孤儿受体酪氨酸激酶在成年大鼠腰段脊髓和背根节中的分布

目的 观察孤儿受体酪氨酸激酶 (Ret)在成年大鼠腰段脊髓和背根节中的分布 ,探讨胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)对大鼠脊髓和背根节神经元的作用。 方法 采用Ret抗体免疫组织化学ABC法。 结果 Ret免疫反应存在于成年大鼠腰段脊髓神经元和背根节神经元中。

受体酪氨酸激酶样孤儿素受体2在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

目的 探讨受体酪氨酸激酶样孤儿素受体2(receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 2,ROR2)蛋白在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的表达及临床意义。方法 采用免疫组化法、Western blot检测PTC组织和正常甲状腺组织中的ROR2蛋白表达水平,分析不同表达水平的PTC患者临床病理特征的差异,应用Kaplan-Meier法分析ROR2蛋白表达水平与PTC患者术后复发的关系,并采用Cox比例风险回归分析影响PTC患者术后复发的因素。结果 PTC组织中ROR2蛋白阳性表达率为74.46%,显著高于正常甲状腺组织的13.75%(χ^(2)=83.419,P <0.001),其中PTC组织中ROR2蛋白高表达率显著高于正常甲状腺组织。ROR2高表达与PTC患者多发病灶、包膜侵犯、淋巴结转移、远处转移和TNM分期高呈正相关。ROR2蛋白高表达是影响PTC患者术后复发的独立危险因素(HR=2.143,95%CI:1.119~4.597,P <0.001)。ROR2蛋白高表达者无复发生存率显著低于低表达者(χ^(2)=4.073,P=0.044)。结论 ROR2蛋白在PTC组织中的高表达率显著高于正常甲状腺组织,其高表达与疾病进展中的不良事件如多发病灶、包膜侵犯、淋巴结转移、远处转移和TNM分期高呈正相关,且ROR2蛋白高表达是PTC患者术后复发的独立危险因素。

受体酪氨酸激酶样孤儿受体1与肿瘤细胞信号通路关系的研究进展

受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(ROR1)属于受体酪氨酸激酶(RTKs)大家族的一种表面跨膜蛋白,在调控骨骼与神经的发育,细胞迁移与细胞极性中有重要作用。ROR1在正常组织中表达低或不表达,在肿瘤组织中高表达。研究发现ROR1能与配体螯合来调节Wnt等多种细胞信号通路,从而在多种疾病尤其是恶性肿瘤中发挥重要的作用,逐渐成为恶性肿瘤的治疗靶标。本文就ROR1在恶性肿瘤中与细胞信号通路相互作用及靶向ROR1肿瘤免疫治疗的研究进展进行综述,为肿瘤临床治疗策略的制订提供参考。

下调结直肠癌细胞受体酪氨酸激酶样孤儿受体抑制细胞生长并促进其凋亡

目的探讨受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(ROR1)在人结直肠癌中的表达及其生物学功能。方法收集60例结直肠癌及对应癌旁组织,实时定量PCR(qRT-PCR)检测ROR1的mRNA水平,免疫组织化学染色检测ROR1的蛋白水平,并分析ROR1蛋白与肿瘤临床病理资料间的相关性。利用ROR1的siRNA特异性敲低结肠癌SW480细胞中ROR1表达,采用qRT-PCR、Western blot法检测ROR1的敲减效果,MTT法检测下调ROR1后,SW480细胞的增殖,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双染色结合流式细胞术检测下调ROR1后,SW480细胞的凋亡情况。结果 ROR1在结直肠癌组织中表达水平明显高于对应癌旁组织;结直肠癌组织中ROR1高表达与肿瘤体积增大(≥5 cm)、淋巴结转移及高TNM分期(Ⅲ+Ⅳ期)显著相关;ROR1的siRNA可显著降低SW480细胞ROR1 mRNA及蛋白的水平;下调ROR1表达能够抑制SW480细胞的增殖并促进其凋亡。结论 ROR1在结直肠癌组织中表达上调并与结直肠癌恶性临床病理特征有关,下调ROR1能够抑制结肠癌细胞的生长并促进其凋亡。

无翅型MMTV整合位点家族成员5A/受体酪氨酸激酶样孤儿受体2在大鼠牙囊细胞中的表达及其意义

目的：观察在牙齿正常萌出过程中无翅型MMTV整合位点家族成员5A（Wnt5A）/受体酪氨酸激酶样孤儿受体2（Ror2）信号在大鼠体内外牙囊细胞表达的特点，探讨其与成熟破骨细胞形成及牙齿萌出的相关性。方法分离出生后1-13 d的SD大鼠下颌骨，苏木精-伊红染色观察牙囊及牙槽骨生长发育过程，免疫组织化学法观察在下颌第一磨牙萌出过程中Wnt5A和Ror2在牙囊细胞中的表达。体外培养出生后5-6 d的SD大鼠第一磨牙牙囊细胞，免疫组织化学法观察Wnt5A、Ror2在牙囊细胞中的表达。结果SD大鼠出生后第2天牙囊开始分化为牙周组织，1-3 d牙槽骨变化不明显，第4天起，破骨细胞数量明显增多。Wnt5A在出生后第1-3天的大鼠牙囊组织内无明显表达，第4天开始出现阳性表达，并持续表达至第13天。Ror2在出生后第1-3天的大鼠牙囊组织表达呈强阳性，而在第4-13天呈弱阳性。结论 Wnt5A、Ror2在牙萌出过程中有特定的时间分布，提示其可能参与牙齿萌出的调控。

蛋白酪氨酸激酶7和受体酪氨酸激酶样孤儿受体2在hSOD1-G93A突变肌萎缩侧索硬化症转基因小鼠脑干中的表达

目的 探讨脑干中蛋白酪氨酸激酶7(PTK7)和受体酪氨酸激酶样孤儿受体2(ROR2)的表达变化与肌萎缩侧索硬化症(ALS)发病的关系。方法 选取44只人超氧化物歧化酶1(hSOD1)-G93A突变型ALS转基因小鼠,以同等数量的同窝野生型小鼠作为对照,于出生后70 d、95 d、108 d和122 d分离脑干,尼氏染色法观察模型小鼠脑干舌下神经核(12N)及面神经核(7N)神经元形态变化,RT-PCR、Western blotting技术分别检测模型小鼠脑干中PTK7和ROR2 mRNA及蛋白表达变化,免疫荧光双标技术观察12N及7N中PTK7和ROR2的细胞定位及分布特点。结果 尼氏染色结果显示,ALS转基因小鼠脑干12N及7N可见神经元尼氏体明显减少,神经元空泡样变性,胞体萎缩,核体积变小。RT-PCR结果发现,与同窝野生型小鼠相比,ALS转基因小鼠脑干ROR2和PTK7 mRNA在70 d、95 d、108 d和122 d升高。Western blotting结果显示,与同窝野生型小鼠相比,ALS转基因小鼠脑干中PTK7在70 d、95 d、108 d和122 d表达升高,ROR2在70 d、95 d、108 d表达升高,122 d表达降低。免疫荧光结果显示,在ALS转基因小鼠和野生型小鼠脑干12N及7N均可检测到ROR2/神经元核抗原(NeuN)和PTK7/NeuN双阳性细胞,ROR2/胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和PTK7/GFAP双阳性细胞,提示ROR2和PTK7在神经元和星形胶质细胞中共表达。结论 PTK7和ROR2在ALS转基因小鼠脑干中表达异常与ALS发病密切相关。

敲低受体酪氨酸激酶样孤儿受体2(ROR2)抑制卡介苗诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞自噬

目的探讨Wnt5a/受体酪氨酸激酶样孤儿受体2(ROR2)信号通路对卡介苗(BCG)感染引起的巨噬细胞自噬的调控作用。方法采用BCG感染RAW264.7小鼠巨噬细胞0、2、6、12、24 h,Western blot法检测Wnt5a、ROR2及自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)的表达。在敲低ROR2表达和BCG感染分别作用或共同处理RAW264.7细胞后,采用Western blot法检测RAW264.7细胞自噬相关基因5(ATG5)、P62、beclin-1、ATG7、LC3Ⅱ的蛋白表达,采用表达单体红色荧光蛋白-绿色荧光蛋白和LC3的(mRFP-GFP-LC3)自噬双标腺病毒法检测细胞自噬流。结果与未感染对照组相比,BCG感染RAW264.7细胞6 h后,Wnt5a、ROR2、LC3Ⅱ的表达最高。与未感染对照组相比,BCG感染组自噬相关蛋白ATG5、P62、beclin-1、ATG7、LC3Ⅱ的表达上调,自噬体和自噬溶酶体数量增加;与BCG感染组相比,敲低ROR2并经BCG感染后,上述蛋白的表达下调,自噬体和自噬溶酶体数量减少。结论BCG感染小鼠巨噬细胞激活自噬,而敲低ROR2抑制BCG引起的细胞自噬。

受体酪氨酸激酶样孤儿受体1在慢性淋巴细胞白血病中的诊断价值及预后意义

目的探讨受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(ROR1)在慢性淋巴细胞白血病(CLL)中的表达及其在临床诊断中的价值,以及ROR1表达与患者遗传学和分子生物学异常的相关性。方法回顾性收集2020年11月至2021年11月于南京医科大学第一附属医院(江苏省人民医院)收治的初诊B细胞慢性淋巴增殖性疾病(B-CLPD)患者209例,其中典型免疫表型CLL 70例,不典型免疫表型CLL 16例,MCL 14例,其他类型B-CLPD 109例。应用多参数流式细胞术(FCM)检测209例患者肿瘤细胞中ROR1表达水平,采用χ^(2)检验、四格表诊断性试验分析ROR1在CLL中的诊断价值以及与患者遗传学和分子生物学异常的相关性。结果CLL患者中ROR1阳性表达率高于非CLL(78%>11%,P<0.001);典型免疫表型CLL与不典型免疫表型CLL中ROR1阳性表达率差异无统计学意义(81%>63%,P>0.05);不典型免疫表型CLL中ROR1阳性表达率高于MCL(63%>21%,P<0.05)。ROR1^(+)CLL组与ROR1-CLL组染色体核型异常检出率差异有统计学意义,ROR1^(+)CLL组复杂核型的检出率高于ROR1-CLL组(34%>14%,P<0.05)。60岁以上CLL患者ROR1阳性率更高(P<0.05)。结论ROR1可以作为CLL的辅助诊断标记物,尤其对不典型免疫表型CLL、MCL及其他类型B-CLPD的诊断及鉴别诊断有重要价值,ROR1阳性患者年龄偏高,更易检出染色体复杂核型。

Toll样受体7激动剂T7-利尿酸偶合物联合ROR1具有更强的抗乳腺癌作用

目的探讨Toll样受体7激动剂T7-利尿酸偶合物(T7-EA)联合受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(ROR1)抗乳腺癌的作用。方法采用Syfpeithi表位预测软件预测ROR1的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位;ELISA检测4μmol/L T7-EA、4μmol/L ROR1和4μmol/L T7-EA联合4μmol/L ROR1诱导小鼠脾淋巴细胞产生的γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素12(IL-12)和骨髓来源的树突状细胞(DC)产生的肿瘤坏死因子α(TNF-α);BALB/c小鼠皮下接种乳腺癌4T1细胞建立移植瘤模型,腹腔分别注射3 mg/kg T7-EA、15 mg/kg ROR1、3 mg/kg T7-EA联合15 mg/kg ROR1,每周1次,免疫治疗4次后处死小鼠检测肿瘤质量;ELISA检测血清中针对4T1细胞肿瘤蛋白的Ig G水平;乳酸脱氢酶(LDH)法测定特异性CTL活性。结果在预测的多条ROR1 CTL表位肽中选取序列PYCDETSSV作为疫苗多肽;体外实验显示T7-EA活化淋巴细胞呈现剂量依赖性,与ROR1相关多肽混合后不改变其活性;T7-EA与ROR1合用诱导小鼠脾淋巴细胞产生IFN-γ和IL-12,刺激DC产生TNF-α;体内实验显示T7-EA联合ROR1抑制肿瘤生长效果显著强于单用T7-EA组和ROR1组,T7-EA联合ROR1诱导的针对4T1细胞肿瘤蛋白的血清Ig G水平显著高于T7-EA和ROR1单独给药组,T7-EA联合ROR1诱发的T细胞杀伤作用显著强于T7-EA和ROR1单独处理组。结论 T7-EA和ROR1联合应用具有更强的抗乳腺癌效果。

棕榈酸通过上调受体Frizzled-2及Ror-2表达抑制胰岛β细胞系INS-1增殖

目的:探讨棕榈酸抑制大鼠胰岛β细胞系INS-1增殖的机制。方法:使用棕榈酸刺激INS-1细胞进行时间及浓度梯度实验,采用RT-qPCR法和Western blot法检测细胞中受体Frizzled-2(Fzd-2)及受体酪氨酸激酶样孤儿受体2(Ror-2)表达的变化。运用免疫共沉淀技术检测棕榈酸刺激后细胞中Fzd-2、Ror-2与Wnt5a结合的变化情况。在INS-1细胞中转染siRNA干扰Fzd-2或Ror-2的表达,通过Ed U标记法检测棕榈酸对细胞增殖率的影响。结果:棕榈酸刺激可显著上调INS-1细胞中Fzd-2和Ror-2的mRNA及蛋白表达(P <0. 05),促进Wnt5a募集受体Fzd-2和Ror-2(P <0. 05);沉默Fzd-2或Ror-2表达减弱棕榈酸对INS-1细胞增殖的抑制效应。结论:棕榈酸可通过上调受体Fzd-2和Ror-2表达,促进Wnt5a募集上述受体从而抑制INS-1细胞增殖。

受体酪氨酸激酶样孤儿受体在肿瘤免疫治疗中的研究进展

受体酪氨酸激酶样孤儿受体是一类高表达于多种肿瘤细胞的膜受体蛋白,可促进肿瘤的增殖、生长与转移。由于受体酪氨酸激酶样孤儿受体在肿瘤的发生、发展中发挥着重要的作用,其有望成为肿瘤免疫治疗的靶点。本文重点就受体酪氨酸激酶样孤儿受体家族的蛋白结构、体内功能,以及靶向该蛋白的肿瘤免疫疗法等最新研究进展进行了综述。

下调受体酪氨酸激酶样孤儿受体1表达对黑色素瘤B16F10生物学特性的影响

目的探讨下调黑色素瘤(melanoma)B16F10细胞中受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(receptor tyrosine kinase like orphan receptor 1,ROR1)分子表达对其生物学特性的影响,为治疗黑色素瘤筛选候选靶标奠定基础。方法①以慢病毒载体介导shRNA下调B16F10细胞中ROR1的表达,并检测其下调效果;②CCK8法检测B16F10,Scrambled和Lv-shROR1-B16F10等3组细胞的增殖能力,再通过划痕实验和Transwell实验检测3组细胞的迁移能力,最后用流式细胞仪检测3组细胞的细胞周期;③将3组细胞接种到小鼠体内,观察小鼠的致瘤能力,并检测其致瘤效果。结果①经慢病毒感染后得到Lv-shROR1-B16F10和Scrambled两株细胞;②下调ROR1能够抑制细胞的增殖能力和细胞的迁移能力(P<0.05),使细胞停滞在G0~G1(P<0.05);③下调ROR1能抑制B16F10细胞的致瘤能力,瘤组织中ROR1的表达水平也降低(P<0.05)。结论ROR1可参与黑色素瘤细胞的增殖、转移以及细胞的致瘤性,是一个有效治疗黑色素瘤的候选靶标。

子宫内膜样腺癌组织中ROR1、ROR2表达变化与上皮间质转化及患者预后的关系

目的探讨子宫内膜样腺癌(EA)组织中酪氨酸激酶样孤儿受体(ROR)1、ROR2表达变化与上皮间质转化及患者预后的关系。方法选取162例接受子宫内膜癌根治术治疗的EA患者,收集手术切除的癌组织和癌旁组织,采用免疫组织化学法检测ROR1、ROR2及EMT相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)。比较不同临床病理特征EA患者癌组织ROR1、ROR2阳性率,Spearman相关性分析癌组织中ROR1、ROR2表达与E-cadherin、Vimentin表达的相关性,Kaplan-Meier生存曲线分析ROR1、ROR2表达与EA患者5年总体生存率(OS)的关系,COX比例风险回归模型分析EA患者预后的影响因素。结果与癌旁组织相比,癌组织中ROR1、Vimentin阳性率较高,ROR2、E-cadherin阳性率较低(P均<0.05)。与FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期、高中分化、无淋巴结转移患者比较,FIGO分期Ⅲ期、低分化、淋巴结转移患者癌组织ROR1阳性率升高,ROR2阳性率降低(P均<0.05)。ROR1阳性与阴性患者5年OS分别为72.13%(88/122)、90.00%(36/40)。癌组织ROR1与E-cadherin呈负相关,与Vimentin呈正相关(P均<0.05),ROR2与E-cadherin呈正相关,与Vimentin呈负相关(P均<0.05)。ROR1阳性患者5年OS低于阴性患者,ROR2阳性患者5年OS高于ROR2阴性患者(P均<0.05)。FIGO分期Ⅲ期、淋巴结转移、ROR1阳性是影响EA预后的独立危险因素,ROR2阳性则是保护因素(P均<0.05)。结论EA组织中ROR1表达升高、ROR2表达降低,二者可能通过促进EMT导致患者不良预后。

迎接以TRK抑制剂为代表的儿童泛肿瘤靶向药物时代的到来

随着精准医学的发展,针对儿童晚期恶性实体瘤的免疫治疗和分子靶向药物治疗已开始应用于临床。以原肌球蛋白受体激酶(tropomyosin-receptor kinase,TRK)抑制剂拉罗替尼和恩曲替尼为代表的靶向治疗药物对各类神经营养因子受体酪氨酸激酶(neurotrophin tyrosine receptor kinase,NTRK)基因融合阳性表达的儿童晚期恶性实体瘤具有较高的有效性和安全性,标志着"儿童泛肿瘤靶向药物时代"的到来。本文旨在介绍此类药物的作用机制及其临床应用研究进展。

ROR1 CAR-T疗法在肿瘤免疫治疗中的研究进展

免疫疗法在肿瘤治疗学领域的发展突飞猛进,已成为多种恶性肿瘤的潜在治疗方法。其中,过继性细胞疗法是肿瘤免疫疗法中研究的热点,尤其是嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor engineered Tcells,CAR-T)疗法。受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(recombinant receptor tyrosine kinase like orphan receptor1,ROR1)重组蛋白是一类高表达于多种肿瘤细胞的膜受体蛋白,与肿瘤的发生、发展密切相关,是肿瘤免疫疗法的理想靶标。目前,靶向ROR1的CAR-T疗法日益兴起,已广泛应用于白血病、三阴性乳腺癌、肉瘤、卵巢癌、肺癌等多种肿瘤的免疫治疗。现拟通过对ROR1 CAR-T疗法在多种肿瘤中的研究进展进行综述,以期更全面地评估ROR1CAR-T疗法的实际疗效,同时为ROR1CAR-T的改善设计提供参考依据,以期进一步推动ROR1CAR-T疗法的临床应用。

ROR1激活AKT/FOXO1信号介导非小细胞肺癌吉非替尼耐药

EGFR-TKI靶向治疗在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)综合治疗中显示出重要作用;然而,耐药性却极大限制其临床治疗效果。受体酪氨酸激酶样孤儿受体(receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 1,ROR1)是Ⅰ型受体酪氨酸激酶家族中的成员,在肿瘤发生发展中发挥重要作用。本研究拟探讨ROR1介导非小细胞肺癌吉非替尼耐药的作用及机制。采用吉非替尼反复诱导非小细胞肺癌HCC827细胞,建立吉非替尼耐药细胞株HCC827/GR。应用荧光定量PCR和Western印迹检测HCC827/GR内ROR1的表达。采用shRNA的方法体外检测ROR1敲除前后HCC827/GR对吉非替尼耐药的变化,采用体外检测ROR1过表达前后HCC827对吉非替尼耐药的变化。体内检测ROR1敲除前后HCC827/GR对吉非替尼耐药的变化。Western印迹检测HCC827/GR内ROR1下游信号分子的活化。实时荧光定量PCR及Western印迹结果显示,HCC827/GR耐药细胞中的ROR1 mRNA和蛋白质表达水平显著高于HCC827敏感细胞。体外干扰ROR1表达,可明显增强HCC827/GR耐药细胞对吉非替尼的敏感性(IC_(50) 15.3±3.69 vs.4.2±1.38),增加吉非替尼诱导的细胞凋亡(20.5±2.52 vs.41.8±3.74)。体外过表达ROR1显著增强HCC827敏感细胞对吉非替尼的耐药性(IC_(50) 0.8±0.52 vs.2.2±0.87)。体内裸鼠移植瘤实验同样发现,干扰ROR1能增强HCC827/GR移植瘤对吉非替尼的敏感性。进一步研究发现,AKT/FOXO1信号在HCC827/GR耐药细胞中异常活化,而干扰ROR1能够抑制AKT的磷酸化,并上调FOXO1的表达。上述结果表明,ROR1参与非小细胞肺癌吉非替尼耐药,抑制ROR1能够逆转吉非替尼耐药,其机制与ROR1调控AKT/FOXO1信号有关。

ROR1在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其与临床预后的关系

目的:分析受体酪氨酸激酶样孤儿受体-1(the receptor tyrosine kinase-like orphan receptors-1, ROR1)在卵巢上皮性肿瘤中的表达,并探讨其表达对卵巢癌患者临床预后的意义。方法:选取南京医科大学附属妇产医院2013年1月—2018年12月行根治性手术的卵巢癌患者的组织标本55例,并随机选取同期卵巢交界性肿瘤和良性肿瘤各30例,以及非卵巢病变进行切除的正常卵巢15例为对照组,免疫组织化学检测各组ROR1的表达情况。除6例外,所有卵巢癌患者均随访,末次随访时间为2019年3月30日,分析ROR1与上皮性卵巢癌各项临床病理参数的相关性,生存分析采用KaplanMeier法。结果:ROR1在卵巢癌中的表达高于正常卵巢组织及卵巢交界性和良性肿瘤,卵巢癌的ROR1表达在不同肿瘤的FIGO分期及有无淋巴结转移间差异有统计学意义(P<0.05),而与患者年龄、组织学分型及分化程度之间无明显相关性,Kaplan-Meier生存分析显示卵巢癌ROR1阳性表达组与阴性表达组生存时间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:卵巢癌组织中ROR1蛋白表达升高,可能作为评估患者预后的潜在指标,对卵巢癌的诊治提供一定的理论依据。

人参皂苷Rb1对人乳腺癌MDA-MB-231细胞上皮-间质转化及ROR1表达的影响

目的探讨人参皂苷Rb1通过干扰人乳腺癌MDA-MB-231细胞上皮-间质转化(EMT)和Ⅰ型受体酪氨酸激酶样孤儿受体(ROR1)的表达来影响乳腺癌的发生和发展的可行性。方法细胞培养人乳腺癌MDA-MB-231细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞生存率,并根据人参皂苷Rb1的质量浓度分为空白对照组,高、中、低剂量组(240,120,60μg/m L),阳性对照组(阿霉素,75 nmol/L)。采用细胞划痕法检测细胞的迁移能力,采用实时定量PCR检测细胞ROR1 mRNA的表达水平,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞ROR1蛋白的表达水平。结果与空白对照组比较,随着人参皂苷Rb1质量浓度的增加,细胞的迁移能力显著降低,人参皂苷Rb1各剂量组具有明显的量-效关系(P<0.05),高剂量组与阳性对照组结果基本一致(P>0.05);与空白对照组比较,随着人参皂苷质量浓度的增加,细胞生存率逐渐降低(P<0.05),且高剂量组与阳性对照组结果一致(P>0.05);与空白对照组比较,人参皂苷Rb1各剂量组和阳性对照组ROR1 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),随着质量浓度的增加,表达量逐渐降低,量-效关系明显(P<0.05),人参皂苷Rb1高剂量组与阳性对照组结果一致(P>0.05)。结论人参皂苷Rb1可能通过抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞上皮-间质转化和ROR1表达来减缓乳腺癌的发生、发展。

ROR蛋白在癌症中的研究进展

ROR蛋白家族包含受体酪氨酸激酶ROR1和ROR2,作为Wnt受体,它们对于非经典Wnt信号通路至关重要,并与癌细胞增殖存活、侵袭转移和治疗抵抗密切相关。ROR蛋白在大多数成人健康组织中几乎不表达,但在一些癌症中却有较高的表达水平。有趣的是,两种ROR蛋白可能在肿瘤中发挥不同的作用,ROR1主要促进肿瘤发生,而ROR2在不同类型的肿瘤中促进或抑制肿瘤进展。目前这两种受体作为潜在的治疗靶点已经引起了人们的兴趣,该文总结了ROR蛋白的结构学特征及其在不同组织中的表达情况。此外,该文还回顾了ROR蛋白调控的生物学过程和信号通路,解释了其在癌症中发挥的重要作用。最后汇总了目前处于临床试验阶段的靶向ROR蛋白的生物药包括单抗、双抗、抗体偶联药物等。

下调ROR1表达削弱黑色素瘤疫苗抗瘤效应

黑色素瘤细胞高表达受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(receptor tyrosine kinase like orphan receptor 1, ROR1),其可促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移,是治疗黑色素瘤的重要靶标。为探讨下调黑色素瘤细胞ROR1表达对制备的黑色素瘤疫苗抗瘤效应的影响,通过慢病毒载体shRNA下调B16F10细胞ROR1分子表达。反复冻融各实验组B16F10细胞制备疫苗,免疫C57BL/6小鼠3次后,用B16F10细胞攻击小鼠,以评价免疫鼠的免疫系统活性和抗肿瘤效应。结果显示,与对照组相比,shROR1/B16F10细胞ROR1分子表达水平显著降低(P<0.01),用其制备疫苗免疫小鼠会抑制免疫系统对肿瘤细胞的攻击及机体抗瘤效应。由此,ROR1是黑色素瘤疫苗的重要靶点,下调ROR1表达将导致黑色素瘤疫苗免疫活性减弱而影响免疫鼠抗黑色素瘤效应。