孤儿核受体Nur77/NR4A1调节巨噬细胞炎症反应研究进展

巨噬细胞作为抵御病原体入侵的第一道防线,在固有免疫和适应性免疫中均发挥不可或缺的作用。孤儿核受体是一类目前尚未发现天然配体的核受体,Nur77/NR4A1是其NR4A亚家族中的成员之一,广泛表达于各组织、器官,通过转录及非转录调节作用,参与细胞炎症反应、增殖、分化、凋亡、自噬、代谢等过程。近期研究发现,Nur77/NR4A1参与巨噬细胞多种功能的调控。对Nur77/NR4A1在巨噬细胞炎症反应中的作用及机制进行综述,有助于更好地了解巨噬细胞相关炎症性疾病的分子机制。

孤儿核受体NR4A1在2型糖尿病患者外周血单个核细胞的表达及意义

目的探讨孤儿核受体NR4A1在2型糖尿病(T2DM)患者外周血单个核细胞(PBMCs)的表达及意义。方法选取就诊的34例健康受试者和30例初诊T2DM患者,进行体格检查,包括身高、体重、血压,计算体质指数(BMI);实验室检查:空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(Fins)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、超敏C反应蛋白(hs-CRP),计算HOMA-IR。采集外周血2~3 m L,收集血浆,用于检测游离脂肪酸(FFAs)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6),并采用密度梯度离心法获取PBMCs,real-time PCR检测NR4A1 mRNA在健康人群和初诊T2DM患者PBMCs中分布情况,并对NR4A1 mRNA相对表达水平和HOMA-IR、FFAs、TNF-α、IL-6进行相关性分析。结果两组人群在年龄、性别、身高、血压、血丙氨酸氨基转移酶、血尿素氮、血肌酐方面,差异无统计学意义(P>0.05);与健康受试者比较,初诊T2DM患者的PBMCs的NR4A1 mRNA相对表达水平增高,此外T2DM患者的BMI、FBG、Fins、HOMAIR、TG、TC、LDL-C、hs-CRP、FFAs、TNF-α和IL-6水平亦明显增高,血HDL-C水平则降低;T2DM患者的外周血白细胞计数及其分类计数与健康受试者差异无统计学意义(P>0.05);Pearson's相关分析显示,NR4A1 mRNA相对表达水平与HOMA-IR(r=0.761,P<0.01)、FFAs(r=0.560,P<0.01)、TNF-α(r=0.697,P<0.01)和IL-6(r=0.796,P<0.01)均呈正相关。同时,评价胰岛素抵抗程度的HOMA-IR也与FFAs(r=0.513,P<0.01)、TNF-α(r=0.728,P<0.01)和IL-6(r=0.590,P<0.01)呈正相关。此外,显著正相关也存在于FFAs和TNF-α(r=0.475,P<0.01)、IL-6(r=0.402,P<0.01)之间。结论 NR4A1在初诊T2DM患者PBMCs中表达增高,且与HOMA-IR、FFAs、TNF-α、和IL-6均呈正相关关系。

NR4A孤儿核受体亚家族在代谢综合征中的作用

核受体家族是一组能在生物体内调控发育、代谢、炎症、免疫等多种生物作用的转录因子,而孤儿核受体则是指一群非配体依赖或未知配体的核受体,其中包括NR4A孤儿核受体亚家族。NR4A孤儿核受体亚家族由高度同源的3种受体:Nur77(NR4A1)、Nurr1(NR4A2)和NOR1(NR4A3)组成,他们可被环境中的刺激信号快速诱导,作为非配体依赖的转录因子和早期反应基因行使功能。最近的研究表明,NR4A受体亚家族成员在代谢综合征的各个组分,包括糖代谢异常、脂代谢异常、胰岛素抵抗等方面发挥重要作用。

孤儿核受体NR4A1与动脉粥样硬化的研究进展

孤儿核受体NR4A1是尚未发现特异性配体的转录因子之一,属于NR4A亚家族。早期研究发现,NR4A1可通过改变基因表达、翻译后修饰以及辅调蛋白间相互作用,调控细胞的增殖、凋亡、分化和应激反应。近年来研究发现其在动脉粥样硬化损伤部位表达异常,被认为是血管细胞功能紊乱过程中的关键调节基因。通过调控NR4A1基因的表达,可对平滑肌细胞的增殖和内皮细胞的激活产生重要影响,同时能够减少炎症反应、减少泡沫细胞的形成以及脂质沉积,抑制血管重塑,预防和阻止动脉粥样硬化的发生与发展。这些研究显示NR4A1可能成为研发预防和治疗动脉粥样硬化药物的新靶点。

乳化异氟醚对低氧性肺动脉内皮细胞损伤及NR4A1表达的影响

目的:探讨乳化异氟醚(EI)对低氧性肺动脉内皮细胞(HPAECs)损伤及孤儿核受体亚家族4A1(NR4A1)表达的影响。方法:将HPAECs分为正常对照组、模型组和实验组;正常对照组置于常氧下培养,模型组和实验组细胞置于氧浓度约为3%的低氧箱(95%N2+5%CO2)中处理2 h。实验组加入终浓度为1 mmol/L EI,正常对照组和模型组加入30%Intralipid■;于干预0、1、2、4、8、12 h后MTT法检测细胞增殖情况,Hoechst 33258核染色法检测细胞凋亡,Griess法检测细胞上清NO生成量,蛋白免疫印迹法(WB)及实时荧光定量PCR(q-RT-PCR)检测细胞中NR4A1蛋白及mRNA表达量。结果:干预0~12 h,模型组和实验组细胞活力呈逐渐降低趋势,但干预后2~12 h实验组细胞活力均高于模型组(P<0.05);干预0~12 h,模型组和实验组细胞凋亡率呈逐渐升高趋势,但干预后2~12 h实验组细胞凋亡率均低于模型组(P<0.05);干预0~12 h,模型组和实验组细胞上清中NO浓度呈逐渐降低趋势,但干预后2~12 h实验组细胞NO均高于模型组(P<0.05);干预0~12 h,模型组和实验组细胞NR4A1蛋白及mRNA相对表达量呈逐渐升高趋势,但干预后2~12 h实验组细胞NR4A1 mRNA相对表达量均低于模型组(P<0.05)。结论:EI可促进低氧性HPAECs增殖,抑制凋亡,并增加NO的生成,NR4A1可能参与了低氧后内皮细胞损伤的内源性保护机制。

miR-7977、NR4A1在狼疮性肾炎肾组织中的表达及意义

目的探究miR-7977、核受体亚家族4A组成员1(NR4A1)在狼疮性肾炎(LN)肾组织中的表达及临床意义。方法选取2016年3月—2019年4月收治的126例系统性红斑狼疮为研究对象,根据肾组织病理检查分为LN组58例与非LN组68例。比较两组肾组织miR-7977表达量及NR4A1表达评分差异,应用受试者工作特征(ROC)曲线评估二者对LN的诊断价值;比较不同病理分型LN患者肾组织miR-7977表达量、NR4A1表达评分,并采用Spearman秩相关分析二者与病理分型的相关性。结果LN组肾小管萎缩、间质纤维化发生率均高于非LN组(P<0.01);LN组肾组织miR-7977表达量、NR4A1表达评分均高于非LN组(P<0.01)。肾组织miR-7977表达量、NR4A1表达评分对LN均有较高诊断价值(曲线下面积分别为0.888、0.897)。不同病理分型LN患者肾组织miR-7977表达量、NR4A1表达评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。肾组织miR-7977表达量和NR4A1表达评分与LN患者病理分型无明显相关性(P>0.05)。结论肾组织miR-7977表达量、NR4A1表达评分能辅助诊断LN,在LN诊疗中具有重要作用。

孤儿核受体NR4A1表达对氧-葡萄糖剥夺诱导培养大鼠小脑颗粒神经元凋亡的影响

目的探讨孤儿核受体NR4A1表达对氧一葡萄糖剥夺（oxygen．glucose deprivation，OGD）诱导培养大鼠小脑颗粒神经元凋亡的影响及其可能机制。方法大鼠小脑颗粒细胞原代培养7～8d后给予OGD处理。应用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞活性，流式细胞术检测细胞凋亡率，蛋白质印迹法检测NR4A1、胱天蛋白酶-3和细胞色素c蛋白表达，实时定量聚合酶链反应检测NR4A1 mRNA表达。用编码NR4A1的慢病毒载体转染大鼠小脑颗粒神经元，并检测转染大鼠小脑颗粒神经元OGD后凋亡率以及细胞色素c和胱天蛋白酶-3表达。结果随着OGD时间的延长，培养大鼠小脑颗粒神经元活性显著性降低，凋亡率显著性增高，NR4A1mRNA和蛋白以及胱天蛋白酶-3和细胞色素c蛋白表达均显著性上调。转染NR4A1的大鼠小脑颗粒神经元过表达NR4A1，OGD后凋亡率显著性降低，胱天蛋白酶-3和细胞色素C蛋白表达显著性下调。结论NR4A1过表达能通过下调胱天蛋白酶-3和细胞色素c表达减少OGD诱导的大鼠小脑颗粒神经元凋亡。

NR4A1通过上调NRF2表达抑制顺铂诱导的近端肾小管上皮细胞铁死亡

目的探究核受体亚家族4 A组成员1(nuclear receptor subfamily 4 group A member 1,NR4A1)在缓解顺铂对近端肾小管上皮细胞毒性的作用及其分子机制。方法通过"Tabula-muris"单细胞转录组测序数据库分析肾脏组织各细胞亚群NR4A1基因的表达。在近端肾小管上皮细胞HK-2细胞系及原代细胞中,通过慢病毒感染以过表达NR4A1基因。采用细胞增殖与毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测顺铂的细胞毒性。细胞用碘化丙啶(propidium iodide,PI)单染后通过流式细胞仪检测细胞的死亡比例。通过实时荧光定量PCR和Western印迹法检测细胞中NR4A1和核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,NRF2)基因的表达。通过检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)以及脂质活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量分析细胞铁死亡程度。结果单细胞转录组数据分析的结果表明NR4A1基因表达在肾脏组织的近端肾小管上皮细胞亚群中最低。50μmol/L和100μmol/L顺铂能够显著诱导近端肾小管上皮细胞MDA、GSSG和脂质ROS含量的上升(均P<0.01),且顺铂浓度越高诱导MDA、GSSG和脂质ROS增加越多。相比对照HK-2细胞,过表达NR4A1的HK-2细胞脂质ROS含量及铁离子含量显著较低(均P<0.01),过表达NR4A1抑制了顺铂对近端肾小管上皮细胞的毒性及其诱导的铁死亡。分子机制研究发现,在近端肾小管上皮细胞中,过表达NR4A1上调了抗铁死亡基因NRF2的表达(P<0.01)。进一步单细胞转录组数据分析的结果表明,与NR4A1在肾脏组织细胞亚群的表达状态相似,NRF2表达在近端肾小管上皮细胞中也最低。结论顺铂能够诱导近端肾小管上皮细胞发生铁死亡,且浓度越高越明显。NR4A1通过上调近端肾小管上皮细胞NRF2的表达抑制顺铂诱导的细胞铁死亡,从而缓解顺铂对细胞的毒性。

NR4A1及其翻译后修饰在炎症性相关肺实质疾病中调控作用的研究进展

核受体亚家族4A组成员1(nuclear receptor subfamily 4 group A member 1,NR4A1)是由多种应激源诱导的早期转录因子,参与细胞生理活动与病理进程,尤其是在炎症相关的肺部疾病中发挥关键的调节作用,且其活性表达受转录后修饰的调节。文章探讨了NR4A1在哮喘、急性肺损伤(acute lung injury,ALI)、肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)和慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary diseases,COPD)中的调控作用,并对其小泛素相关修饰物(small ubiquitin‑like modifier,SUMO)修饰、磷酸化、乙酰化转录后修饰调节机制进行综述,为进一步明确NR4A1在肺实质性疾病中转录后修饰的调控机制及寻找临床肺实质相关疾病的防治靶点提供理论依据。

孤儿核受体Nur77在衣霉素诱导小鼠海马神经元损伤中的作用:与内质网应激的关系

目的评价孤儿核受体Nur77在衣霉素(TM)诱导小鼠海马神经元损伤中的作用及其与内质网应激的关系。方法小鼠HT22细胞,采用随机数字表法分为4组(n=10):对照组(C组)、Nur77特异性激动剂Csn-B组(Csn-B组)、内质网应激诱导剂TM组(TM组)和TM+Csn-B组。C组细胞正常培养24 h;Csn-B组培养基中加入Csn-B(终浓度为10μg/ml)培养细胞24 h;TM组培养基中加入TM(终浓度为200 ng/ml)培养24 h诱导细胞内质网应激损伤;TM+Csn-B组培养基中加入Csn-B(终浓度为10μg/ml)预处理细胞15 min后,给予TM(终浓度为200 ng/ml)共同培养24 h。各组细胞处理结束后采用CCK-8试剂盒检测细胞活力,Western blot法检测内质网应激相关蛋白CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3和活化的caspase-3(cleaved-caspase-3)的表达。结果与C组比较,TM组细胞活力下降,CHOP、GRP78、Bax和cleaved-caspase-3表达上调,Bcl-2和caspase-3表达下调(P<0.05或0.01);与TM组比较,TM+Csn-B组细胞活力升高,CHOP、GRP78、Bax和cleaved-caspase-3表达下调,Bcl-2和caspase-3表达上调(P<0.05或0.01)。结论孤儿核受体Nur77参与了TM诱导小鼠海马神经元损伤的过程,与激活内质网应激有关。