破壁灵芝孢子粉中多种重金属元素及硒含量检测方法探讨

采用微波消解进行前处理,三重四极杆-电感耦合等离子体质谱法测定破壁灵芝孢子粉中镉、铬、镍、砷、铅、汞及硒元素含量,对方法条件进行优化和讨论,并对20批次破壁灵芝孢子粉进行测定。结果表明,镉、铬、镍、砷、铅和汞元素在氦气碰撞模式,硒元素在氧气反应模式下,采用内标校正定量,可达到良好的测定效果。在优化的条件下,各元素线性关系良好,检出限均可达μg·kg^(-1)级别;镉、铬、镍、砷、铅及硒元素的加标回收率在90.3%~105.0%,汞的加标回收率在82.1%~92.5%;方法精密度在5%以内。此方法前处理操作简便,检测灵敏度高,稳定性好,给灵芝孢子粉多元素测定提供了良好的技术支撑。

灵芝孢子粉多糖对APAP肝损伤的保护作用研究

目的:探讨灵芝孢子粉多糖(Ganoderma lucidum spore polysaccharide,GLSP)在对乙酰氨基酚(Aceta-minophen,APAP)肝损伤中的保护作用。方法:将50只小鼠随机分为五组,分别为空白组、模型组、阳性药物组、GLSP低剂量组和GLSP高剂量组,每组10只,各组按相应剂量连续14 d预给药后,使用APAP造模、取材,测定肝脏指数、血清指标(谷草转氨酶(glutamic oxalacetic transaminase,AST)、谷丙转氨酶(glutamic-pyruvic transaminase,ALT))及肝组织匀浆指标(谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、Caspase-3、Bax和Bcl-xl)。结果:与空白组相比,模型组中ALT、AST、MDA及促凋亡基因Caspase-3、Bax均极显著升高(P<0.01),SOD、GSH含量极显著降低(P<0.01),HE染色结果显示APAP处理的小鼠肝脏出现典型的小叶中心性坏死;多糖剂量组与模型组相比ALT、AST极显著降低(P<0.01),多糖低剂量组SOD、GSH显著升高(P<0.05),MDA显著降低(P<0.05),在多糖高剂量组中,SOD、GSH极显著升高(P<0.01),MDA极显著降低(P<0.01),多糖组促凋亡基因Caspase-3、Bax极显著降低(P<0.01),且肝组织病理学观察中可见肝组织坏死面积减小。结论:灵芝孢子粉多糖对APAP肝损伤能够起到预保护作用,其作用机制可能与提高肝脏的抗氧化能力和抑制凋亡的发生有关。

灵芝孢子粉和孢子油脂溶性成分分析

分析不同破壁时间、不同来源灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉,灵芝孢子油加工原料(破壁孢子粉)、中间体(制粒后孢子粉、一级萃取孢子油、二级萃取孢子油)和孢子油成品,不同来源灵芝孢子油,不同植物油的脂溶性成分含量和指纹图谱。结果表明:破壁处理能显著增加灵芝孢子粉中脂溶性成分溶出;不同来源灵芝孢子粉中脂溶性成分含量有差异,但不同来源孢子粉指纹图谱相似度均大于0.90,有18个共有峰;灵芝孢子油加工原料(破壁孢子粉)、制粒后孢子粉、一级萃取孢子油、二级萃取孢子油及孢子油成品脂溶性成分指纹图谱有22个共有峰,不考虑孢子油成品中维生素E峰,孢子油加工原料、中间体和孢子油成品间指纹图谱的相似度均大于0.99;不同来源灵芝孢子油指纹图谱峰组成和峰面积有差异,指纹图谱相似度为0.490~0.925,有23个共有峰;植物油的色谱峰与孢子油相比存在较大差异。研究结果为灵芝孢子粉和孢子油的质量控制提供参考。

酶法提取灵芝孢子粉胞壁水溶性糖的工艺优化及分子量分布

为提高灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉胞壁水溶性糖的提取效率,以灵芝孢子粉胞壁残渣为研究对象,用单因素实验、响应面实验优化酶法胞壁水溶性糖提取工艺,并比较酶法和不同物理法处理的灵芝孢子粉胞壁水溶性糖的分子量分布。结果表明:最佳提取工艺为溶壁酶加量2%,酶解时间5 h,料液比1︰10(g︰m L)、温度40℃、pH6.5,在此条件下提取的灵芝孢子粉胞壁水溶性糖含量达到17.86%。分子量分布分析结果表明,酶解后的水溶性糖以低聚糖为主。研究结果可为有效利用和开发灵芝孢子粉提供参考。

灵芝孢子粉咀嚼片的研发与制作

以灵芝孢子粉为原料,研制灵芝孢子粉咀嚼片。通过配方优化试验和感官品质评价分析,得出最佳配方组合为灵芝孢子粉14.4%、低聚果糖34.0%、全脂奶粉51.6%。按照此配方制作的灵芝孢子粉咀嚼片口感和形状俱佳,硬度和脆碎度均符合标准,入口易崩解,且无杂质产生。

某品牌灵芝破壁孢子粉的安全性评价

目的研究某品牌灵芝破壁孢子粉的安全性。方法采用急性毒性试验、3项遗传毒性试验和30 d喂养试验评价灵芝破壁孢子粉的安全性。结果该品牌灵芝破壁孢子粉对小鼠急性经口MTD值>15000 mg/kg b.wt,属无毒级;3项遗传毒性试验均为阴性结果;30 d喂养期间,不同剂量的灵芝破壁孢子粉对大鼠的体重、食物利用率、主要脏体、血液学和血生化指标均产生显著影响(P值均<0.05);试验动物组织病理学均未见显著改变。结论试验条件下,该品牌灵芝破壁孢子粉的安全性良好。

灵芝孢子粉对去卵巢大鼠骨量、骨生物力学和骨代谢的影响

目的研究灵芝孢子粉对去卵巢骨质疏松大鼠的治疗作用。方法随机取39只SD雌性大鼠进行去卵巢手术建立骨质疏松模型,剩余20只进行假手术。饲养16周建模成功后随机从假手术大鼠中取10只设为空白组(C组),随机取30只去势大鼠分为模型组(M组)、灵芝孢子粉低浓度组(BL组,400 mg/kg)和灵芝孢子粉高浓度组(BH组,1600 mg/kg),每日1次灌胃治疗,持续10周。比较各组大鼠的体重变化、脏器指数、股骨骨密度、骨小梁微观结构变化、骨小梁参数、骨生物力学性能、血清中骨代谢物水平。结果各组大鼠体重变化差异无统计学意义(P>0.05),肝、脾和胸腺的脏器指数差异无统计学意义(P>0.05),与C组相比,M组大鼠的子宫系数显著降低(P<0.01),而BL组与BH组大鼠的子宫系数显著高于M组(P<0.05)。与M组相比,BL组与BH组大鼠的股骨骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、最大载荷、弯曲强度、弹性模量和血清中雌二醇水平(E2)均显著提升(P<0.05);而骨小梁分离度(Tb.Sp)、血清中骨钙素(OC)、骨碱性磷酸酶(BALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP⁃5b)水平均显著降低(P<0.01)。Micro⁃CT骨微结构图像显示M组大鼠骨小梁减少而稀疏,而BL组与BH组大鼠骨小梁增多而致密。结论灵芝孢子粉对去卵巢大鼠的骨质疏松有一定治疗作用,推测其通过改善内分泌功能提升雌激素水平,以此平衡骨吸收与骨形成,从而改善骨质量、提升骨强度、提高骨密度。

《灵芝孢子粉培育与采集》出版

2023年7月,由李朝谦编撰的《灵芝孢子粉培育与采集》一书由浙江出版集团数字传媒有限公司出版,全书11章21.3万字,200多幅图片,系统介绍了龙泉灵芝及灵芝孢子粉培育与采集研创历程。李朝谦(1935—)为浙江龙泉人,在科技部门从事食药用菌研究工作三十余年,致力于灵芝栽培技术的普及和推广,尤其在人工栽培段木灵芝及灵芝孢子粉方面具有极高造诣,拥有国家发明专利4项。

灵芝孢子粉复合饮料的加工工艺研究

为丰富功能性饮料市场,以灵芝孢子粉为原料制备一款功能性饮料,以灵芝孢子粉浸提液添加量、山楂枸杞浸提液添加量、甘草浸提液添加量、木糖醇添加量为考查因素进行单因素试验,采取正交试验筛选出最优工艺。结果表明,灵芝孢子粉浸提液添加量为10%,山楂枸杞浸提液添加量为7.5%,甘草浸提液添加量为2.5%,木糖醇添加量为14%时,感官评分最高。此时产品呈浅褐色,有灵芝孢子粉特有的气味与口感,澄清透明,无杂质沉淀,酸甜协调。

不同干燥方式对灵芝孢子粉中灵芝孢子油过氧化值的影响

目的:比较不同干燥方式对灵芝孢子粉中灵芝孢子油过氧化值的影响。方法:以西藏灵芝孢子粉为例,采用不同的干燥方式将灵芝孢子粉干燥至合格,然后进行破壁,用超临界CO_(2)萃取法提取灵芝孢子油,检测灵芝孢子油的过氧化值,并比较不同干燥方式对灵芝孢子油的过氧化值的影响。结果:微波干燥和真空干燥方式得到的灵芝孢子油过氧化值均合格,分别为0.13%,0.14%;热风干燥和晾晒干燥方式得到的灵芝孢子油过氧化值不合格,分别为0.16%、0.17%。结论:水分变化率可能是灵芝孢子粉干燥过程中的重要影响因素,微波干燥方式水分变化率远高于其他方式,干燥效率高,耗能少,且不影响孢子油过氧化值,适合干燥大规模样品;其它干燥方式相对比较费时耗能,且灵芝孢子粉存在变质的风险。

破壁灵芝孢子粉对小鼠免疫功能的影响

目的研究破壁灵芝孢子粉对小鼠免疫功能的影响。方法ICR雄性小鼠随机分为4大组,高中低(0.99、0.33、0.165 g·kg^(-1))3个给药组和空白对照组,小鼠30天灌胃给药后,对小鼠各项免疫学指标检测。结果与对照组比较,破壁灵芝孢子粉高、中剂量组在2,4二硝基氟苯(DNFB)诱导的迟发型变态反应中具有显著性差异(P<0.05、P<0.01);同时高剂量组能促进小鼠NK细胞活性。结论破壁灵芝孢子粉可增强DNFB诱导的迟发型变态反应,对小鼠细胞免疫功能具有一定增强效果;同时能促进NK细胞活性,有助于增强小鼠免疫吞噬功能。

基于多糖及熵权-TOPSIS的灵芝孢子粉药材质量评价

目的:基于多糖部位及熵权-逼近理想解排序法(TOPSIS)模型建立灵芝孢子粉药材综合定量评价模型,为灵芝孢子粉药材质量评价及优选最佳批次提供参考。方法:测定同产地不同批次灵芝孢子粉药材粗多糖的得率、糖组成、总糖含量、蛋白含量和糖醛酸含量,将数据进行无量纲化后采用熵权-TOPSIS法综合评价不同批次灵芝孢子粉质量并建立优选标准。结果:各批次灵芝孢子粉外观均符合2020年版《中华人民共和国药典》描述。多糖质控指标中,熵权法赋权结果显示提取得率占比权重系数最大为28.44%,其次为半乳糖含量18.82%、总糖含量13.84%、蛋白含量13.24%。TOPSIS排序结果及分组显示,当相对贴近度(C_(i))≥0.55时,灵芝孢子粉为优质药材;当0.45≤C_(i)<0.55时,灵芝孢子粉为中等品质药材;当C_(i)<0.45时,灵芝孢子粉为下等品质药材。结论:不同批次间灵芝孢子粉质量差异较大。基于多指标的熵权-TOPSIS法可实现对灵芝孢子粉药材快速、高效且准确地优选优质药材来源,在生产和质量全面评价中有广泛的应用前景,也可为其他中药材或饮片质量评价提供参考。

苯酚硫酸法与硫酸蒽酮法测定灵芝孢子粉中灵芝多糖含量的比较

本文分别用苯酚硫酸法和硫酸蒽酮法测定灵芝孢子粉中灵芝多糖的含量,并对其进行比较。结果表明,两种方法都能准确地测定灵芝多糖含量,且结果基本一致。苯酚硫酸法的相对标准偏差为1.80%,加标回收率在92.4%~97.8%,硫酸蒽酮法的相对标准偏差为2.48%,加标回收率在90.8%~97.2%。苯酚硫酸法测定灵芝多糖具有更好的稳定性,但总体耗时较长,仪器成本高,在通用性和效率上不如硫酸蒽酮法。

灵芝孢子粉提质扩能生产及质量控制研究

为了能够保证灵芝孢子粉产品产量和质量,通过灵芝孢子粉精深加工提质扩能的建设和生产破壁灵芝孢子粉的质量控制,利用质量检测体系对灵芝孢子粉的理化指标进行了3批次的随机抽检分析,结果发现:提质扩能建设改善了生产车间、空气净化系统、净化水处理设备、保鲜冷库、外部参观通道窗口硬件设施,提升了低温灵芝孢子破壁、胶囊填充、自动装粉技术,使灵芝孢子粉产品的生产流程规范化标准化,灵芝孢子粉产品的理化检测指标均符合《破壁灵芝孢子粉质量标准》。

分光光度法测定破壁灵芝孢子粉中总三萜含量研究

目的:优化分光光度法测定破壁灵芝孢子粉中总三萜含量的分析方法。方法:分别针对方法中提取液除杂方式、挥干方式及水浴反应条件等进行优化,并对优化后的方法线性、检出限、定量限、准确性、专属性及重复性等进行验证。结果:测试方法中挥干方式为沸水浴挥干、除杂方式为4000 r·min^(-1)离心10 min、水浴条件为60℃反应15 min;熊果酸标准溶液在20~160μg范围内线性良好,相关系数R2为0.9992,加标回收率在93.12%~97.73%,相对标准偏差低于0.64%,方法检出限为0.1203μg·mL^(-1),定量限为0.3610μg·mL^(-1)。结论:该方法操作简便,条件明确,具有良好的准确度和精密度,适用于破壁灵芝孢子粉中总三萜含量测定。

不同品种灵芝子实体及孢子粉元素成分分析及重金属安全性评价

针对我国鲁西地区主栽灵芝品种,利用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定不同品种灵芝子实体、孢子粉及破壁孢子粉中元素及重金属含量,开展元素成分分析及重金属安全性评价。元素成分分析结果表明,藏芝和香血芝子实体中大部分元素含量明显高于赤芝、美芝和新大片子实体中元素含量,特别是Fe、Cu、Zn、Mn、Se、B、V、Co、Sr 9种人体必需微量元素,其中藏芝子实体中Fe元素含量达到234 mg/kg、Zn元素含量达到57.9 mg/kg、Se含量达到0.309 mg/kg,香血芝子实体样品Sr元素含量最高,达到3.60 mg/kg。赤芝粉和赤芝椴木粉元素营养质量高于美芝粉和新大片孢子粉元素营养质量,赤芝粉和赤芝椴木粉中硒含量分别是美芝粉中硒含量的3倍和2倍。重金属安全性分析结果表明5种灵芝子实体与4种孢子粉样品Pb、Hg 2种重金属含量远低于相关标准,安全性较高,藏芝及香血芝子实体、新大片孢子粉样品As元素含量较高,具有一定的安全性风险。破壁技术会造成孢子粉中As、Pb、Cd、Cr、Cu、Ni金属元素含量不同程度的提高,孢子粉破壁过程中重金属存在一定的安全风险。

适合孢子粉高产的赤灵芝栽培配方筛选

为充分利用湛江市本地甘蔗渣、桑屑枝条、土沉香渣等秸秆资源,降低赤灵芝生产对木材原料的依赖,通过研究3个配方菌丝生长速度、子实体和孢子粉产量、品质(多糖、三萜)、抗氧化活性等,筛选出适合本地的优良赤灵芝栽培配方。结果显示,添加了甘蔗渣的配方2,菌丝生长速度最快(0.75 cm·d^(-1)),孢子粉产量最高(14.45 g/袋),且多糖和三萜总含量也高于其他2个配方。添加土沉香渣的配方3,菌盖直径(7.55 cm)、子实体鲜质量(36.79 g/袋)、总产量最高,但多糖和三萜总含量不如其他2个配方。添加了桑屑的配方1,赤灵芝的总抗氧化活性稍高于其他2个配方,但无显著差异。3个配方下子实体的三萜含量高于孢子粉,而孢子粉的多糖含量高于子实体。综合分析,配方2是实现梅灵3号灵芝孢子粉高产的较优栽培配方,适合在当地推广应用。

灵芝孢子粉微胶囊的制备及其氧化稳定性研究

灵芝孢子粉具有多种生理活性,但其存在易氧化等缺点。该文采用复凝聚法制备银耳原胶-明胶复配壁材的灵芝孢子粉微胶囊,并分析了其氧化稳定性。通过响应面实验优化后的最佳制备工艺为:破壁灵芝孢子粉质量分数33.1%、银耳原胶质量分数36.5%、明胶质量分数30.4%、包埋pH 4.1时的包埋率为94.0%。灵芝孢子粉微胶囊的微观结构呈现不规则皱缩的球形,囊壁完整性好。在加速氧化实验中,以油脂过氧化值、酸价作为评价指标,灵芝孢子粉微胶囊相比于未包埋的灵芝破壁孢子粉具有更好的氧化稳定性。微胶囊化有助于提高破壁灵芝孢子粉功能性物质的氧化稳定性,扩大其在食品工业中的应用范围。

灵芝孢子粉提取物延缓皮肤衰老作用研究

寻找天然有效成分以延缓皮肤衰老是近年来人们关注与研究的热点。为研究灵芝孢子粉提取物(Ganoderma lucidum spore extract,GLSE)对新生儿人真皮成纤维细胞(human dermal fibroblasts neonatal,HDFn)氧化损伤保护作用及其抗衰老作用,构建叔丁基过氧化氢(tert-butyl hydroperoxide,TBHP)诱导HDFn氧化损伤衰老模型,测定GLSE对衰老模型的保护作用以及细胞中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性以及丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平、线粒体膜电位变化;同时测定衰老相关β-半乳糖苷酶活性以及抗氧化应激相关Nrf2/HO-1通路表达情况。结果显示,GLSE预处理后对TBHP诱导的衰老模型具有保护作用;GLSE作用HDFn后,能够降低MDA含量,提高细胞SOD和GSH-Px活性,稳定细胞线粒体膜电位,并且可以抑制细胞β-半乳糖苷酶活性,激活通路Nrf2/HO-1 mRNA表达。因此,GLSE作用于HDFn后,可以有效地减弱TBHP诱导的氧化损伤,从而达到延缓皮肤衰老的作用。

灵芝破壁孢子粉的抗肿瘤活性研究

目的研究灵芝破壁孢子粉对乳腺癌和口腔癌生长的抑制作用。方法采用灵芝破壁孢子粉乙醇提取物处理乳腺癌MCF-7细胞、口腔癌KB细胞和宫颈癌HeLa细胞,检测三种细胞的增殖情况。构建裸鼠乳腺癌MCF-7移植瘤和口腔癌KB移植瘤模型,评价灵芝破壁孢子粉进行灌胃治疗后的肿瘤生长抑制情况。结果灵芝破壁孢子粉乙醇提取物显著抑制MCF-7、KB和HeLa细胞的增殖,且该抑制效应呈剂量依赖性。在MCF-7移植瘤模型中,低、中、高3组灵芝破壁孢子粉给药剂量均有显著的肿瘤生长抑制作用,肿瘤抑制率分别为50.35%、65.72%和80.55%;但在KB移植瘤模型中,低剂量组没有显示显著的肿瘤生长抑制作用,而中剂量组和高剂量组表现出明显的抗肿瘤作用,3组肿瘤抑制率分别为4.03%、37.63%和40.59%。结论灵芝破壁孢子粉能够抑制MCF-7乳腺癌和KB口腔癌荷瘤裸鼠肿瘤的生长。