生姜枯萎病病原菌的分离鉴定及其接种浓度对生姜枯萎病发生程度的影响

从山东平度连作的生姜枯萎病病株中分离得到1株菌株,通过形态学鉴定、rDNA-ITS区序列分析和回接试验确认该菌株为生姜枯萎病病原菌。采用盆栽试验,在健康土壤中接种不同浓度的病原菌孢子悬液研究不同接种浓度对生姜枯萎病发生程度的影响。结果表明:每克土病原菌孢子数量103是导致生姜植株发病的临界浓度,当每克土接种数量不高于105时,病情指数随接种浓度增加而显著增加;当每克土接种数量高于105时,病情指数不再显著增加;随着每克土中接种的病原菌孢子数量的增加,各处理根际土壤中的尖孢镰刀菌数量也增加,且根际土壤中尖孢镰刀菌数量均显著高于土体土壤,根际土壤中尖孢镰刀菌数量是土体土壤的1.19~1.86倍。结论:根际和土体土壤中的尖孢镰刀菌数量共同决定生姜植株是否发生枯萎病,但发病程度的高低受根际土壤中尖孢镰刀菌数量的影响。

百合枯萎病病原菌的分离鉴定及其接种浓度对发病程度的影响

[目的]江苏宜兴是我国百合生产的传统优势产区,百合枯萎病是严重阻碍百合产业化健康发展的一个关键因子。通过分离鉴定百合枯萎病的致病菌株,接种不同浓度的病原菌孢子悬液,研究百合的发病程度,为江苏宜兴百合枯萎病的生物防治提供科学基础。[方法]采集宜兴百合种植区典型枯萎病发病严重的植株及鳞茎分离致病菌株,通过柯赫氏法则回接试验初步确定致病性,对致病性强的菌株进行DNA提取、PCR扩增和测序,基于病原菌rDNA-ITS基因序列和GenBank中已有相关尖孢镰刀菌序列,应用MEGA 7.0软件构建系统发育树;采用刺伤百合鳞片接种不同浓度的病原菌孢子悬液与在土壤中接种不同浓度病原菌孢子悬液的方法,评估不同浓度孢子悬液对百合枯萎病发病程度的影响。[结果]从典型枯萎病严重发病的植株上共分离得到4株病原菌株:P-OF、P-PF、P-RF和P-BF,分离率分别为25%、20%、10%和5%。柯赫氏法则回接试验表明:接种菌株P-OF、P-PF百合发病率为100%,鳞片病情指数分别为92.50、48.25、15.00、30.00;盆栽试验表明:接种菌株P-OF的百合植株最先发病,初步确定菌株P-OF的致病性最强;通过形态学和分子生物学对菌株P-OF的鉴定结果表明,从典型枯萎病严重发病百合植株中所分离的病原菌为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。百合枯萎病的病情指数与接种病原菌孢子悬液浓度相关,百合鳞片接种试验和盆栽试验结果表明,土壤病原菌浓度为103 CFU·g^-1,是导致百合植株发病的临界浓度,当土壤病原菌浓度低于105 CFU·g^-1时,病情指数随接种浓度增加而增加,当土壤病原菌浓度高于105 CFU·g^-1时,病情指数不再显著增加。[结论]从江苏宜兴百合枯萎病的典型发病植株中分离到4株病原菌株,其中菌株P-OF的致病性最强,经鉴定为尖孢镰刀菌百合专化型(Fusarium oxysporum sp.f.lilii),导致百合植株发病的临界土壤病原菌浓度为103 CFU·g^-1。