0.05)。雌性子代海马脑区的GAL mRNA表达较对照组显著增高[(2.51±0.18)vs.(1.00±0.11)],BDNF mRNA表达显著降低[(0.75±0.05)vs.(1.00±0.03)](P均<0.05)。结论大鼠孕期应激可对子代大鼠脑发育产生影响,雌性子代较雄性子代更敏感。

水迷宫训练逆转孕期应激造成的子代海马NR2B表达的降低

目的:比较空间学习记忆中孕期应激子代和对照组子代海马空间学习功能密切相关蛋白NR2B的表达。方法:建立孕期束缚应激小鼠模型,在出生后第3周用酶联免疫法检测子代雄性小鼠血清皮质酮;在出生后第9周,采用免疫蛋白印迹和real-timePCR法检测子代雄性小鼠非空间学习记忆状态及空间学习记忆中海马NR2B的表达水平。结果:(1)基础状态下孕期应激子代血清皮质酮水平与对照组子代并无差异,应激状态下孕期应激子代血清皮质酮水平(43.7×104pg/ml)明显高于对照组子代(18.7×104pg/ml);(2)孕期应激雄性子代在出生后第9周海马NR2B mRNA和蛋白表达均显著低于对照组雄性子代。但经过空间学习记忆训练,两组海马NR2B蛋白水平无明显差异。结论:孕期应激减少子代海马神经元NR2B的表达,但水迷宫行为训练可逆转孕期应激造成的子代海马神经元NR2B的表达降低。

益生菌改善孕期应激子代大鼠异常行为和海马损伤

目的:在怀孕期间孕妇极易对外界刺激产生应激反应,影响自身健康和胎儿发育。目前针对孕妇在孕期的应激反应没有很好的治疗方式,本研究旨在探索益生菌对孕期应激子代异常行为和海马损伤的作用。方法:将SD孕鼠分为对照组、应激组、益生菌组,每组6只。对照组不做任何处理;应激组在母鼠怀孕第15~20天进行束缚应激;益生菌组在母鼠怀孕第15~20天进行束缚应激的同时给予双歧杆菌三联活菌胶囊,子代继续给予益生菌饲喂直至生后60 d(P60)。子代大鼠在出生后60~70 d完成旷场实验、高架十字迷宫实验、新物体识别实验和Barnes迷宫实验等行为学检测。采用尼氏染色反映海马神经元受损的情况;免疫组织化学染色检测小胶质细胞标志物离子钙接头蛋白1(ionized calcium binding adapter molecule 1,IBA-1)的表达,以反映小胶质细胞活化情况;ELISA检测血浆TNF-α、IL-1β的含量;蛋白质印迹法检测Bax、Bcl-2及caspase-3的表达。结果:应激组子代大鼠在旷场中央区滞留时间明显少于对照组(P<0.01),益生菌组在旷场中央区滞留时间明显长于应激组(P<0.05)。应激组子代大鼠在开放臂停留的时间短于对照组(P<0.05),且进入开放臂的次数少于对照组(P<0.01);益生菌组子代大鼠在开放臂停留的时间长于应激组,且进入开放臂的次数多于应激组(均P<0.05)。应激组子代大鼠的对新、旧物体的分辨比明显低于对照组(P<0.01),益生菌组子代大鼠对新、旧物体的分辨比明显高于应激组(P<0.05)。应激组子代大鼠的犯错次数明显多于对照组(P<0.05),益生菌组子代大鼠的犯错次数明显少于应激组(P<0.05)。与对照组比较,应激组子代大鼠CA1、CA3及DG区尼氏体数量均明显减少(均P<0.001),海马DG区小胶质细胞活化的数量明显增加(P<0.01),外周血TNF-α、IL-1β的含量显著增加(P<0.05或P<0.01),Bcl-2的蛋白质表达水平明显下调,Bax及caspase-3的蛋白质表达水平明显上调(均P<0.001);与应激组相比,益生菌组子代大鼠CA1、CA3及DG区尼氏体数量均明显增加(P<0.001,P<0.01,P<0.05),海马DG区小胶质细胞活化的数量明显减少(P<0.05),外周血TNF-α、IL-1β的含量显著减少(P<0.05),Bcl-2的蛋白质表达水平明显上调,Bax及caspase-3的蛋白质表达水平明显下调(均P<0.001)。结论:益生菌干预可以部分改善孕期应激子代大鼠的焦虑及认知功能损伤,其机制可能与增加神经元的数量、抑制海马小胶质细胞的活化、减轻炎症和凋亡有关。

音乐干预对孕期应激仔鼠恐惧行为的影响及相关机制

目的研究音乐干预对孕期应激仔鼠恐惧行为和杏仁核胃泌素释放肽受体（GRPR）表达的影响。方法 Wistar孕鼠16只随机分为应激组（n=8）和对照组（n=8）。应激组妊娠11-20 d每天将其置于窄小的固定器中并给予强光照射。对照组不给予刺激。应激组仔鼠出生后第1天起,予播放音乐（SM组）或相同分贝的白噪音（SW组）,SC组不给予刺激。生后60 d行防御退缩试验,免疫荧光组织化学和荧光实时定量PCR测定杏仁核GRPR及其mRNA表达。结果与其他两组比较,SM组仔鼠潜伏期显著缩短（P〈0.001）,出小室次数显著增多（P〈0.001）;杏仁核GRPR阳性细胞计数及mRNA表达显著增加（P〈0.001）。结论生后给予音乐干预可以纠正孕期应激仔鼠异常的恐惧行为,同时伴有杏仁核GRPR高表达。

母代孕期应激在损伤成年子代认知功能中对CX3CL1/CX3CR1轴的影响

背景孕期应激可损害子代发育过程中中枢神经系统之间的交流,而CX3CL1/CX3CR1轴在神经元-小胶质细胞间建立了一个独特的通讯系统。目的明确孕期应激在损伤子代认知功能中是否对CX3CL1/CX3CR1轴产生影响并探究其作用机制。方法将12只SD孕鼠随机分为应激组和对照组,每组6只,应激组在孕15~21 d进行限制性应激,对照组正常饲养。用旷场、高架十字迷宫、新物体识别及Y迷宫四种行为学实验评估成年子代认知功能,ELISA检测母代及子代糖皮质激素,免疫荧光染色、Western blot检测子代海马CX3CL1、CX3CR1、Iba-1表达情况。结果母代孕期应激组及子代糖皮质激素升高(P<0.05)。母代孕期应激组子代在旷场实验中,中央区滞留时间与对照组相比减少,差异有统计学意义(P<0.05);在高架十字迷宫中进入开放臂次数和滞留时间与对照组相比减少,差异有统计学意义(P<0.05),表现出焦虑样行为;在新物体识别实验中识别指数降低(P<0.05),表现出学习记忆能力下降;在Y迷宫实验中对新异臂的识别减少(P<0.05),表现出空间记忆能力下降。母代孕期应激组子代小胶质细胞激活Iba-1表达升高,CX3CR1表达升高,CX3CL1表达下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论孕期应激损害成年子代认知功能可能与CX3CL1/CX3CR1通讯障碍有关。

孕期应激对母儿影响的研究新进展

孕期的精神社会应激会显著增高患者的CRH和皮质醇水平,造成不良妊娠结局,如早产、低体重儿、妊娠期高血压疾病。而且孕期应激与产后抑郁发生关系密切,对后代的心理、行为、中枢系统发育都有不利影响。

中晚期孕期束缚应激对子代下丘脑多巴胺能神经元发育的影响

目的研究中晚期孕期束缚应激对子代下丘脑多巴胺能神经元发育的影响。方法使用怀孕SD大鼠，实验组在孕期第15～21d进行束缚应激，对照组则不受任何干扰。子代大鼠出生的当天为出生后的第0天。在子代大鼠出生后的第1天（P1），第7天（P7）和第30天（P30），分别测子代大鼠的体重，通过免疫组织化学染色和Western Blotting，观察和比较下丘脑内合成多巴胺的关键酶酪氨酸羟化酶（TH）染色像素密度及TH蛋白水平变化。结果与正常对照组相比，中晚期孕期束缚应激子代大鼠在P1体重较低，下丘脑TH染色像素密度和TH蛋白水平上调，这种异常在P7和P30消失。结论孕期府激使子代下丘脑多巴胺神经元早期发育异常，可能是造成子代神经系统行为学异常的原因之一。

母孕期应激与心身疾病

全世界每年会有上千万人遭受自然灾害的袭击，造成巨大经济损失并影响心身健康。在自然灾害发生时，妊娠期女性遭受精神创伤会导致强烈的心理和生理应激反应，且自然灾害后的衣食住行、

母孕期应激和NR3C1甲基化与成年期糖脂代谢的相关性

目的探讨糖皮质激素受体基因(NR3C1)启动子区DNA甲基化在经历母孕期地震应激人群成年后的代谢改变及其与糖脂代谢水平的相关性。方法于2014年1月至2015年3月选择100例经历母孕期地震应激者作为母孕期地震应激组,于同期选择76例未经历过母孕期地震应激者作为对照组,母孕期地震应激组又根据经历地震时的孕期分为孕早期暴露组(41例)、孕中期暴露组(30例)和孕晚期暴露组(29例)。采用亚硫酸氢盐测序法检测NR3C1启动子区甲基化程度,并收集所有入选者的身高、体重、BMI、血压、空腹血糖、血脂等代谢相关指标。结果母孕期地震应激组的NR3C1启动子区甲基化程度明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);亚组比较发现,孕中期暴露组NR3C1启动子区甲基化程度均高于与孕早期及孕晚期暴露组,差异均有统计学意义(P<0.01)。母孕期地震应激组成年期的BMI、总胆固醇高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。Pearson相关性分析显示,母孕期地震应激组的NR3C1启动子区甲基化程度与其总胆固醇水平呈正相关(r=0.256,P<0.05),而孕中期暴露组则与其甘油三酯及总胆固醇水平呈正相关(r=0.406、0.378,P<0.05)。结论经历母孕期地震应激者较高的NR3C1启动子区甲基化程度与其成年后糖脂代谢水平具有相关性。

母孕期应激对后代海马神经生物学影响的研究进展

流行病学及动物研究均表明，母孕期遭受的应激对后代认知功能存在远期影响，并增加后代精神障碍与躯体疾病的患病风险。母孕期应激对后代神经生物学方面的影响，尤其是对海马系统的影响日益成为国内外学者研究的重点。现就母孕期遭受应激导致后代海马相关神经生物学变化做一综述。

孕期应激对子代大鼠骨髓淋巴干细胞发育的影响

孕期应激对子代产生的影响是多方面的,这种影响是复杂的。研究表明,出生前的应激经历可导致出生后子代长期的免疫功能改变。这些改变追其根源与骨髓淋巴干细胞的改变有关。本文综述了大鼠孕期经历应激的子代骨髓淋巴干细胞所受的影响及免疫系统的相关改变,并根据现有的研究提出假说,为进一步研究孕期应激导致子代免疫系统改变的机理研究提供新的思路。

孕期应激对子代雌鼠成年后酒精摄取行为及脑内小白蛋白表达的影响

目的探讨孕期应激对子代雌鼠成年后酒精摄取行为以及脑内小白蛋白表达的影响。方法6只SD孕鼠随机分为孕期应激组（PS组，n=3）和对照组（CON组，n=3）。PS组孕鼠在妊娠晚期接受限制性应激，CON组孕鼠不给予孕期应激。子代成年后，PS组和CON组雌性子代分别随机分为PS-S组（n=6）和PS-NS组（n=6），CON-S组（n=6）和CON-NS组（n=6）。PS-S组和CON—S组动物先后接受限制性应激和冰水应激。所有动物均给予水和酒精溶液进行喂养，比较各组子鼠的基础酒精摄人量和子代应激后的酒精摄人量。用免疫组化方法检测子代海马和前额皮质小白蛋白的表达。结果PS—NS组在第1，4，6周的酒精摄人量明显低于CON—NS组（P〈0．05）。PS—S组在限制性应激后第1周的酒精摄人量[（3．79±0．47）kg·d^-1·g^-1]明显高于CON-S组[（1．68±0．68）kg·d^-1·g^-1]（P〈0．05），而PS—S组动物在冰水应激后第3周的酒精摄人明显小于CON—S组（P〈0．05）。另外，PS—S组子代海马CA2区和前额皮质M1区的小白蛋白表达均明显低于CON-S组（15．82±0．30，26．52±0．12，P〈0．05）。结论孕期应激可影响成年雌性子代的酒精摄取行为，此过程可能与海马和前额皮质小白蛋白表达的减少有关。

孕期应激对绵羊子代表型编程效应研究进展

家畜孕期应激对子代行为、生理和神经方面有着复杂的影响,这种影响可以持续到子代成年甚至跨代遗传。家畜孕期管理不当会对母体产生应激,使母体及其子代的生长、健康和福利受损,从而影响家畜的经济价值。本文以绵羊孕期应激模型和人工合成糖皮质激素模拟应激模型的试验结果为切入点,系统总结了绵羊孕期应激对子代表型的影响,并讨论了研究结果异同的可能原因。研究发现,绵羊孕期应激可以影响子代出生体重、调节子代下丘脑—垂体—肾上腺轴发育、影响子代行为模式和认知能力、改变子代基因表达和大脑形态,并且母体糖皮质激素水平是决定子代表型变化的主要因素。未来研究方向应该侧重于绵羊孕期应激对子代基因表达、免疫功能、生产性能和母性行为的影响,以及不同妊娠时期母体应激的比较研究、对子代影响的连续研究和探讨孕期应激不良编程的应对策略研究。

iTRAQ法分析孕期慢性应激子鼠脑海马组织中蛋白质组学变化

目的分析孕期慢性应激子鼠脑海马组织中差异表达的蛋白质及富集的信号通路,从整体水平上探讨可能的作用机制。方法通过慢性不可预知温和应激(CUMS)建立母鼠孕期慢性应激模型,模型组母鼠每天给予刺激,连续21 d;对照组母鼠正常环境饲养。应激前1天、第1、7、14、21天分别进行内眦静脉取血,测定母鼠血浆皮质酮含量。子鼠分为对照子鼠组和模型子鼠组,采用同位素标记的iTRAQ技术对子鼠海马组织的差异蛋白进行分析和鉴定,GO功能注释和KEGG富集分析差异蛋白参与的信号通路,String数据库分析差异蛋白间的相互作用。结果模型组母鼠血浆皮质酮含量高于同期对照组(P均<0.05),说明模型组大鼠处于慢性应激状态。两子鼠组共筛选和鉴定出5065个蛋白,差异蛋白有26个(P<0.05),上调蛋白19个(FC>1.2),下调蛋白7个(FC<0.83)。GO功能注释表明差异蛋白主要参与23种生物过程、14种细胞组分和9种分子功能。KEGG富集分析共鉴定到57条通路,其中显著富集的信号通路有8条(P<0.05),主要包括神经活性配体-受体相互作用、cGMP-PKG信号通路、胰腺分泌等。差异蛋白功能互作网络分析发现:酪氨酸蛋白激酶受体(INSR)、丝氨酸蛋白酶1(PRSS1)、cGMP依赖性蛋白激酶(PKG)、胆囊收缩素(CCK)关系最为密切。结论孕期慢性应激对子鼠脑海马发育的影响以神经活性配体-受体相互作用、cGMP-PKG信号通路及胰腺分泌为主的多种信号通路共同作用,与INSR、PRSS1、PKG、CCK等蛋白的差异表达密切相关。