孕期炎症刺激对子代小鼠脂质代谢及FAT/CD36表达的影响

目的以FAT/CD36为切入点,研究母体孕期炎症刺激对子代脂质代谢的影响。方法 8周龄C57小鼠,♀♂2∶1合笼配种,d 2♀鼠分笼饲养记为在孕0 d,在孕11 d给予孕鼠一次性腹腔注射脂多糖(LPS)(75μg·kg^(- 1)),对照组注射0.2 m L的生理盐水。分别于子鼠4、8、12周取材(♀鼠取肾周脂肪、♂鼠取附睾周围脂肪),对子代小鼠体重、内脏脂肪重量、脂肪组织和细胞中游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、FAT/CD36表达量进行检测。结果与NS组相比,LPS组小鼠体重、内脏脂肪重量、脂肪系数明显增高,♂鼠附睾脂肪和血液中TG、FFA的表达量明显升高;各周龄♂鼠脂肪组织和诱导的3T3-L1细胞中FAT/CD36明显上调(P<0.05)。结论母体孕期炎症刺激导致子代小鼠脂肪发育异常,游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、FAT/CD36的表达量明显升高,其机制可能与FAT/CD36对脂质代谢的调节有关。

孕期炎症刺激致子代大鼠血脂异常的机制初探

目的探索孕期炎症刺激对子代个体的血脂的影响及其机制。方法复制孕期炎症刺激致子代大鼠高血压的模型。子代个体出生后,每周测量体重,子代8周龄时取材。检测血脂以及肝功能指标;HE染色观察肝脏形态;透射电镜观察肝细胞亚细胞结构改变;蛋白免疫以及分析线粒体电子呼吸链复合物蛋白的表达;检测线粒体膜电位、细胞色素c氧化酶活性和ATP含量。结果孕期炎症刺激可导致子代个体血脂水平紊乱,肝功能受损。HE染色以及透射电镜结果发现孕期刺激后子代个体肝细胞凋亡,线粒体肿胀。孕期刺激后子代个体肝线粒体膜电位显著降低(P<0.01),肝ATP含量低于对照组(P<0.05),细胞色素c氧化酶活性升高(P<0.01)。WB分析线粒体电子呼吸链复合物蛋白的表达发现,孕期炎症刺激子代肝中ComplexⅠ的表达显著升高(P<0.01),ComplexⅡ的表达显著降低(P<0.01),而ComplexⅢ和ComplexⅣ的表达并没有发生改变。结论孕期炎症刺激可能通过诱导子代个体的肝的线粒体损伤来导致子代个体肝脂代谢异常。

孕期炎症刺激对子代大鼠心肌纤维化的影响

目的探讨孕期炎症刺激对子代大鼠心肌纤维化的影响。方法 8只SD孕鼠采用随机数字表法完全随机分为:对照组(Con)和脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激组,每组4只。分别在孕第8、10、12天腹腔注射0.5 m L生理盐水或LPS(0.79 mg/kg)。仔鼠6、8、10、12、16周龄测尾动脉血压;组织切片Masson染色观察心肌组织纤维化;透射电镜观察心肌显微结构;实时荧光定量PCR检测心肌组织缝隙连接蛋白(Connexin,Cx)43、微管相关蛋白1轻链3B(microtubule-associated protein 1light chain 3B,LC3B)、DNA甲基转移酶-1(DNA methyltransferase 1,DNMT-1)mRNA表达水平;Western blot检测Cx43、LC3B、DNMT-1蛋白表达。结果与Con组子代相比,LPS组子代大鼠6、8、10、12、16周龄时血压均明显升高(P<0.01);心肌组织胶原沉积增多,细胞间缝隙连接减少,自噬小体数量增加;Cx43和DNMT-1 mRNA表达水平显著增加(P<0.05),而LC3B的mRNA表达水平显著下降(P<0.05);Cx43蛋白表达水平较Con组子代明显降低(P<0.05),LC3BⅡ/LC3BⅠ和DNMT-1的蛋白表达水平均明显增加(P<0.05)。结论孕期炎症刺激可导致子代大鼠心肌纤维化。这可能与孕期炎症刺激子代大鼠心肌组织自噬活化及Cx43蛋白表达降低相关。

孕期炎症子代大鼠海马和皮层COX-2通路的改变

目的观察并探讨孕期炎症子代大鼠海马和皮层环氧化酶2(cyclooxygenase 2,COX-2)及下游产物改变的机制。方法♀SD大鼠随机分为对照组和脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)组,LPS组孕鼠在孕期d 11、14、18分别腹腔注射LPS 300μg·kg^(-1),对照组给予生理盐水。记录子鼠出生后d 3、10、20、30的体质量;d 30采用水迷宫实验、旷场实验和自发活动测试等,检测子鼠神经系统发育情况;采用苏木精-伊红染色,观察脑组织病理学改变;ELISA检测炎性因子的含量;Western blot检测COX-2的蛋白表达。结果 LPS组子鼠的体质量与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);LPS组子鼠学习和记忆功能明显受损,水平运动和自发活动明显减少(P<0.05),海马和皮层的神经细胞核固缩明显(P<0.05,P<0.01);LPS组子鼠海马和皮层中PGD2、PGE2、PGI2、TNF-α、IL-6和IL-1β的含量明显升高(P<0.05,P<0.01); LPS组子鼠海马和皮层中COX-2蛋白水平明显升高(P<0.01)。结论 COX-2及下游通路改变可能与孕期炎症致子代大鼠脑损伤的机制有关。

孕期LPS刺激对子代6周龄大鼠血管结构的影响

目的研究孕期炎症刺激剂脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激对子代大鼠6周龄时血管结构的影响。方法 12只Sprague dawley(SD)孕鼠随机分为3组:对照组(control,Con)、LPS刺激组、LPS刺激加二硫代氨基四氢呋喃(pyrrolidinedithiocarbamate,PDTC)干预组(L+P),分别在孕8~14 d腹腔注射生理盐水、LPS(0.79 mg·kg^(-1))或LPS加PDTC(100 mg·kg^(-1)),LPS于孕d 8、10、12给药;生理盐水及PDTC于d 8~14每天给药。子代出生6周测体质量;透射电镜观察血管超微结构;实时荧光定量PCR检测仔鼠胸主动脉连接蛋白(connexin,Cx)Cx37、Cx40、Cx43、Cx45的mRNA表达水平;Western blot和免疫荧光检测仔鼠胸主动脉Cx37、Cx40、Cx43、Cx45的蛋白表达水平。结果与Con组相比,LPS组子代大鼠在6周时♂♀体质量均明显增加(P<0.01);L+P组♂鼠明显低于LPS组(P<0.05),而♀鼠差异无显著性。LPS组内皮受损,内皮细胞间可见明显缝隙连接(gap junction,GJ),相对于Con组较长且多见;L+P组内皮损伤程度较LPS组稍有改善。LPS组Cx43 mRNA及蛋白表达均明显低于Con组(P<0.05),L+P组则明显高于LPS组(P<0.05);Cx37、Cx40和Cx45各组间mRNA及蛋白表达差异无统计学意义。LPS组Cx43荧光强度及荧光点数明显比Con组降低,而L+P组明显比LPS组高,各组间Cx37、Cx40和Cx45荧光强度和荧光点数并无明显差异。结论孕期LPS刺激可致子代大鼠在6周龄时出现血管结构损伤,这种损伤可能持续于新生儿期,并与其成年发生高血压密切相关。