人工培育蝉花孢梗束分级多糖的抗氧化活性及对果蝇寿命的影响

对人工培育的蝉花孢梗束采用不同浓度乙醇进行分级醇沉,对获得的分级多糖以DPPH自由基清除能力、还原力、铁离子螯合能力为指标进行了体外抗氧化活性分析;将各分级多糖按照1%的比例添加到野生黑腹果蝇基础培养基中,以不添加多糖饲喂的果蝇为对照组,以果蝇平均寿命、半数死亡时间和最高寿命为指标评价分级多糖对果蝇寿命的影响;以果蝇体内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)酶活力、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量为指标评价分级多糖的体内抗氧化活性。试验结果表明,蝉花孢梗束的各分级多糖均具有体外抗氧化活性,且多糖的抗氧化能力与其质量浓度呈正相关。其中P40、P60、P70的DPPH自由基清除活性较强,其EC50依次分别为0.278、0.326、0.385 mg/m L;P60、P70、P30的还原能力较强;P60、P70、P80的铁离子螯合能力较强。在果蝇寿命实验中,P60可显著提高雌雄果蝇的平均寿命、半数死亡时间和最高寿命(p<0.05);P60分级多糖显著提高了雌、雄果蝇体内SOD酶的活性(p<0.05),P70、P90分级多糖显著降低了雄果蝇体内MDA的含量(p<0.05),其次是P60多糖,但各分级多糖对雌果蝇体内MDA含量的影响差异不显著。总之,蝉花孢梗束各分级多糖均具有抗氧化活性,P60分级多糖的活性相对最强。

峨眉山野生金蝉花孢梗束培养试验

为确定峨眉山金蝉花孢梗束培养的最佳工艺条件,对金蝉花孢梗束生长的常用培养基配方进行筛选试验,选用大米、小米、黄豆等原料进行配方试验,采用均匀设计试验法优化培养基配方。结果表明,金蝉花在以无机盐为主要营养成分的Richard琼脂培养基和Czapek琼脂培养基上均能产生孢梗束。在大米等的配方试验中,以大米为营养物质的金蝉花孢梗束生长最快,金蝉花氨基酸含量为23.4%,粗多糖含量为26.5%,蛋白质含量为29.3%,均高于野生金蝉花中该物质的含量。在均匀设计的配方试验中,10号培养基中的金蝉花孢梗束以珊瑚状为主,菌体形态最好,孢梗束产率可达57.4%。10号配方孢梗束中蛋白质的含量高达42.5%,氨基酸含量高达33.3%,均远高于野生金蝉花。

硒对蝉花孢梗束营养和功能成分的影响

以亚硒酸钠为硒源,通过蝉花孢梗束的富硒培养,探究硒对蝉花孢梗束营养和功能成分的影响,并对富硒蝉花孢梗束蛋白质的营养价值进行评价。结果表明,蝉花孢梗束中硒的含量随培养基中外源添加量的增加而提高,当培养基中亚硒酸钠浓度为100 mg·kg^(-1)时培养的蝉花孢梗束中硒含量达到142.22 mg·kg^(-1)。富硒培养的蝉花孢梗束中蛋白质、脂肪、腺苷和甘露醇的含量均较对照组有显著的提高,在培养基中亚硒酸钠浓度为75 mg·kg^(-1)时富硒蝉花孢梗束的蛋白质氨基酸比值系数分(SRCAA)为52.60,高于对照组。聚类分析表明,总体上富硒培养时亚硒酸钠浓度越高对蝉花孢梗束营养和功能成分影响越大。综合分析得出,当培养基中亚硒酸钠浓度为75 mg·kg^(-1)时既能提高蝉花孢梗束中蛋白质、脂肪、腺苷和甘露醇的含量,又能提高蝉花孢梗束的蛋白质营养价值。

超高压提取蝉花孢梗束成分工艺的研究

本文以腺苷的提取得率为指标通过单因素实验和正交实验法优化了超高压提取蝉花孢梗束中成分的工艺。结果表明:压力强度为350 MPa、保压时间为15 min、料液比为1:40 (g/mL)、溶剂为20%的乙醇是最佳工艺条件,在此条件下腺苷的提取量可达(1.80 &#177;0.17) mg/g,麦角固醇、甘露醇、可溶性蛋白和游离氨基酸的提取得率显著高于未经超高压处理(P 【0.05)。超高压提取液在250~280 nm附近紫外吸收峰和在280~300 nm及350~400 nm之间的荧光峰强度明显高于未经超高压提取的。超高压技术能有效促进蝉花孢梗束中的营养和功能成分溶出。

不同干燥温度对蝉花孢梗束品质的影响

本文研究了不同干燥温度,即50℃、80℃、105℃热风干燥和室温自然干燥对蝉花孢梗束粉的外观、营养成分、功能成分和蛋白质营养价值的影响。运用聚类分析对不同方式干燥得到的蝉花孢梗束数据进行综合分析。结果表明80℃干燥蝉花孢梗束颜色呈现亮黄色,其次是50℃干燥蝉花孢梗束为黄色,自然干燥蝉花孢梗束为淡黄色,105℃干燥蝉花孢梗束为黄略带红色;自然干燥蝉花孢梗束中总氨基酸、必需氨基酸、天冬氨酸、苏氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、组氨酸和精氨酸含量较高,50℃干燥的蝉花孢梗束含有较高的甘露醇、蛋白质、脂肪、丝氨酸、丙谷氨酸、半胱氨酸、亮氨酸和苯丙氨酸,80℃干燥的蝉花孢梗束含有较高的总糖、麦角甾醇、氨酸、酪氨酸、赖氨酸和脯氨酸,105℃干燥的蝉花孢梗束含有较高的腺苷和灰分;随着干燥温度升高蝉花孢梗束蛋白质营养价值呈现降低的变化。

蝉花孢子粉与孢梗束的化学成分及其多糖对果蝇寿命的影响

系统分析了人工培育蝉花孢子粉和孢梗束中的化学成分,并考察了多糖对果蝇寿命及体内抗氧化活性的影响。结果显示,蝉花孢子粉中粗蛋白的含量显著高于孢梗束,但灰分、粗脂肪、多糖及还原糖的含量显著低于孢梗束(p<0.05);孢子粉和孢梗束中含有相同种类的氨基酸,含有除色氨酸外的其他7种人体必需氨基酸,必需氨基酸占氨基酸总量的比例分别为30.42%和31.09%;孢梗束中Ca含量高达(104.75±5.76)μg/g,显著高于蝉花孢子粉,但Fe和Zn的含量却显著低于蝉花孢子粉(p<0.05);孢子粉和孢梗束中不含虫草素,孢梗束中腺苷和尿苷的含量显著高于蝉花孢子粉(p<0.05)。蝉花孢子粉中剂量组雌雄果蝇的半数死亡时间、平均寿命及最高平均寿命均显著高于对照组,孢梗束多糖各剂量组雌果蝇的半数死亡时间和最高寿命显著提高,中、高剂量组雄性果蝇的半数死亡时间和最高寿命亦显著高于空白对照组(p<0.05);蝉花孢子粉和孢梗束多糖可显著提高果蝇体内SOD的活性,孢子粉多糖中、高剂量组雌雄果蝇体内的MDA含量显著降低,孢梗束多糖各剂量组雄性果蝇及高剂量组雌性果蝇体内的MDA含量亦显著低于对照组(p<0.05)。

蝉棒束孢菌孢梗束培植过程中主要成分含量的变化规律及其复方对小鼠睡眠的影响

分析检测蝉棒束孢菌株BAI0101在培植过程中不同时间点孢梗束的转化率和孢梗束中多糖、虫草酸、腺苷和N6-(2-羟乙基)腺苷含量的变化规律,对配伍的孢梗束复方辅助改善睡眠功能进行了初步评价。结果表明,从培植18d起,孢梗束的转化率呈现上升趋势,在培植30d左右,有保持稳定趋势;孢梗束中的多糖、虫草酸和腺苷含量均随着培植时间的延长呈现增高趋势,均在22–24d达到最高值,其后开始呈现降低趋势,而孢梗束中的N6-(2-羟乙基)腺苷含量随着培植时间的延长呈现降低趋势,在24–26d左右达到最低值,其后呈现上升趋势,在培植至36d左右达到含量的最高值并保持稳定;对利用该菌株培植的孢梗束,经中药配伍组成的保健品小复方进行了辅助改善睡眠保健功能的初步评价,结果表明该复方有明显促进阈下剂量戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠作用,能明显降低巴比妥钠诱导小鼠睡眠潜伏期,且无直接睡眠作用,不影响戊巴比妥致小鼠睡眠时间,根据《保健食品检验与评价技术规范》,判定该复方具有辅助改善睡眠的保健功能。

蝉花孢梗束的毒性研究

目的对人工培植的蝉花孢梗束进行毒理学研究,评价其口服安全性。方法利用急性毒性试验、体外中国仓鼠肺细胞染色体畸变试验、骨髓细胞微核试验、鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验和孕鼠致畸试验进行毒理学评价。结果急性毒性试验结果表明蝉花孢梗束对雌、雄大鼠急性经口最大耐受量(MTD)均>10 g/kg,属于无毒级;中国仓鼠肺细胞染色体畸变试验、骨髓细胞微核试验、鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验以及3项遗传毒性试验的结果皆为阴性,未显示致突变性;蝉花孢梗束各剂量组在大鼠孕期体质量、死胎率、吸收胎率与阴性对照组比较差异无显著性(P>0.05),各剂量组胎鼠质量、胎鼠身长、前囟宽度与阴性对照组比较差异无显著性(P>0.05);各剂量组在胎鼠外观、内脏发育、骨骼发育检查上与阴性对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论在本研究条件下,未见蝉花孢梗束有急性毒性、遗传毒性,对孕鼠无致畸作用,具有良好的安全性。

层束梗孢属一新种

本文报道采自贵州的中国新记录属层束梗孢属Hymenostilbe一新种刺孢层束梗孢（Hymenostilbespiculatasp．nov．Huan，FanetLi）。该种寄生于蜘蛛，产孢细胞子实层状复被于孢梗束上，无瘤，多点芽菌产孢。分生孢子单生，光滑或具细刺，56～6．6×1．3～2．7μm。

蜂头虫草无性型——蜂头层束梗孢活性成分分析

测定了蜂头虫草无性型——蜂头层束梗孢(Hymenostilbe sphecophila Kob)HS01胞外多糖含量、5种核替代谢量和氨基酸含量。结果表明,胞外多糖含量最高可达1.75 g/L,胞内多糖含量最高可达2.423%;发酵液与菌丝体中均含有尿苷、鸟苷、肌苷、胸腺嘧啶核苷和腺苷5种核苷,其含量均高于对照品冬虫夏草生药;HS01发酵菌丝体与天然虫草生药在氨基酸种类上一致,但氨基酸总量和人体所必须氨基酸总量明显高于冬虫夏草生药,氨基酸总量为8.330 mg/g。

球束梗孢属中国一新纪录种

对中国西南地区球束梗孢属资源进行调查,发现三个种,分别为中国新记录种——尾生球束梗孢Gibellulaclavulifera var.clavulifera,大陆新分布种——密球束梗孢Gibellula leiopus和已知种——丽球束梗孢Gibellula pul-chra,本文根据所采集到的标本对3个种进行了描述和讨论。

大别山的两种刺束梗孢

采自大别山的两种刺束梗孢，其中长孢刺束梗孢（Akanthomyceslongisporus）为新种，有拉丁文描述和图版。本种孢梗束多，密集，棕褐色，棒状。产孢结构和纤细刺束梗孢（A.gracilis相似，瓶梗以密集的子实层状被覆孢梗束。分生孢子多单细胞，少数双细胞，纺锤形至柱形，8.8～14.8×2．0～3.0μm。新几内亚刺束梗孢的标本同时并存刺状和棒状的孢梗束，这支持Samson将虫束梗孢属视为刺束梗孢属异名的观点。标本保存于安徽农业大学虫生真菌室（RCEF）

束梗孢菌引致的两种植物病害之研究

本文报道在我国新发现的两种病害:杜鹃芽腐病和棕叶芦叶枯病,杜鹃芽腐病由杜鹃芽链束梗孢菌[Pycnostysanus azaleae(Peck)mason]引起;棕叶芦叶枯病由棕芦环纹束梗孢菌[Annellophragmia coonoorensis(Subram.).Subram]引起。这两种病害在国内尚未见报道,故文中对病原形态特征作了较详细的描述并与文献记载的属、种相比较。对于这两种病害的发生、危害、症状及防治也分别作了记述和讨论。

不同干燥方式对培养蝉花孢梗束品质的影响

本研究为探究不同干燥方式对蝉花孢梗束品质的影响和为生产中蝉花孢梗束选择合适的干燥方式提供理论依据,研究了自然干燥、热风干燥、微波干燥、热泵干燥和冷冻干燥对蝉花孢梗束粉的外观、粒度、主要营养和功能成分的影响。运用主成分和聚类分析对不同干燥处理得到的样品的数据进行综合分析。研究表明热泵干燥能最好地保持样品的亮黄色色泽,蓝黄度b*为36.74,显著高于其他方式干燥样品,其次是微波干燥;但是这两种方式干燥的蝉花孢梗束总氨基酸和必需氨基酸含量均较低。自然干燥和冷冻干燥的样品感观较差,蓝黄度b*均小于28且二者差异不显著。热风干燥样品色泽仅次于微波干燥,含有较高蛋白质、总氨基酸和总糖,且其脂肪、麦角甾醇和甘露醇的含量最高,分别为4.15 g/100 g、8.65 mg/g和59.20 mg/g。总体考虑,热风干燥能较好地保持蝉花孢梗束的色泽、营养和功能成分,且技术成熟度高,适用于工业化大生产。

一种罕见虫生真菌蜻蜓层束梗孢的重新描述

采用形态比较、分子系统发育和拆分网络分析等方法,对寄主为蜻蜓的虫生真菌进行分类鉴定。结果显示:该真菌为Hymenostilbe odonatae Kobayasi,主要形态特征为橘黄色孢梗束从寄主周身节间膜和背部长出,长0.4-0.5 cm,宽179-333μm;瓶梗柱状,9.7-14×3.2μm,紧密排列成子实层状,顶部具再育小梗;分生孢子为柱状单生,6.5-9.7×1.1-2.2μm。系统发育分析和进化网络分析也证明该种为蜻蜓层束梗孢,为我国已知种但未被详细描述。

束梗孢科一个国内新记录属及其所致病害

本文报道寄生于杜鹃(Rhododendron sp.)芽及芽鳞上的一个国内新记录属:芽链束梗孢属 Pycnostysanus Lindau 和该属的一个种:杜鹃芽链束梗孢 P.azaleae(Peck)Mason,及其所致病害:杜鹃芽腐病。文中讨论了该菌与相似属、种的区别。标本采自云南滇西高山丛林,海拔2300～2700m 的白花杜鹃(R.mucronatum Turcz)及其它几种杜鹃上。

大豆蚜Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂基因AgKaSPI对蜡蚧刺束梗孢菌侵染的表达响应

【目的】探究Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂KaSPI在大豆蚜Aphis glycines的生长发育、消化和免疫防御等过程中的作用。【方法】基于大豆蚜转录组数据PCR克隆大豆蚜Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂基因cDNA序列;qRT-PCR分别检测AgKaSPI在大豆蚜1-4龄若虫和成虫以及蜡蚧刺束梗孢菌Akanthomyces lecanii侵染3,6,12,24,48和72 h时大豆蚜成虫中的表达水平;siRNA干扰AgKaSPI 3,6,12,24和48 h后qRT-PCR检测RNAi干扰效率,并记录RNAi后12,24,48和96 h时大豆蚜成虫死亡数和产蚜量;双抗体夹心法检测蜡蚧刺束梗孢菌侵染和RNAi干扰AgKaSPI后大豆蚜成虫体内AgKaSPI蛋白含量以及丝氨酸蛋白酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶活性变化;观察并记录RNAi干扰AgKaSPI后6 h蜡蚧刺束梗孢菌侵染大豆蚜成虫12,24,48和96 h时的死亡数。【结果】在大豆蚜体内克隆得到了一条丝氨酸蛋白酶抑制剂基因AgKaSPI的cDNA序列(GenBank登录号:MK440557),序列全长1019 bp,开放阅读框长324 bp,编码107个氨基酸。AgKaSPI具有Kazal结构域,推测分子量和等电点分别为11.43 kD和9.24。基因表达模式研究发现,AgKaSPI在大豆蚜各个龄期均有表达。大豆蚜成虫经蜡蚧刺束梗孢菌侵染24 h时,AgKaSPI基因表达量显著上调,为对照的4.31倍;相应AgKaSPI蛋白含量也显著上调,为对照的1.69倍;而丝氨酸蛋白酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶活性受到抑制。RNAi干扰AgKaSPI 6 h时,大豆蚜成虫体内AgKaSPI表达量下降了71.05%;KaSPI蛋白含量在干扰12 h时下降了51.11%,丝氨酸蛋白酶和胰凝乳蛋白酶活性显著增强;干扰96 h时每百头大豆蚜产蚜量减少了49头且大豆蚜成虫的死亡率增加了10.12%。【结论】AgKaSPI在大豆蚜各个龄期均有表达,且在蜡蚧刺束梗孢菌侵染24 h后表达量显著上调。AgKaSPI可能通过调节丝氨酸蛋白酶活性参与了大豆蚜对蜡蚧刺束梗孢菌的免疫反应。

竹类镰刀菌及束梗镰孢与刚竹紫斑病的关系

1977—1988年间在浙江省各地采集竹类上镰刀菌标本共35份,分离获得83个菌株,鉴定结果分别属于10个镰刀菌种和变种,即:Fusarium acuminatum,F.camptoceras,F.equiseti,F.moniIiforme,F.moililiforme var.intermedium,F.moni.1ifOrme var.SUbglutinans,F.oxysporum.F.semitectum,F.solani and F.stilbOides.除了F.molliliforme Sheld.和F.solani有过报导外,其余8个种和变种在竹上的分离物均为第一次记录。从刚竹紫斑病病斑上分离得到的F.stilboides Wollen.在刚竹PhyIlostachys spp.上作了接种试验,证明是引起浙江省刚竹紫斑病的病原菌。

几种虫生束梗孢(Stilbellaceae)新种和新记录种

本文报道了采自我国部份地区的寄生昆虫的被毛孢(Hirsutella Pat.)及其近缘属的新种和新记录种。它们是多颈被毛孢(Hirsuiella polycolluta Liang);长白山被毛孢(Hirsutellachangbeisanensis Liang);巨形被毛孢(Hirsutella gigantea Perch);云南被毛孢(Hirsutella sp.)和枝多头霉[Polycephalomyces ramosum(Peck)Mains]。此外,本文还特别提出枝多头霉具有的重寄生现象和多型性对虫草无性型的正确确定具有重要的启示。