季也蒙迈耶氏酵母提高再造烟叶浓缩液香气品质研究

为提升再造烟叶的香气质,从葡萄表面筛选到一株能够发酵再造烟叶浓缩液进行产香的微生物Y-7,对其进行了菌种鉴定和发酵条件优化,并检测了其对再造烟叶的增香效果。结果表明,Y-7菌株为季也蒙迈耶氏酵母(Meyerozyma guilliermondii),最佳生长条件为pH 7.0、25℃。使用该酵母对60%再造烟叶浓缩液发酵24 h,能显著提升浓缩液中多种挥发性致香物质的含量,其中酮类、醇类、酸类、酚类和其他致香物质分别提升26.92%、101.07%、349.47%、33.62%和20.35%;新增致香物质11种。Y-7发酵浓缩液能够显著提升再造烟叶的香气质和香气量、甜感和余味舒适性,改善其品质。综上,季也蒙迈耶氏酵母Y-7在塑造再造烟叶浓缩液香气品质方面具有良好的应用前景。

酸奶中1株季也蒙假丝酵母的分离鉴定

[目的]鉴定分析酸奶中检出酵母,快速分析查找来源,控制产品质量,预防质量问题产生。[方法]以胀包酸奶为对象,采用孟加拉红培养基测定产品中酵母菌,分离纯化后,经菌落形态和细胞形态观察确认为酵母菌,分别采用生化鉴定及真菌种属鉴定(ITS)分离菌株。[结果]分离菌株为单一菌株,其为季也蒙假丝酵母。[结论]为生产中酸奶污染菌株的分析提供理论指导及参考方向。

季也蒙毕赤酵母对采后草莓病害控制及冷藏品质的影响

采用季也蒙毕赤酵母(Pichia guilliermondii)作为拮抗菌处理采后草莓(Fragaria ananassa Duchesne.‘Toyonoga’),测定不同浓度酵母菌悬液对采后草莓果实灰霉病害的抑制效果,以及菌悬液对草莓果实冷藏(2℃、RH90%～95%)品质的影响。结果表明:季也蒙毕赤酵母能显著抑制草莓灰霉病病斑的扩展,且菌悬液浓度越高,抑制效果越好。菌悬液浓度为5×109CFU·mL-1时,病斑直径比对照小34.0%。拮抗菌悬液处理对果实呼吸强度影响很小,但可以保持果实的光泽和可溶性固形物含量,并显著减小失重率,维持果实硬度,延长果实的贮藏寿命。季也蒙毕赤酵母菌悬液处理显著提高了草莓的冷藏品质。

氯化钙结合季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)对抑制芒果采后炭疽病效果的影响

研究氯化钙(CaCl_2)结合季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)处理对由炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)引起的芒果采后炭疽病的抑制效果,同时分析CaCl_2对病原菌和酵母拮抗菌生长以及果实抗病性的影响。结果显示:40 g/L CaCl_2可有效提升拮抗菌M.guilliermondii对芒果采后炭疽病的生防效果,其中40 g/L CaCl_2与1×108 CFU/m L M.guilliermondii悬浮液的复合处理比单一处理更能有效地抑制芒果果实采后炭疽病的发生。此外,40 g/L CaCl_2对C.gloeosporioides菌丝的生长具有抑制作用,并能够促进拮抗菌M.guilliermondii在芒果果实伤口处的增殖。与此同时,该复合处理显著诱导了芒果果实抗病相关酶活性的升高。结果表明,40 g/L CaCl_2可以直接通过抑制病原菌的生长和促进拮抗酵母的增殖、以及间接诱导果实抗病性来提升拮抗菌M.guilliermondii对芒果果实采后炭疽病防治效果。

季也蒙假丝酵母对采后桃果实软腐病的抑制效果

研究了季也蒙假丝酵母 (Candidaguilliermondii (Cast)LangeroretGuerra)在培养基上和不同贮藏温度下对桃果实软腐病菌 (Rhizopusstolonifer (Ehrenb .exFr.)Vuill.)的抑制效果。结果表明 ,季也蒙假丝酵母的浓度越大 ,抑制效果越好 ;当接种孢子浓度为 5× 10 4 个 /mL时 ,在 2 5℃、15℃和 3℃ 3种贮藏温度下 ,5× 10 8CFU (colony_formingu nit) /mL的酵母悬浮液完全能抑制桃果实软腐病的发生。酵母悬浮液浓度为 1× 10 8CFU/mL时 ,以 2 4h后接种病菌孢子的抑菌效果最佳。季也蒙假丝酵母能在果实伤口处迅速繁殖 ,在 2 5℃、15℃和 3℃下分别培养 3d、3d和 7d时 ,酵母数量可增加 45 .6、34.4、33.1倍 ,并对果实不产生任何伤害。该菌不产生抗菌素 ,其抑菌机理可能与营养竞争等有关。

发酵法生产辅酶Q_(10)的季也蒙假丝酵母菌株的选育

对实验室自行筛选的辅酶Q10产生菌株———季也蒙假丝酵母(Candida guilliermind)CG108进行Co60-γ射线辐照、微波诱变、紫外照射、紫外线结合LiCl处理等复合诱变,并结合卡那霉素抗性和耐前体突变株的理性化筛选,获得一株辅酶Q10高产菌株PN251.该菌株摇瓶发酵的生物量为6.21 g/L,辅酶Q10产量为11.2 mg/L,较出发菌株提高256%.该诱变株遗传性能稳定,经转接五代后其辅酶Q10产量为10.9 mg/L,是一株很有开发前景的辅酶Q10发酵菌株.

季也蒙假丝酵母胞外多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

对一株源于海参肠道的季也蒙假丝酵母产胞外多糖进行分离纯化并对其抗氧化活性进行研究。采用乙醇沉淀、Sevag除蛋白等方法得到胞外粗多糖EPS。EPS经Sepharose强阴离子交换层析分离后,分别得到3个组分EPS1、EPS2和EPS3,对抗氧化活性较高的EPS2采用Sephacryal凝胶过滤层析进行纯化,得到1个单一组分EPS2-1,采用气相色谱法分析其单糖组成,并验证其抗氧化活性。结果表明:EPS2-1是由木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的;它具有较强的抗氧化活性,当其浓度为0.36 mg/m L时,对羟基自由基的清除率可达100%,明显高于同浓度下Vc对羟基自由基的清除率14.42%;当EPS2-1浓度为0.60 mg/m L时,对超氧阴离子自由基的清除率可达53.22%;同时EPS2-1表现出一定的还原力。研究证明该活性多糖具有很好的应用潜力,值得进一步研究开发。

季也蒙毕赤酵母对草莓采后灰葡萄孢霉的抑制机理

以季也蒙毕赤酵母为拮抗酵母菌、草莓(Fragaria ananassa Duch)为供试果实,初步研究并探讨拮抗酵母菌对果实采后灰葡萄孢霉的抑制机理.结果表明:季也蒙毕赤酵母对草莓采后灰葡萄孢霉抑制机理不包括产生抗菌物质:两者之间存在营养竞争,在营养相对充足即营养浓度较高的情况下会减弱季也蒙毕赤酵母的抑制效果;接入拮抗酵母菌能够诱导寄主产生抗性,能够诱导超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性,使其保持较高活性,同时能够保持较低的丙二醛(MDA)含量.

季也蒙假丝酵母处理对水蜜桃采后生理与贮藏品质的影响

研究了在室温条件下,季也蒙假丝酵母对‘白花’水蜜桃采后保鲜品质的影响。结果表明:与对照组相比,季也蒙假丝酵母对水蜜桃有明显的保鲜效果,50mL菌液/1000mL无菌水的保鲜效果最好;100mL菌液/1000mL无菌水和25mL菌液/1000mL无菌水对水蜜桃保鲜效果好于对照组。季也蒙假丝酵母菌作为工程菌容易获得,相对安全。

季也蒙假丝酵母对松材线虫病的抑制作用

松材线虫病是重要的森林病害,该病与松材线虫携带的病原菌和松树的内生病原菌密切相关。在室内条件下,初步研究了从人工培养的松材线虫上分离到的菌株C对松材线虫病的抑制作用。在健康的水培马尾松枝上分别接种松材线虫接种液、菌株C接种液、松材线虫与菌株C的混合接种液。处理后松枝的相对重量与相对蒸腾强度均为:接种菌株C的松枝>混合接种的松枝>接种线虫的松枝。处理后15d时,接种线虫的松枝与混合接种的松枝的相对重量有显著性差异(p<0.05)。接种线虫松枝的存活期显著短于其它处理松枝的存活期(p<0.05)。接种菌株C的针叶褐变株数少于接种线虫的松枝,两者有显著性差异(p<0.05)。从接种线虫和混合接种的所有松枝中都分离到松材线虫,且分离出的线虫量没有显著性差异。将8个月生的断根马尾松苗插入菌株C的查彼培养液的滤液中培养,6d后松苗的平均感病指数和感病株率均显著少于对照(p<0.05)。这表明,菌株C对松材线虫病有抑制作用,菌株C培养液中产生的某些代谢物质有利于松苗的抗病和存活。菌株C可能抑制了松树上的内生病原菌和松材线虫携带的病原微生物,或提高了松树的生长力和抗逆能力。经电子显微镜观察并参照AP I 20 C AUX鉴定系统鉴定,菌株C为季也蒙假丝酵母C and id a gu ilierm ond ii。

弱酸副产物对季也蒙假丝酵母发酵木糖醇的影响研究

研究了甲酸、乙酸、乙酰丙酸作为发酵副产物,对季也蒙假丝酵母发酵木糖醇的影响。分别将每种副产物以不同浓度加入到培养基中进行发酵试验,结果表明:甲酸对发酵木糖醇的抑制作用最为明显,1g.L-1甲酸对发酵就具有较为明显地抑制作用,5g.L-1甲酸几乎完全抑制了发酵;1g.L-1乙酸、乙酰丙酸有利于发酵的进行,当它们的浓度小于2g.L-1时,对发酵没有明显地抑制作用,但当它们的浓度达到8g.L-1时完全抑制了发酵的进行;水解液中的弱酸类副产物共存时,对于发酵木糖醇的抑制影响基本呈现累加效应。

季也蒙毕赤酵母ypy17产脂肪酶条件的优化

从海南洋浦近海岸分离到1株产脂肪酶的酵母菌株,经鉴定为季也蒙毕赤酵母(Pichia guillier-mondii),利用Plackett-Burman设计对发酵条件进行了筛选。结果表明,橄榄油、初始pH值和K2HPO4浓度对脂肪酶生产具有显著的影响;利用响应面法对3个因子进行了优化,获得了最佳发酵条件为橄榄油31.57 g/L,硫酸铵10.00 g/L,NaCl 30.00 g/L,K2HPO4 1.16 g/L,初始pH值7.30,28℃培养72 h,脂肪酶活力达到18.20 U/mL。

季也蒙毕赤酵母Y35-1菌株对枇杷采后炭疽病的抑菌效果及保鲜作用

利用从原生态枇杷果实上分离筛选并鉴定的、能显著抑制炭疽病的季也蒙毕赤酵母Y35-1菌株,研究其抑菌抗腐效果,并将其制成液体和固体型菌剂在枇杷贮藏保鲜方面应用。结果表明:拮抗酵母Y35-1菌株能够有效抑制枇杷炭疽病胶孢炭疽菌孢子的萌发,能够在病原菌菌丝上寄生而抑制菌丝的正常生长,不接触对峙培养实验显示Y35-1菌株能够有效抑制病原菌菌丝的扩展和生长。保鲜应用表明:酵母Y35-1液体和活性冻干粉菌剂均能明显抑制枇杷果实贮藏期间的病害腐烂发生率,贮藏至第20天时,两处理组果实腐烂指数分别仅为2.25%和3.60%;且这两种生防菌剂对枇杷的硬度、质量损失率、可溶性固形物、果皮细胞膜透性、总糖含量、总酸含量、VC含量均起到了一定的维持作用。Y35-1酵母液体菌剂在4℃条件下、活性冻干粉菌剂在-20℃条件下最适宜存放,且海藻糖对Y35-1酵母贮藏期间生活力和生防效力起到了保护作用。研究结果显示Y35-1菌株对采后枇杷胶孢炭疽菌有明显的抑菌作用,液体和固体剂型的生防制剂均对采后枇杷具有抑腐保鲜效果。

弱酸副产物对季也蒙假丝酵母发酵木糖醇的影响研究

研究了甲酸、乙酸、乙酰丙酸作为发酵副产物,对季也蒙假丝酵母发酵木糖醇的影响。分别将每种副产物以不同浓度加入到培养基中进行发酵试验,结果表明:甲酸对发酵木糖醇的抑制作用最为明显,1g·L-1甲酸对发酵就具有较为明显的抑制作用,5g·L-1甲酸几乎完全抑制了发酵;1g·L-1乙酸、乙酰丙酸有利于发酵的进行,当它们的浓度小于2g·L-1时,对发酵没有明显地抑制作用,但当它们的浓度达到8g·L-1时完全抑制了发酵的进行;水解液中的弱酸类副产物共存时,对于发酵木糖醇的抑制影响基本呈现累加效应。

盐胁迫培养下季也蒙毕赤酵母的转录组学差异分析

在本实验室从海南省西沙群岛海沙里分离出1株季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii),并证实该酵母菌株有较好的耐盐性,在12%NaCl胁迫培养条件下仍可生长的基础上,本文通过Illumina HiSeqTM高通量测序技术对经盐胁迫培养与非盐胁迫培养24 h的M. guilliermondii进行转录组测序比较。结果表明:2组样品共有1 027个显著性差异表达基因,其中458个基因表达上调,569个基因表达下调。通过基因本体(gene ontology, GO)功能注释发现,经盐胁迫处理后M. guilliermondii的差异表达基因主要富集在生物过程分类中,其中核苷酸代谢、糖代谢及辅酶代谢基因产生较大差异。对差异基因进行京都基因与基因组百科全书数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)通路富集分析,发现大部分富集通路都与细胞分裂和代谢有关,与GO富集结果相对应。上述结果可以为盐胁迫培养对M. guilliermondii的生长影响及进一步的生物学探究提供科学依据。

利斯的明立体拆分菌株季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)培养条件对手性纯度和转化率的影响

前期研究发现培养条件对利斯的明立体拆分的手性纯度和转化率影响很大,笔者就利斯的明立体拆分菌株季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)HM988686.1的培养基组成(碳源、氮源)和其他工艺条件(培养温度、初始pH、装液量)进行了研究.通过单因素试验和正交试验,确定了该菌株的最适培养条件为蔗糖2%,蛋白胨1%,玉米浆0.5%,pH 8.0,Tris-HCl缓冲体系,培养温度28℃,装液量为100 mL/500 mL三角瓶.在最优的条件下,转化率为42%,产物ee值达95.1%.

季也蒙毕赤酵母菌还原Cr(Ⅵ)的特性研究

从喂食聚乙烯塑料印度谷螟(Plodia interpunctella(Hübener))幼虫的肠道液中分离筛选出1株能还原Cr(Ⅵ)的酵母菌ZJH-1,通过形态特征和分子生物学鉴定该菌株为季也蒙毕赤酵母菌(Pichia guilliermondii)。该菌株对Cr(Ⅵ)的最小抑菌浓度(MIC)为17 mmol/L,在含有50 mg/L Cr(Ⅵ)的条件下,对其他重金属的MIC分别为Cu(Ⅱ)13 mmol/L、Pb(Ⅱ)6 mmol/L、Ag(Ⅰ)4 mmol/L、Mn(Ⅱ)16 mmol/L、Ni(Ⅱ)3 mmol/L、Co(Ⅱ)3 mmol/L、Cd(Ⅱ)0.9 mmol/L和Hg(Ⅱ)0.2 mmol/L。以Cr(Ⅵ)还原率为指标,考察了温度、pH、接种量、供电子体以及不同重金属离子对Cr(Ⅵ)还原率的影响,结果表明:在酵母浸出粉胨葡萄糖液体培养基(YPD)中,菌株ZJH-1还原Cr(Ⅵ)的较优pH和温度分别为9.0和40℃;在最适条件下,接种量为8%时,Cr(Ⅵ)的还原效果最佳;当葡萄糖作为供电子体时,48 h内Cr(Ⅵ)的还原率为100%;菌株在含有不同重金属离子的培养液中,除Cu(Ⅱ)、Pb(Ⅱ)和Co(Ⅱ)外,菌株ZJH-1还原Cr(Ⅵ)的能力和生长能力均受到抑制,抑制顺序为Mn(Ⅱ)>Hg(Ⅱ)>Ag(Ⅰ)>Ni(Ⅱ)>Cd(Ⅱ)。对菌株ZJH-1还原Cr(Ⅵ)能力的初步研究结果表明,菌株ZJH-1在Cr(Ⅵ)污染修复中具有良好的应用潜力。

本土季也蒙毕赤酵母在干红葡萄酒中试生产中的应用潜力

为探究季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)NM218在干红葡萄酒中试酿造中的应用潜力,实验以赤霞珠葡萄为原料,以NM218与商业酿酒酵母(FX10)间隔48 h顺序接种为处理,以单独接种FX10为对照,监控酒精发酵进程及酵母的生长状况,分析酒精发酵结束与陈酿5个月后酒样的理化指标、颜色指标、香气成分,结合感官评价分析NM218与FX10混菌发酵对‘赤霞珠’干红葡萄酒品质的影响。结果表明,在酒精发酵中期前,M.guilliermondii能够保持高于105 CFU/mL细胞活菌数,发酵末期完全消亡;处理组比对照组酒精发酵时间延长2~3 d;所得酒样基本理化指标均符合GB/T 15037—2006《葡萄酒》的要求;与对照酒样相比,处理组酒样在酒精发酵结束与陈酿5个月时总花色苷含量和单体花色苷比例均显著降低(P<0.05),CIELab颜色参数及离子化指数均显著提高(P<0.05);处理组酒样在酒精发酵结束后能够增加丁酸乙酯(97%)、乙酸异戊酯(123%)、己酸乙酯(59%)、辛酸甲酯(43%)、乙酸苯乙酯(61%)、香茅醇(55%)等香气物质的含量,陈酿5个月后能够增加庚酸乙酯(151%)、丁二酸二乙酯(63%)和肉豆蔻酸乙酯(83%)等香气物质含量,且独有香气2种,赋予葡萄酒浓郁的花果类香气;感官评价表明,处理组酒样陈酿5个月后呈紫红色、酒体协调、香气浓郁,综合评分较高。综上,NM218与FX10顺序接种发酵可以增强干红葡萄酒香气品质和感官愉悦感,具备工业化应用的潜力。

海洋季也蒙毕赤酵母ACP基因的克隆及生物信息学分析

酰基载体蛋白是脂肪酸途径中重要的组件,能够结合脂肪酸代谢途径中各种脂肪酰基中间体,在脂肪酸代谢中是不可或缺的辅因子。以本实验室筛选保存的海洋季也蒙毕赤酵母基因组为模板,PCR扩增酰基载体蛋白基因,获得384 bp的目的片段。生物信息学分析显示,其具有完整的开放阅读框,编码127个氨基酸,有磷酸泛酰巯基乙胺结合位点,为非分泌型亲水性蛋白,不存在信号肽,存在9个潜在的磷酸化位点,二级结构和三级结构主要以α螺旋和无规则卷曲为主,与已知的酰基载体蛋白结构有很高的相似性。

季也蒙毕赤酵母MCJ-1培养条件优化及其冻干菌粉的制备

康普茶是一种酸甜味发酵饮料,由酵母、糖和发酵茶制成。该研究以从康普茶混菌体系中筛选获得的季也蒙毕赤酵母(Pichia guilliermondii)MCJ-1为研究对象,采用单因素试验及响应面法优化菌株MCJ-1的培养条件,并制备其冻干菌粉。结果表明,菌株MCJ-1的最佳培养条件为:蔗糖25.00 g/L,氯化铵7.7 g/L,蛋白胨10.00 g/L,酵母浸粉5.00 g/L,培养温度30℃,初始pH值为6,转速200 r/min。在此优化培养条件下,菌体干质量为(5.06±0.22)mg/mL,比优化前提高了64.82%。菌粉制备中菌泥与保护剂的比例为1:1,保护剂甘油添加量为4.0%,可以获得存活率达(80.83±5.36)%的冻干菌粉。