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发芽法与玻璃珠破碎法提取家蚕微孢子虫孢壳蛋白的双向电泳分析
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作者 耿莉娜 吴海晶 +4 位作者 刘婷 田锐 李田 潘国庆 周泽扬 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期928-934,共7页
采用不同方法获得家蚕微孢子虫孢壳,并提取孢壳蛋白进行双向电泳分析,确定适用于蛋白质组学研究的家蚕微孢子虫孢壳蛋白提取方法。通过密度梯度离心纯化家蚕微孢子虫孢子后,分别用发芽法和玻璃珠破碎法得到孢壳,再经密度梯度离心纯化孢... 采用不同方法获得家蚕微孢子虫孢壳,并提取孢壳蛋白进行双向电泳分析,确定适用于蛋白质组学研究的家蚕微孢子虫孢壳蛋白提取方法。通过密度梯度离心纯化家蚕微孢子虫孢子后,分别用发芽法和玻璃珠破碎法得到孢壳,再经密度梯度离心纯化孢壳。显微镜观察可见用发芽法得到的孢壳明显膨大趋于圆形,而用玻璃珠破碎法得到的孢壳形状变化不大,但有明显的缺口。使用蛋白质裂解液提取2种方法获取孢壳的蛋白质并进行双向电泳,在发芽法提取孢壳蛋白的双向电泳图谱中检测到205个蛋白点,在破碎法提取孢壳蛋白的双向电泳图谱中检测到413个蛋白点。采用发芽法提取过程中由于使用了碱性溶液,使孢壳表面的碱溶性蛋白脱落,导致提取的孢壳蛋白丰度降低;而玻璃珠破碎法避免了碱溶过程,提取的孢壳蛋白丰度较高,并且操作简单,有利于完整获取孢壳碱溶性蛋白和与内壁结合的蛋白。 展开更多
关键词 家蚕微子虫 孢壳蛋白 蛋白质组 发芽法 玻璃珠破碎法 双向电泳
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Antiviral drug design based on structural insights into the N-terminal domain and C-terminal domain of the SARS-CoV-2 nucleocapsid protein
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作者 Xiaodong Luan Xinming Li +11 位作者 Yufan Li Gengchen Su Wanchao Yin Yi Jiang Ning Xu Feng Wang Wang Cheng Ye Jin Leike Zhang H.Eric Xu Yi Xue Shuyang Zhang 《Science Bulletin》 SCIE EI CAS CSCD 2022年第22期2327-2335,共9页
Nucleocapsid(N) protein plays crucial roles in the life cycle of severe acute respiratory syndrome coronavirus 2(SARS-CoV-2), including the formation of ribonucleoprotein(RNP) complex with the viral RNA.Here we report... Nucleocapsid(N) protein plays crucial roles in the life cycle of severe acute respiratory syndrome coronavirus 2(SARS-CoV-2), including the formation of ribonucleoprotein(RNP) complex with the viral RNA.Here we reported the crystal structures of the N-terminal domain(NTD) and C-terminal domain(CTD) of the N protein and an NTD-RNA complex. Our structures reveal a unique tetramer organization of NTD and identify a distinct RNA binding mode in the NTD-RNA complex, which could contribute to the formation of the RNP complex. We also screened small molecule inhibitors of N-NTD and N-CTD and discovered that ceftriaxone sodium, an antibiotic, can block the binding of RNA to NTD and inhibit the formation of the RNP complex. These results together could facilitate the further research of antiviral drug design targeting N protein. 展开更多
关键词 SARS-CoV-2 Nucleocapsid protein N-terminal domain Ceftriaxone sodium
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