目的:探讨孕酮诱导的蜕膜蛋白(decidual protein induced by progesterone,DEPP)在血管内皮细胞EA.hy926中的定位、对细胞存活及基因表达的影响。方法:构建表达人DEPP的重组腺病毒,测定病毒滴度并鉴定其表达的DEPP蛋白水平。用构建好的...目的:探讨孕酮诱导的蜕膜蛋白(decidual protein induced by progesterone,DEPP)在血管内皮细胞EA.hy926中的定位、对细胞存活及基因表达的影响。方法:构建表达人DEPP的重组腺病毒,测定病毒滴度并鉴定其表达的DEPP蛋白水平。用构建好的腺病毒感染EA.hy926内皮细胞,通过免疫荧光和Western blot确定DEPP蛋白在细胞中的定位。观察DEPP过表达对EA.hy926细胞存活的影响,用MTT法测定细胞的存活率,通过流式细胞仪检测EA.hy926细胞的坏死和凋亡情况。利用蛋白质芯片检测DEPP过表达时内皮细胞中血管发生相关基因表达水平的变化。结果:本研究成功构建了表达人DEPP蛋白的重组腺病毒。通过免疫荧光检测,发现DEPP蛋白呈全细胞分布。与过表达GFP的对照细胞相比,过表达DEPP时EA.hy926细胞明显皱缩、变圆,MTT检测显示细胞的存活率明显下降,流式细胞仪检测显示EA.hy926细胞感染腺病毒后细胞的坏死水平与对照组相比升高。蛋白质芯片检测发现,DEPP过表达导致内皮细胞中多种血管发生相关蛋白的水平发生明显改变。结论:DEPP蛋白的表达升高对血管内皮细胞有损伤作用,可能参与血管发生的调控过程。展开更多
低氧是大多数实体肿瘤的一个重要特征。它可以导致肿瘤向恶性方向发展,使肿瘤细胞具有更强的侵袭和转移能力,并对化学治疗和放射治疗产生抵抗。在这个过程之中,以低氧诱导因子(Hypoxia-inducible factors,HIFs)为代表的一系列低氧诱导...低氧是大多数实体肿瘤的一个重要特征。它可以导致肿瘤向恶性方向发展,使肿瘤细胞具有更强的侵袭和转移能力,并对化学治疗和放射治疗产生抵抗。在这个过程之中,以低氧诱导因子(Hypoxia-inducible factors,HIFs)为代表的一系列低氧诱导蛋白起主要调控作用,它们通过影响下游多种信号通路调节肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭、血管生成、免疫应答、放/化疗抗性来促进或抑制肿瘤发生发展。随着对低氧诱导蛋白的深入研究,发现尽管大多数情况下低氧会促进肿瘤发生发展,但同时也存在着一小部分低氧诱导蛋白具有抑制肿瘤进展的作用。因此,对低氧诱导蛋白的研究在抗肿瘤药物开发以及肿瘤治疗方法的选择上具有重要意义。文章对HIFs以及两种新发现的低氧诱导蛋白—孕酮诱导的蜕膜蛋白(Decidual protein induced by progesterone,DEPP)和蛋白激酶A锚定蛋白(A-kinase anchor protein 4,AKAP4)在肿瘤发展和治疗中的功能加以整理总结,希望能够推动以低氧蛋白为靶点的抗肿瘤治疗在临床的应用。展开更多
文摘目的:探讨孕酮诱导的蜕膜蛋白(decidual protein induced by progesterone,DEPP)在血管内皮细胞EA.hy926中的定位、对细胞存活及基因表达的影响。方法:构建表达人DEPP的重组腺病毒,测定病毒滴度并鉴定其表达的DEPP蛋白水平。用构建好的腺病毒感染EA.hy926内皮细胞,通过免疫荧光和Western blot确定DEPP蛋白在细胞中的定位。观察DEPP过表达对EA.hy926细胞存活的影响,用MTT法测定细胞的存活率,通过流式细胞仪检测EA.hy926细胞的坏死和凋亡情况。利用蛋白质芯片检测DEPP过表达时内皮细胞中血管发生相关基因表达水平的变化。结果:本研究成功构建了表达人DEPP蛋白的重组腺病毒。通过免疫荧光检测,发现DEPP蛋白呈全细胞分布。与过表达GFP的对照细胞相比,过表达DEPP时EA.hy926细胞明显皱缩、变圆,MTT检测显示细胞的存活率明显下降,流式细胞仪检测显示EA.hy926细胞感染腺病毒后细胞的坏死水平与对照组相比升高。蛋白质芯片检测发现,DEPP过表达导致内皮细胞中多种血管发生相关蛋白的水平发生明显改变。结论:DEPP蛋白的表达升高对血管内皮细胞有损伤作用,可能参与血管发生的调控过程。
文摘低氧是大多数实体肿瘤的一个重要特征。它可以导致肿瘤向恶性方向发展,使肿瘤细胞具有更强的侵袭和转移能力,并对化学治疗和放射治疗产生抵抗。在这个过程之中,以低氧诱导因子(Hypoxia-inducible factors,HIFs)为代表的一系列低氧诱导蛋白起主要调控作用,它们通过影响下游多种信号通路调节肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭、血管生成、免疫应答、放/化疗抗性来促进或抑制肿瘤发生发展。随着对低氧诱导蛋白的深入研究,发现尽管大多数情况下低氧会促进肿瘤发生发展,但同时也存在着一小部分低氧诱导蛋白具有抑制肿瘤进展的作用。因此,对低氧诱导蛋白的研究在抗肿瘤药物开发以及肿瘤治疗方法的选择上具有重要意义。文章对HIFs以及两种新发现的低氧诱导蛋白—孕酮诱导的蜕膜蛋白(Decidual protein induced by progesterone,DEPP)和蛋白激酶A锚定蛋白(A-kinase anchor protein 4,AKAP4)在肿瘤发展和治疗中的功能加以整理总结,希望能够推动以低氧蛋白为靶点的抗肿瘤治疗在临床的应用。