孕酮受体基因外显子4作为小尾寒羊多胎候选基因的研究

试验采用53只小尾寒羊母羊(山东梁山和泰安)、25只无角陶赛特羊母羊(甘肃永昌肉用种羊场)、35只蒙古羊母羊(甘肃武威)。分别采集颈静脉血样提取DNA,利用GenBank中人孕酮受体基因外显子4和绵羊孕酮受体基因mRNA序列,设计绵羊孕酮受体基因外显子4限制性片段特异性引物,进行PCR扩增,对其PCR产物克隆、测序验证。用PCR-SSCP检测多态性,通过DNA测序确定单核苷酸多态位点(SNPs)。经过研究分析表明,小尾寒羊由野生型AA型、杂合AB型、突变纯合BB型3种基因型组成,蒙古羊由AA型、AB型两种基因型组成,无角陶赛特羊只有AA型一种基因型,不存在突变;在基因型分布上小尾寒羊与无角陶赛特羊和蒙古羊之间存在极显著差异(P<0.01),而无角陶赛特羊和蒙古羊之间差异不显著(P>0.05);小尾寒羊突变纯合基因型BB和杂合AB中存在4个突变位点,此外在发现的4个突变位点中,只有第4个突变位点246碱基T→C引起氨基酸突变。

孕酮受体基因的研究进展

孕酮作为一种甾体激素,在各种雌性哺乳动物生殖活动中起关键作用。在人类和其他脊椎动物中,孕酮的生物活性主要是通过两个孕酮受体PGR-A和PGR-B转录活性的调节来介导。文章介绍了孕酮受体基因的结构、表达调控和多态性,并讨论了该基因与哺乳动物生殖功能的关系。

孕酮受体基因多态性及其与济宁青山羊产羔数关系

【目的】寻找与产羔数相关的遗传标记,为山羊高繁殖力的标记辅助选择提供科学依据。【方法】设计15对引物,采用PCR-SSCP技术检测孕酮受体(progesterone receptor,PGR)基因全部9个外显子在济宁青山羊、波尔山羊、辽宁绒山羊和安哥拉山羊中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对山羊繁殖力的影响。【结果】只有引物P1、P8与P9扩增片段具有多态性。对于P1扩增片段,济宁青山羊中检测到AA、AB和BB型,其余山羊中均检测到AA和AB型;测序表明BB与AA型相比有一处突变(31G→A),并导致丙氨酸变为苏氨酸;BB基因型济宁青山羊产羔数最小二乘均值比AB基因型多0.52只(P<0.05),比AA基因型多0.98只(P<0.001),AB基因型济宁青山羊产羔数最小二乘均值比AA基因型多0.46只(P<0.05)。对于P8扩增片段,济宁青山羊中只检测到CC型,波尔山羊中检测到CC和CD型,其余山羊中检测到CC、CD和DD型;测序表明DD型和CC型相比有一处突变(2810C→G),未导致氨基酸改变。对于P9扩增片段,济宁青山羊和波尔山羊中检测到FF和FG型,其余山羊中检测到FF、FG和GG型;测序表明GG型和FF型相比有一处碱基突变(60128T→A),未导致氨基酸改变;FF基因型济宁青山羊产羔数最小二乘均值比FG基因型多0.32只(P>0.05)。【结论】本试验结果初步表明,PGR基因可能是控制济宁青山羊多羔性的一个主效基因或是与之存在紧密遗传连锁的一个标记。

染料木黄酮、拟雌内酯及槲皮素对孕烷X受体介导的CYP3A4转录的调节作用

目的 研究植物雌激素中的染料木黄酮(GST)、拟雌内酯 (COM)及槲皮素 (QU)能否通过活化人孕烷X受体 (PXR)诱导CYP3A4的转录表达。方法用PXR依赖的瞬时转染报告基因试验检测 3种植物雌激素的诱导作用。结果 GST ,COM和QU均能通过活化PXR诱导HepG2 细胞CYP3A4基因的转录表达 ,最大诱导倍数 (相对于用浓度为 0 .1%的DMSO处理的细胞 )在本实验中分别为 11.97(P <0 .0 1) ,2 .98(P <0 .0 1)和 3.2 8(P <0 .0 1)。结论 GST ,COM和QU均能诱导CYP3A4的转录表达 ,其作用机制通过活化PXR。GST ,COM和QU的摄入可能影响其他CYP3A4底物尤其是药物在体内的代谢。

孕酮受体基因多态性及其与小尾寒羊产羔数的关系

设计15对引物,采用PCR-SSCP技术检测孕酮受体(progesterone receptor,PGR)基因全部9个外显子在小尾寒羊、湖羊、特克塞尔和多赛特中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对小尾寒羊产羔数的影响。只有引物P9扩增片段具有多态性。对于P9扩增片段,在小尾寒羊、湖羊和多赛特中均检测到AA、AG和GG型,在特克塞尔中只检测到AA和AG型。测序表明GG型与AA型相比在217 bp处有一单碱基突变(A→G),但未引起氨基酸变化。GG型和AG型小尾寒羊产羔数均值分别比AA型的多0.97只(P<0.05)和0.64只(P<0.05),GG型和AG型小尾寒羊产羔数差异不显著(P>0.05)。结果初步表明PGR基因的G等位基因是提高绵羊产羔数的一个潜在有效的DNA标记。

葛根素对乳腺组织雌激素及孕酮受体基因表达的影响

试验通过研究葛根素对乳腺组织中孕酮激素受体基因和雌二醇受体基因表达的影响,探讨葛根素对乳腺发育的影响,采用荧光定量RT-PCR方法检测小鼠乳腺组织中孕酮受体基因和雌二醇受体基因的表达。结果:与对照组相比,葛根素组小鼠ER表达量显著高于对照组(P<0.05),而葛根素试验组小鼠PR表达量与对照组相比差异不显著(P>0.05)。结论:葛根素具有上调乳腺组织ER表达的作用,这是其促乳腺发育的作用机理之一。

孕酮受体研究进展及其基因序列同源性分析

孕酮发挥生理作用是通过其受体(孕酮受体,progesterone receptor,PGR)介导的.研究动物孕酮受体及其基因对研究动物的生殖生理具有重要意义.论文论述了动物PGR的分布、结构、生物学作用、作用机理等方面的研究进展,并对目前GenBank已公布的人、鼠、主要畜禽孕酮受体基因(PGRgene)的编码区序列进行了同源性比较分析.

乳腺癌中雌激素受体、孕酮受体、p53、c-erbB-2基因的表达及其意义

目的 探讨雌激素受体 (ER)、孕酮受体 (PR)、p5 3、c erbB 2基因表达与乳腺癌预后的关系。 方法 用免疫组织化学S P法检测 4 5例浸润性乳腺癌、2 4例癌旁组织、2 0例乳腺增生症ER、PR、p5 3、c erbB 2基因的表达水平。 结果 4 5例乳腺浸润性癌中ER、PR、p5 3、c erbB 2基因的阳性率分别为6 0 .0 %、4 4 .4 %、5 1.2 %、5 5 .3% ;在 2 4例癌旁组织中的阳性率分别为 10 0 %、10 0 %、2 5 .0 %、4 .17% ;在2 0例乳腺增生症中阳性率分别为 10 0 %、10 0 %、10 .0 %、15 .0 %。乳腺癌淋巴结转移者与无淋巴结转移者 p5 3、c erbB 2基因表达的阳性率差异有统计学意义 (P <0 .0 5、P <0 .0 1)。 结论 同时检测ER、PR、p5 3、c erbB 2基因产物对乳腺癌的病理诊断、预后判断及指导治疗均有重要的临床意义及实用价值。

3种猪孕酮受体基因(pgr)多态性分析

采用混合基因组DNA池PCR扩增和测序技术,对小梅山猪、枫泾猪、大白猪pgr基因的外显子区域进行扫描,共发现1个单核甘酸多态性位点(SNP)。外显子1序列中1 319 bp处发生C→T的碱基突变,即C1319T,未引起氨基酸的变化,属于同义突变;针对突变位点,建立错配PCR–限制性长度多态性(RFLP)方法进行检测,发现3种猪的pgr基因可以分为AA、BB、AB 3个基因型,小梅山和枫泾猪有AA、AB 2种基因型,大白猪中有BB、AB 2种基因型。

绵羊孕酮受体基因的PCR-SSCP分析

作者设计3对引物，采用PCR—SSCP方法检测孕酮受体（progesterone receptor，PGR）基因DNA结合区和配体结合区序列在高繁殖力绵羊品种（小尾寒羊和湖羊）和低繁殖力绵羊品种（多赛特和特克赛尔）中的单核苷酸多态性，同时研究该基因对绵羊繁殖力的影响；对小尾寒羊PGR基因外显子5、6和9克隆测序，结合GenBank提供的绵羊PGR基因部分编码序列，拼接出绵羊PC-R基因DNA结合区和配体结合区的完整序列，推导出编码的氨基酸序列；并将人、兔、狗、绵羊、小鼠和大鼠的PGR基因这两个区域的核苷酸与氨基酸序列进行比较。结果表明，PGR基因DNA结合区和配体结合区序列在所检测的4个绵羊品种中都不存在单核苷酸多态性；人、兔、狗、绵羊、小鼠、大鼠PGR基因DNA结合区和配体结合区的核苷酸序列同源性分别为88．6％～97．2％和84．4％～96．3％，氨基酸序列同源性分别为97．6％～100％和96．3％～99．6％。可见，哺乳动物PGR基因DNA结合区和配体结合区序列保守性很强，这两个区域可能不是影响绵羊高繁殖力的功能结构域。

男性不育症患者X染色体雄激素受体基因外显子1、3、4状态筛选研究

目的研究雄激素受体（androgen receptor,AR）基因与特发无精症之间的关系。方法运用分子生物学方法分别检测35名无精症患者和20名对照组正常男性雄激素受体基因的3个功能区的DNA片段,结果实验组患者和正常男性AR外显子1中（CAG）n重复数在11~27之间,两组无显著差别,35例无精症患者用PCR扩增出雄激素受体外显子3（exon3）片段35例（100%）和外显子4（exon4）片段34例（97.15%）,20名正常已生育男性扩增出AR外显子3（exon3）片段20例（100%）和外显子4（exon4）片段20例（100%）。结论（CAG）n基因多态性与男性精子生成障碍无相关性,exon4缺失通过影响靶细胞核的类固醇激素-受体结合物数量在精子发生中的作用需进一步探讨。

孕酮受体基因多态性在宁夏回、汉族人群中的分布特征

目的:探讨孕酮受体基因(PGR基因)rs590688、rs1042838、rs11224592三个单核苷酸多态性(SNP)位点在宁夏回、汉族人群的分布特征并与1000Genomes网站上公布的其他群体分布频率进行比较分析。方法:采用TaqMan探针基因分型方法分析宁夏回、汉族人群867例(回族335例,汉族532例)PGR 3个SNPs位点rs590688、rs1042838、rs11224592基因型及等位基因频率的分布情况。结果:宁夏回、汉族人群PGR基因rs590688和rs1042838两个位点基因型及等位基因频率分布差异无统计学意义;rs11224592位点基因型及等位基因频率在宁夏回、汉族人群的分布差异有统计学意义;3个SNP位点的基因型及等位基因分布频率在男、女性别间差异无统计学意义。宁夏人群PGR基因rs590688、rs1042838、rs11224592位点基因型及等位基因分布频率与1000Genomes网站公布的其他群体相比较,rs590688位点与欧洲人群及非洲人群差异均有统计学意义;rs1042838位点与欧洲人群的差异有统计学意义;rs11224592位点与非洲人群的差异有统计学意义。结论:PGR基因rs590688、rs1042838、rs11224592位点基因型及等位基因频率在宁夏回、汉族人群的分布中,rs590688和rs1042838两个位点的分布无民族差异;rs11224592位点的分布具有民族差异;3个SNP位点的分布无性别差异。PGR 3个SNP位点基因型及等位基因频率在不同种族和地区的分布不同。

Bcl-2基因、雌激素受体和孕酮受体在子宫内膜的表达

目的 探讨bcl 2、雌激素受体 (ER)和孕酮受体 (PR)在子宫肌层、卵巢、输卵管壁的异位内膜与子宫正位内膜的表达及其意义。 方法 用免疫组化S P法对子宫肌层内的异位内膜 15例 ,卵巢内膜异位 15例 ,输卵管壁内膜异位 5例及子宫正位内膜 2 5例进行bcl 2、ER和PR检测。 结果 bcl 2在子宫肌层内和输卵管内的异位内膜阳性表达率为 10 0 % ,卵巢异位内膜阳性表达率为 86 .6 % ,子宫正位内膜阳性表达率为 5 2 %。ER在子宫肌层的内膜异位阳性表达率为 6 .7% ,卵巢内膜异位为 33.0 % ,而 4例输卵管内膜异位无阳性表达。PR在子宫肌层的内膜异位阳性表达率为 86 .6 % ,卵巢内膜异位为2 0 .0 % ,5例输卵管内膜异位均表达阳性。 结论 异位的子宫内膜细胞凋亡明显少于正位内膜 ,细胞生长有一定活跃性。异位子宫内膜的增生、分泌与正位子宫内膜不同步 ,表现为不规则性。卵巢、输卵管异位内膜的发生 ,可能与原始间叶细胞异分化有关。

孕酮受体介导哺乳动物雌性生殖活动的分子机理

孕酮作为一种甾体激素,在哺乳动物雌性生殖活动的调控中起着关键作用。孕酮的生理功能依赖于核孕酮受体介导的基因组效应和膜孕酮受体介导的非基因组效应,这两种效应共同介导了孕酮在各种雌性生殖活动中的不同作用,包括排卵、胚胎植入、妊娠维持、分娩启动和乳腺发育等。近年来,通过基因芯片技术筛选出大量的孕酮下游靶基因,但至今未能在这些基因的启动子区域上找到传统意义上的孕酮响应元件,故推测核孕酮受体调节下游靶基因转录活动的方式可能不同于传统的类固醇核受体。基于目前最新的研究成果,文章综述了在哺乳动物雌性生殖活动中,孕酮受体介导各种生理效应的分子机理。

雌激素受体、孕激素受体、p53基因和C-erbB-2在乳腺癌组织中的表达及意义

目的探讨雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、p53和C-erbB-2在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化方法检测经病理证实的51例乳腺癌组织的ER、PR、p53和C-erbB-2的表达。结果51例患者ER、PR、p53和C-erbB-2表达的阳性率分别为66.7%、58.8%、29.4%、72.6%。ER的表达在不同肿瘤大小、腋窝淋巴结有无转移组别中差异有显著性(P<0.05),而在年龄、分期组别中未见明显差异,PR、p53及C-erbB-2的表达与年龄、肿瘤大小、分期及淋巴结转移情况四组中均未见明显统计学意义。结论乳腺癌组织中ER、PR、p53和C-erbB-2均有较高表达,且ER表达与肿瘤大小、腋窝淋巴结转移密切有关。

橘荔散结丸对子宫肌瘤孕激素受体及其基因表达的影响

目的:观察橘荔散结丸对子宫肌瘤孕激素受体(PR)及其基因(PRmRNA)表达的影响。方法:将30例患者分为2组。服用橘荔散结丸治疗后有手术指征且要求手术者15例为治疗组,未曾服用中西药物治疗而要求手术者15例为对照组。主要观察术后血清性激素水平变化;并用免疫组化法与原位杂交法分别检测子宫肌瘤PR水平及PRmRNA表达情况。结果:2组血清性激素各项指标比较,差异均无显著性意义(P>0.05)。2组瘤体组织PR水平均高于正常子宫组织(P<0.05),而且对照组子宫瘤体PR水平及PRmRNA表达均高于治疗组(P<0.05)。结论:降低子宫肌瘤患者子宫肌层及其瘤体组织中的PR水平及其PRmRNA表达可能是橘荔散结丸治疗子宫肌瘤的主要机理之一。

非甾体类孕酮受体激动剂Tanaproget对兔动脉硬化的抑制作用及其机制

目的探讨非甾体类孕酮受体激动剂Tanaproget对动脉硬化的影响及其可能的机制。方法健康新西兰大白兔24只随机分为正常饲料(干草粉)喂养组(正常组)、高脂饲料(2%胆固醇+1%猪油+90%普通饲料)喂养组(模型组)、高脂饲料加Tanaproget喂养组(干预组),模型组及干预组于喂养第1周末,耳缘静脉注射牛血清白蛋白250 mg/kg。实验1周末和10周末,检测血清甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),ELISA法检测血清白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α);实验10周末随机抽取每组中一只取主动脉做油红O染色,其余取主动脉弓做石蜡包埋切片并行HE染色,提取血管组织蛋白,采用Western blotting法检测核转录因子κB(NF-κB)和Toll样受体4(TLR4)。结果实验10周末模型组和干预组血清TG、LDL-C水平较正常组升高(P均<0.01);实验后模型组血清IL-8、TNF-α水平较正常组和干预组升高(P均<0.01);大体标本油红O染色肉眼可见模型组斑块明显多于、大于正常组和干预组;HE染色后模型组主动脉内膜厚度明显大于正常组和干预组。模型组NF-κB、TLR4表达明显高于正常组和干预组(P均<0.01)。结论 Tanaproget通过特异性与孕酮受体结合后调节血脂代谢,同时抑制活化的TLR4/NF-κB信号通路,减少炎症因子的转录与生成,从而发挥其抗动脉硬化作用。

吡格列酮对载脂蛋白E^(-/-)小鼠动脉粥样硬化中Toll样受体4/丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响

目的探讨吡格列酮对载脂蛋白E(Apo E)-/-小鼠主动脉粥样硬化病变中Toll样受体4/丝裂原活化蛋白激酶(TLR4/MAPKs)信号通路的影响。方法取8只10周龄雄性C3H小鼠作为对照组,用普通饲料喂养;另取24只同周龄雄性Apo E-/-小鼠用高脂饲料喂养,复制动脉粥样硬化模型成功后按随机数表法分成3组:模型组、吡格列酮低剂量(5 mg·kg-1·d-1)组和高剂量(10 mg·kg-1·d-1)组各8只。干预4周后,HE染色观察主动脉粥样硬化病变情况。应用Western Blot技术检测对照组和干预组动脉粥样硬化中丝裂原活化蛋白激酶ERK1/2、JNK1/2及p38MAPK磷酸化水平。结果与对照组比较,各组Apo E-/-小鼠动脉粥样硬化斑块中TLR4表达增强,其中ERK1/2与JNK磷酸化水平明显升高(均为P<0.05),但p38MAPK水平变化不明显(均为P>0.05);与模型组比较,吡咯列酮低剂量组和高剂量组小鼠动脉粥样硬化斑块中ERK1/2与JNK磷酸化水平均降低(ERK1/2:吡咯列酮低剂量组比模型组:0.5037±0.0438比0.8800±0.0436,吡咯列酮高剂量组比模型组:0.3843±0.0236比0.8800±0.0436;JNK:吡咯列酮低剂量组比模型组:0.5037±0.0437比0.7900±0.0308,吡咯列酮高剂量组比模型组:0.3843±0.0237比0.7900±0.0308,均为P<0.05)。结论吡格列酮可能通过影响TLR4/MAPKs/ERK1/2与TLR4/MAPKs/JNK信号通路,延缓动脉粥样硬化的发生与发展。

促性腺激素调控半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis)卵母细胞孕酮受体膜组分1的表达特征

采用qRT-PCR方法分析性成熟半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)不同发育时期卵巢卵母细胞的孕酮受体膜组分1(PGRMC1)mRNA的表达,研究发现,在发育Ⅳ期的卵巢,处于第Ⅳ时相的卵母细胞PGRMC1 mRNA表达量最高(P<0.05);在发育Ⅴ期的卵巢,成熟期卵母细胞的PGRMC1 mRNA表达量最高(P<0.05)。采用不同浓度促性腺激素(HCG)处理卵巢发育Ⅴ期半滑舌鳎不同时相的卵母细胞,并通过q RT-PCR和Western blotting技术对其表达量变化进行检测。结果显示,20 IU/ml HCG对PGRMC1 mRNA和蛋白表达的调控作用比10 IU/ml HCG作用更明显,表明PGRMC1 mRNA和蛋白表达对HCG调控作用存在剂量依存关系。HCG对半滑舌鳎不同时相的卵母细胞的调控作用效果不同,对第Ⅴ时相卵母细胞作用最明显(P<0.05),表明PGRMC1主要在卵母细胞成熟阶段发挥作用。PGRMC1对HCG调控作用的正向应答效应预示其参与了卵母细胞成熟调控,为进一步探讨PGRMC1在半滑舌鳎繁殖过程的功能提供重要基础资料。