连翘叶提取物通过PXR/CYP17A1影响孕马血清促性腺激素在肝脏的代谢

【目的】研究连翘叶提取物(Forsythia suspensa leaves extract,FSLE)对孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)在肝脏中代谢的影响,改善在畜牧生产中因PMSG代谢缓慢而造成的氧化应激。【方法】采用半仿生酶醇法提取连翘叶有效成分,给予昆明雌鼠不同含量的FSLE进行动物体内试验;收集小鼠血清,进行酶联免疫吸附试验,检测各组小鼠血清中PMSG的质量浓度;采集小鼠肝脏组织,检测氧化应激指标谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、丙二醛和过氧化氢的水平;采用Western-blot检测小鼠肝脏组织孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)和细胞色素酶P45017A1(cytochrome P45017A1,CYP17A1)蛋白的表达水平。【结果】FSLE可显著降低小鼠血清中PMSG的质量浓度,且可以减缓PMSG代谢引起的氧化应激。Western-blot结果显示:FSLE可显著下调小鼠肝组织中PXR和CYP17A1蛋白的表达。【结论】连翘叶提取物可能是通过下调肝脏中PXR和CYP17A1的表达减缓PMSG代谢引起的氧化应激。

孕马血清促性腺激素对小鼠肝脏组织CYP17A1和PXR表达的影响

旨在了解孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)对小鼠肝脏细胞色素P45017A1(cytochrome P45017A1,CYP17A1)和孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)表达的影响。将48只雌性昆明系小鼠随机分为PMSG处理组和对照组,PMSG组小鼠腹腔注射PMSG 10 IU,注射后12、24、48 h处死12只小鼠,采血分离血清并采集肝脏组织样本;对照组腹腔注射等体积生理盐水,在注射后12、24、48 h时采集4只小鼠的血液和肝脏组织样本。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清PMSG含量,苏木精-伊红染色(HE)观察PMSG对肝脏组织的影响,RT-qPCR和Western blot检测肝脏组织CYP17A1和PXR表达水平,免疫组织化学染色检测CYP17A1和PXR在肝脏组织中的定位。结果显示,PMSG注射后12 h小鼠血清中PMSG含量显著升高(P<0.05),24 h和48 h时逐渐降低,但仍显著高于NC组(P<0.05);PMSG注射后12、24、48 h时,肝脏细胞水泡变性明显;注射PMSG后肝脏组织中CYP17A1和PXR基因和蛋白表达均显著下调(P<0.05);CYP17A1和PXR主要定位于肝索肝实质细胞质中。研究结果证明,PMSG能够显著抑制肝脏CYP17A1和PXR表达。

孕马血清促性腺激素(PMSG)提取方法的研究

应用生物化学制备技术,对PMSG的提取进行了研究,发现偏磷酸氢氧化钠pH分离-低温乙醇沉淀-透析法的脱杂蛋自效果优于硫酸胺盐析-透析法,更优于偏磷酸pH分离-离子交换法,而氯化钠盐析法则达不到脱杂蛋白的效果;血清中PMSG的效价损失随着脱去杂蛋白的增多而增大;在所采用的冻干曲线下,脱去杂蛋白愈多,则冻于过程中PMSG的损失就愈小。

孕马血清促性腺激素(PMSG)的提取与纯化研究

本试验对孕马血清采用50％乙醇分级沉淀——0.25 mol/L,pH5.2乙酸缓冲液(含一定量乙醇)抽提——HPO-3调pH值至5.0——0.25mol/L,pH5.2、40％乙醇乙酸缓冲液抽提,得到了生物活性为976～1267 IU/mg的PMSG粗提物;对粗提物用CM Sepharose CL-6B进行柱层析,得到了生物活性为2450～2589 IU/mg的PMSG精制品。

孕马血清促性腺激素对狗卵母细胞体外核成熟的影响

[目的]研究孕马血清促性腺激素(PMSG;eCG)对狗卵母细胞体外成熟效果的影响。[方法]采用切割法收集卵巢表面卵丘卵母细胞复合体(COCs),并且随机分为4组,在添加不同浓度的PMSG的基础培养液(含有10%胎牛血清的DMEM)中,5%CO2,38.5℃培养箱内培养48 h。在含有0.1%透明质酸酶的D-PBS中用细小玻璃管剥离卵丘细胞从而获得裸卵,为了鉴别核成熟期,用4%甲醛溶液固定裸卵15 min,然后用10μg/ml Hoechst33342染色、压片,荧光显微镜下观察核形态。[结果]体外培养48 h后,添加PMSG处理组卵丘扩散明显,但发育到MⅠ-MⅡ的比率都没有显著差异(P(0.05)。100 IU/ml PMSG处理组GVBD期率显著低于对照组。[结论]添加PMSG改善了卵丘扩散的效果,但是没有提高核成熟率,需进一步改进狗卵母细胞体外成熟率的培养体系。

孕马血清促性腺激素及其应用

孕马血清促性腺激素(PMSG)是一种糖蛋白激素,同一分子具有卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)的双重作用,目前在治疗动物的生殖疾病、促进动物发情、超数排卵等方面被广泛应用。本文仅就近期的研究结果作简单介绍。

孕马血清和促性腺激素治疗母牛卵巢相对静止

母牛卵巢相对静止是卵巢机能暂时受到扰乱,处于静止状态,不出现周期性活动。1990年,我们对石河子地区奶牛场调查,卵巢静止的患牛占疾病性不孕奶牛的32.35％。为解决这一问题,我们进行了母牛卵巢静止的治疗试验,效果满意。一、材料及方法 (一)药品:血清促性腺激素,系上海第九制药厂生产,1安培含1000单位。孕马血清,系新疆畜牧科学院生产,每瓶500单位。三合激素,系上海第九制药厂生产,每安培2毫升。 (二)供试病牛:经现场调查和直肠检查确诊为卵巢静止奶牛选为供试病牛,年龄在1至9岁。

孕马血清促性腺激素单克隆抗体的研制

用高纯度孕马血清促性腺激素免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，加完全佐剂进行基础免疫，第７日脾脏免疫，第１０日取血测滴度，为阳性则取出脾脏。将脾细胞与Ｓｐ２／０细胞融合，培养并用琼脂单扩法筛选抗体生成孔，ＥＬＩＳＡ复测，得孕马血清促性腺激素抗体阳性杂交瘤细胞株Ｄ＿６Ｃ＿（１０）。经降植烷予处理的ＢＡＬＢ／ｃ鼠腹腔注射Ｄ＿６Ｃ＿（１０），腹水单抗滴度１０￣６。瘤细胞ＤＮＡ含量测定证实为脾和骨髓瘤细胞的杂交瘤细胞。单抗亚型分析为ＩｇＭ型。建立了间接酶免疫法快速测定孕马血清促性腺激素单克隆抗体的滴度。

孕马血清促性腺激素对小鼠受孕的影响

目的观察孕马血清促性腺激素(PMSG)对于小鼠受孕率的影响。方法通过注射PMSG进行超数排卵处理,建立实验组和自然周期组昆明小鼠妊娠模型,比较两组小鼠的受孕率和获得的平均胚胎数。结果在PMSG妊娠小鼠模型中,小鼠妊娠率为75%,平均受孕17个胚胎;自然周期小鼠妊娠率为40%,平均受孕10个胚胎。结论PMSG能促进小鼠排卵,增强小鼠受孕率。

孕马血清促性腺激素对狐狸促发情效果的观察

狐狸是珍贵的经济动物,其皮毛制品在国内和国际市场上日益走俏,且价格昂贵,因此推动了我国东北地区狐狸养殖业的迅速发展,现有规模较大的集体养殖场,还有不少家庭养狐业主,但使广大养狐业主困惑的是,在每年春季狐狸繁殖季节。

孕马血清(PMSG)粗品的提取

孕马血清促性腺激素（PMSG）是由孕马子宫内膜杯状细胞分泌到血液中的糖蛋白激素，具有FSH和LH的双重作用，在畜牧生产中主要作用于同期发情、超数排卵、胚胎移植的基础性科学研究，同时对动物和人体机能障碍有显著疗效；PMSG当用于诱发动物发情时，可大大提高动物保胎率与受胎率，还可提高繁殖率。

应用孕马血清配合三合激素促使母猪同期发情

在养猪实践中发现，由于母猪发情、配种不集中，不易管理，造成仔猪成活率不高。2005年6月，我们在八队采用孕马血清配合三合激素给后备母猪和哺乳母猪注射，促使母猪同期发情，收到了良好效果。

孕马血清促性腺激素单克隆抗体脾内免疫方法的建立

孕马血清促性腺激素单克隆抗体脾内免疫方法的建立马友福，马春艳，候向东，陈萸芳天津实验动物中心（天津东郊区军粮城３００３０１）自７０年代开始，由于细胞融合技术迅速发展，杂交瘤技术的成功得以制备各种抗体，这种单克隆抗体（简称单抗）的发现是生物技术发展的里...

反向间接血凝法检测孕马血清中ECG／PMSG活性的探讨

采用直肠检查法探知怀孕45-120 d的健康母马,采集血样87份,其中74份用生物学方法及反向血凝法(RIHA)检测了所含促性腺激素ECG／PMSG活性。结果显示:(1)直检探知日期适合采血的马。其生物活性低于20 IU／mL为25个样本,占总样本数33．8％。(2)RIHA法测定结果,定为阳性有52个样本,其生物效价平均为64．4 IU／mL,阴性22个样本,平均13．9 IU／mL。(3)RIHA阳性52个样本有8个与生物效价不符(P>0．05),阴性样本有1个不符(P>0．05),无显著差异。