破壁提取法的灵芝孢子破壁

提出了将灵芝孢子破壁和有效成分提取结合起来,经过一次加工处理就能同时完成灵芝孢子的破壁和提取的破壁提取法。详细阐述了该方法中灵芝孢子的破壁情况。实验结果表明:最佳破壁提取工艺的参数为:5%酒精为溶剂,超声波处理10min,高压处理的压力为400MPa,保压5min。

灵芝孢子破壁前后在模拟人体消化环境中活性成分的差异

目的研究灵芝孢子在破壁前后,其内的灵芝三萜和灵芝多糖在人体消化系统内的差异。方法:采用模拟人体消化环境,用香草醛-高氯酸法[1]和蒽酮-硫酸法[2]检测孢子内的三萜和多糖含量。结果:孢子在破壁前后的三萜含量分别为0.29%和5.94%,多糖含量则分别为10.29mg/g和11.44mg/g;人工胃液处理的环境下,释放到人工胃液内的破壁孢子多糖含量大于未破壁孢子(0.98mg/mL>0.62mg/mL);沉淀再经过人工肠液的处理后,人工肠液的多糖均未检出。破壁孢子沉淀的三萜含量大于未破壁孢子(6.68%>1.58%),结论:灵芝孢子破壁后其有效成分更易于在人体消化环境内释放。

破壁灵芝孢子粉中多种重金属元素及硒含量检测方法探讨

采用微波消解进行前处理,三重四极杆-电感耦合等离子体质谱法测定破壁灵芝孢子粉中镉、铬、镍、砷、铅、汞及硒元素含量,对方法条件进行优化和讨论,并对20批次破壁灵芝孢子粉进行测定。结果表明,镉、铬、镍、砷、铅和汞元素在氦气碰撞模式,硒元素在氧气反应模式下,采用内标校正定量,可达到良好的测定效果。在优化的条件下,各元素线性关系良好,检出限均可达μg·kg^(-1)级别;镉、铬、镍、砷、铅及硒元素的加标回收率在90.3%~105.0%,汞的加标回收率在82.1%~92.5%;方法精密度在5%以内。此方法前处理操作简便,检测灵敏度高,稳定性好,给灵芝孢子粉多元素测定提供了良好的技术支撑。

破壁灵芝孢子粉多糖抗氧化活性及稳定性研究

本研究旨在探讨不同提取方法对破壁灵芝孢子粉多糖抗氧化活性与稳定性的影响,为产品商业化生产及稳定性优化提供科学依据。采用4种方法提取破壁灵芝孢子粉多糖(热水浸提法(LPH)、超声辅助法(LPU)、微波辅助法(LPM)、酶解辅助法(LPE)),测定多糖得率和抗氧化能力,并通过模拟食品加工条件,系统评估多糖的氧化稳定性。结果显示,LPE的灵芝孢子粉多糖得率和糖醛酸含量最高,分别为5.05%和6.55%。LPE的抗氧化能力最强,DPPH自由基最高清除率为77.24%,羟自由基最高清除率为83.04%。光照对LPE的抗氧化稳定性影响较大,在酸性条件下其抗氧化活性较好,羟自由基清除率超过85%,且表现出良好的耐热性。此外,甜味剂和碱性添加剂对LPE的抗氧化稳定性影响显著,产品灭菌可优先选择巴氏杀菌。研究发现,与另外3种提取方法相比,酶解法具有作用条件温和、提取率高、可制备特定结构的多糖、减少杂质提高多糖纯度以及能够在相对较短时间内实现大量多糖提取等优点,能够满足产业化需求。LPE的抗氧化活性最强,具有较好的耐热稳定性,但在灵芝孢子粉多糖产品的加工贮藏过程中,应避免长时间光照,控制甜味剂和碱性添加剂的使用剂量,确保产品的质量。

破壁灵芝孢子粉对小鼠免疫功能的影响

目的研究破壁灵芝孢子粉对小鼠免疫功能的影响。方法ICR雄性小鼠随机分为4大组,高中低(0.99、0.33、0.165 g·kg^(-1))3个给药组和空白对照组,小鼠30天灌胃给药后,对小鼠各项免疫学指标检测。结果与对照组比较,破壁灵芝孢子粉高、中剂量组在2,4二硝基氟苯(DNFB)诱导的迟发型变态反应中具有显著性差异(P<0.05、P<0.01);同时高剂量组能促进小鼠NK细胞活性。结论破壁灵芝孢子粉可增强DNFB诱导的迟发型变态反应,对小鼠细胞免疫功能具有一定增强效果;同时能促进NK细胞活性,有助于增强小鼠免疫吞噬功能。

血球计数板检测破壁灵芝孢子粉破壁率方法的优化研究

目的对现行常用的血球计数板检测破壁灵芝孢子粉破壁率的方法进行优化研究,以降低检测误差,避免人为主观判断,并提高检测效率。方法通过考察不同的悬浮液体系,筛选出能使破壁灵芝孢子粉分散性最佳的悬浮液体系;通过考察常用的细胞染色剂,筛选出能是破壁灵芝孢子粉染色,而灵芝孢子粉不被染色的最适染色剂。结果优化后检测方法重复性与再现性良好,重复性与再现性相对标准偏差(relativestandard deviationg,RSD)均为0.3%;回收率良好,不同破壁率水平的样品回收率平均值在98.9%~100.9%范围内;检测效率明显提高,单个样品的检测时间从18.2 min降低至8.1 min。结论本研究通过优化悬浮液体系及引用细胞染色技术与血球计数法结合,降低了检测方法误差,避免了人为主观判断,建立了一种更为准确、客观、高效的破壁率检测方法,为破壁灵芝孢子粉破壁率检测提供了可靠手段。

QuEChERS-气相色谱法测定破壁灵芝孢子粉中的26种农药残留量

建立了一种灵敏度高、准确度好的QuEChERS-气相色谱法测定破壁灵芝孢子粉中26种农药残留量的方法,试样经醋酸水浸泡、乙腈提取、QuEChERS净化,采用HP-5色谱柱分离,经电子捕获检测器和火焰光度检测器检测,使用外标法定量。结果表明,26种目标农药在浓度0.005~1.000 mg·L^(-1),线性相关系数均大于0.99,检出限为0.001 2~0.006 9 mg·kg^(-1),定量限为0.004 0~0.023 2 mg·kg^(-1),添加0.030、0.060和0.300 mg·kg^(-1) 3个水平的农药标准溶液,试验回收率为69.4%~120.3%,相对标准偏差为0.9%~6.2%。方法快速、准确、灵敏度高、重复性好,适用于破壁灵芝孢子粉中农药残留量的检测。

分光光度法测定破壁灵芝孢子粉中总三萜含量研究

目的:优化分光光度法测定破壁灵芝孢子粉中总三萜含量的分析方法。方法:分别针对方法中提取液除杂方式、挥干方式及水浴反应条件等进行优化,并对优化后的方法线性、检出限、定量限、准确性、专属性及重复性等进行验证。结果:测试方法中挥干方式为沸水浴挥干、除杂方式为4000 r·min^(-1)离心10 min、水浴条件为60℃反应15 min;熊果酸标准溶液在20~160μg范围内线性良好,相关系数R2为0.9992,加标回收率在93.12%~97.73%,相对标准偏差低于0.64%,方法检出限为0.1203μg·mL^(-1),定量限为0.3610μg·mL^(-1)。结论:该方法操作简便,条件明确,具有良好的准确度和精密度,适用于破壁灵芝孢子粉中总三萜含量测定。

破壁灵芝孢子中多糖提取工艺研究进展

灵芝是我国的一种重要的药用植物,其抗氧化、抗炎、抗肿瘤、保护心血管等功效已被人们所熟知。其中,灵芝多糖是灵芝的主要活性成分之一,具有显著的免疫调节、抗肿瘤和保护心血管作用。因此,对灵芝多糖的提取和开发利用一直受到广泛关注。破壁灵芝孢子是通过对灵芝孢子进行特定加工,除去其表面的孢子层,使其内部有效成份得以充分发挥,达到增强其生物有效性的目的。本文将对破壁灵芝孢子中多糖提取工艺的研究进展进行分析和综述。

利用CTAB法和子囊孢子破壁法提取冬虫夏草菌DNA

通过CTAB法从冬虫夏草菌株和天然冬虫夏草不同部位提取DNA,并用PCR扩增进行验证,证明了CTAB法适合从冬虫夏草子座、菌核和冬虫夏草菌培养物中提取DNA。首次报道1种将子囊孢子破壁直接进行PCR扩增的方法,并比较了该方法和CTAB法在提取冬虫夏草DNA方面的差异。2种方法获得的DNA用于PCR扩增均能得到较好的结果。

破壁灵芝孢子粉破壁率测定的研究

通过筛选,得到7%的硫酸锌溶液与无水乙醇以10:1(体积比)的混合溶液能使灵芝孢子更好的悬浮。利用该悬浮体系,辅以超声60 min和涡旋处理30 s,通过血球计数板对不同质量的孢子粉进行计数,建立未破壁灵芝孢子粉质量和孢子数之间的标准曲线,对同批未知破壁率的破壁孢子粉的破壁率进行检测,并人为混合7个标准破壁率的破壁孢子粉对该方法的准确度和精密度进行试验。结果表明:在该悬浮体系下,灵芝孢子粉在0.01～0.05 g/25 mL与孢子数线性关系良好。

破壁灵芝孢子粉对人肺癌细胞超微结构影响及抑制作用

目的：观察破壁灵芝孢子粉对人肺癌细胞（A549细胞）超微结构的影响及对生长的抑制作用.方法：选取A549细胞并采用离体实验研究破壁灵芝孢子粉对肺癌细胞的作用.利用透射电镜研究破壁灵芝孢子粉对A549细胞超微结构的影响;利用CCK-8研究破壁灵芝孢子粉对A549细胞生长的抑制作用;利用乳酸脱氢酶（LDH）研究破壁灵芝孢子粉对细胞膜通透性的影响.结果：透射电镜观察显示破壁灵芝孢子粉可进入A549细胞,细胞中线粒体出现肿胀等现象;10 mg/ml破壁灵芝孢子粉可导致大量A549细胞肿胀、崩解.CCK-8检测结果显示破壁灵芝孢子粉导致A549细胞的存活率明显下降.LDH检测显示破壁灵芝孢子粉可使A549细胞的LDH释放量明显增加,且存在浓度依赖关系.结论：破壁灵芝孢子粉对人肺癌细胞具有显著抑制作用.

破壁灵芝孢子粉的质量探讨

研究和探讨破壁灵芝孢子粉的质量标准,利用性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别和主要成分含量测定的方法,初步掌握破壁孢子粉质量特性。薄层色谱鉴别可见清晰荧光斑点,其醇溶液加入硫酸后可见棕色环。总灰分测定显示:采自岫岩灵芝孢子粉和山东一等孢子粉灰分较低,山东三等孢子粉灰分含量较高。不同来源的样品总三萜类含量各不相同,高者达2.24%,低者1.26%。综合各项检测结果,初步确定了破壁灵芝孢子粉质量评价指标,方法稳定,可操作性强。

^1H-NMR图谱鉴别安徽金寨产破壁与不破壁灵芝孢子粉

目的研究灵芝孢子粉提取物的核磁共振图谱,比较破壁与不破壁灵芝孢子粉的异同。方法采用不同溶剂微波提取破壁与不破壁灵芝孢子粉,提取物进行1H-NMR研究,从而实现灵芝孢子粉1H-NMR图谱解析。结果三氯甲烷提取物的1H-NMR图谱基本相同,而水提取物的1H-NMR图谱存在差异。结论该方法可用于灵芝孢子粉与破壁灵芝孢子粉的鉴别;对探讨灵芝孢子粉和破壁灵芝孢子粉的药理作用以及灵芝孢子粉的进一步开发利用具有重要意义。

破壁灵芝孢子粉对裸鼠移植性人乳腺癌的抑制作用

目的观察破壁灵芝孢子(GLS)粉对人乳腺癌MCF-7细胞移植瘤生长增殖作用和TMSG-1 m RNA表达的影响。方法建立人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤模型,把30只成瘤裸鼠随机分为五组,每组6只,分别为不同剂量破壁GLS组(1.5、3、4.5 g/kg)、磷酰胺(CTX)模型组、生理盐水组。用药4 w后观察破壁灵芝孢子粉对裸鼠移植瘤体积、瘤重的影响,并计算抑制率;用流式细胞术(FCM)测定细胞增殖周期和细胞凋亡水平;用半定量RT-PCR检测肿瘤组织中TMSG-1 m RNA的表达。结果与对照组比较,中剂量和高剂量破壁GLS组(3、4.5 g/kg)、模型组的移植瘤重瘤体积与对照组比较显著减少(P<0.05),中剂量、高剂量破壁GLS组和模型组的肿瘤抑制率分别为36.7%、44.5%、54.2%;用药4 w后,癌细胞S期和G2/M期细胞所占比例下降,相应的G0/G1期细胞增加,药物抑制了细胞的正常增殖,凋亡实验显示药物组细胞凋亡率增加,药物组总体凋亡率高于对照组(P<0.05或P<0.01);RT-PCR结果,破壁GLS组(1.5、3、4.5 g/kg)可使TMSG-1 m RNA表达明显上调,与生理盐水组比较显著增加(P<0.05或P<0.01)。结论破壁GLS粉具有抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用,同时上调MCF-7细胞裸鼠移植瘤组织中TMSG-1 m RNA的表达发挥潜在的抗肿瘤细胞转移的作用。

超高压超临界撞击流方法制备破壁灵芝孢子粉的机理分析

从灵芝孢子粉破壁的过程出发,结合灵芝孢子粉的结构,分析了采用超高压超临界撞击流方法制备破壁灵芝孢子粉的机理。分析结果表明:高速射流引起的撞击是造成灵芝孢子破壁的最主要原因。

破壁灵芝孢子油急性毒性与致突变性的研究

目的观察破壁灵芝孢子油的急性毒性及致突变作用。方法分别进行急性毒性实验、骨髓嗜多染红细胞微核实验、精子畸形实验。结果破壁灵芝孢子油对雌雄小鼠经口半数致死量(LD50)均大于10g/kg体重,为实际无毒级物质;骨髓嗜多染红细胞微核实验和精子畸形实验未发现破壁灵芝孢子油对小鼠有致突变作用。结论破壁灵芝孢子油是一种安全而且具有很高药用和食用价值的物质。

原木灵芝破壁孢子粉对小鼠免疫功能的影响

通过设3个浓度的原木灵芝破壁孢子粉药物组和阴性对照组,分别进行ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验,绵羊红细胞诱导小鼠DTH试验,小鼠血清溶血素测定,抗体生成细胞检测,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验,小鼠碳廓清试验,NK细胞活性测定试验和脏器指数测定。结果表明,与阴性对照组比较,低、中、高3个剂量原木灵芝破壁孢子粉均能提高小鼠脾淋巴细胞的增殖能力,差异均有显著性;高剂量组能提高小鼠左后足跖部24h与0h厚度差,差异有显著性;中剂量、高剂量组均能提高小鼠溶血空斑数,差异有显著性。说明原木灵芝破壁孢子粉具有较强的免疫调节作用。