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隆线溞孤雌溞生殖系统的组织学 被引量:7
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作者 张明凤 赵云龙 +1 位作者 杨志彪 曾错 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期68-72,共5页
隆线孤雌的生殖系统由一对卵巢、一对输卵管和一对雌性生殖孔组成。卵巢长管状 ,管壁由结缔组织膜和单层上皮细胞构成 ,末端渐细为一短小的输卵管 ,输卵管末端为雌性生殖孔。卵子的发生是由生发区细胞向卵巢内增殖分化 ,不同成熟度... 隆线孤雌的生殖系统由一对卵巢、一对输卵管和一对雌性生殖孔组成。卵巢长管状 ,管壁由结缔组织膜和单层上皮细胞构成 ,末端渐细为一短小的输卵管 ,输卵管末端为雌性生殖孔。卵子的发生是由生发区细胞向卵巢内增殖分化 ,不同成熟度的生殖细胞在管腔内排列成生殖带。根据卵母细胞细胞核的大小及卵黄的累积情况等 ,将卵子的发生划分为三个时期 :卵原细胞、卵母细胞和成熟卵子 ,其中卵母细胞的发生又可细分为三个时期 :前期、中期和后期。后期的卵母细胞含较多的卵黄颗粒 ,最后成为成熟卵子 ,排入孵育囊内形成夏卵。隆线孤雌的卵巢发育要经历五个幼龄期 ,不同的龄期 ,卵巢的形态结构不同。至第五幼龄 ,卵巢已基本发育成熟 。 展开更多
关键词 隆线溞 孤雌溞 性生殖系统 组织学
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多刺裸溞腹孤雌溞的卵子发生 被引量:2
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作者 曾错 赵云龙 +3 位作者 张明凤 王群 安传光 段晓伟 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期547-554,共8页
采用光镜和透射电镜技术观察多刺裸腹(Moina macrocopa)孤雌卵子的发生过程。根据卵母细胞细胞核的形态、卵黄的合成、积累情况及核物质的形态变化等观察结果,将卵子发生分为3个时期:卵原细胞期、卵母细胞期和成熟卵母细胞期。卵原... 采用光镜和透射电镜技术观察多刺裸腹(Moina macrocopa)孤雌卵子的发生过程。根据卵母细胞细胞核的形态、卵黄的合成、积累情况及核物质的形态变化等观察结果,将卵子发生分为3个时期:卵原细胞期、卵母细胞期和成熟卵母细胞期。卵原细胞核大,胞质层薄,有少量线粒体分布,核物质浓缩为一团;卵母细胞发育的早期和中期细胞体积增大,细胞质层增厚,线粒体迅速增多,细胞核变圆,核物质分散成多块;后期卵母细胞胞质中开始出现大量卵黄颗粒和少量脂滴,细胞核边缘波浪化,线粒体空泡化,其中卵黄合成初期,核物质重新聚集在细胞核中央,在卵黄合成中期又分散开来;成熟卵母细胞质中充满卵黄颗粒,呈强嗜酸性,细胞核的形态呈不规则状,核物质分散。多刺裸腹生殖腺的外部形态随着生殖周期的变化而不同。在孤雌的整个生活史中生殖腺内卵子的发育经历了“同步-不同步-局部同步”的发育模式。发现1龄幼生殖腺中不存在卵原细胞,成龄的生殖腺有多个发育时期的生殖细胞并存。同时在亚显微水平上发现卵黄主要由线粒体演变而来,也通过吞饮作用吸收成熟的卵黄颗粒,内源与外源性共同作用形成卵黄。[中国水产科学,2006,13(4):547-554] 展开更多
关键词 多刺裸腹溞 孤雌溞 卵子发生
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隆线溞孤雌溞和两性雌溞的蛋白质差异表达(英文) 被引量:1
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作者 张明凤 赵云龙 曾错 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第5期916-923,共8页
本实验提取隆线溞孤雌溞和两性雌溞的可溶性蛋白进行双向电泳和质谱鉴定,分析隆线溞在两种生殖状态下蛋白质组的差异变化。聚丙烯酰胺凝胶SDS-PAGE结果表明:隆线溞在两种生殖状态下存在明显的蛋白质表达差异,孤雌溞的蛋白条带在分子量约... 本实验提取隆线溞孤雌溞和两性雌溞的可溶性蛋白进行双向电泳和质谱鉴定,分析隆线溞在两种生殖状态下蛋白质组的差异变化。聚丙烯酰胺凝胶SDS-PAGE结果表明:隆线溞在两种生殖状态下存在明显的蛋白质表达差异,孤雌溞的蛋白条带在分子量约50.6kD、36.2kD、32.1kD和25.7kD处表达量较两性雌溞明显;两性雌的蛋白条带在分子量约87.8kD、67.2kD、53.6kD和35.5kD处表达量较孤雌溞明显,其中35.5kD的蛋白条带为两性雌所特有。同时取两个样品的可溶性蛋白进行双向电泳,每个样品重复四次。双向电泳图谱经银染后利用软件分析可知,隆线孤雌平均可检测到约750个蛋白质点,两性雌溞平均可检测到约720个蛋白质点。同时利用软件对凝胶上的蛋白质点进行半定量分析,发现隆线溞从孤雌生殖转化为两性生殖后有18个蛋白质点呈现显著变化,其中14个点表达量明显下降,4个点表达量显著升高。实验结果具有较好的重复性。取4个表达量显著上升的蛋白质点进行质谱分析,得到两个蛋白质点(16号和17号)的测定结果。其中16号点为一类酸性脱氢酶(2I234),它在动物生长发育的各个阶段大量表达,这类蛋白质在隆线溞生殖转化过程中表达量变化尤为显著。本研究结果表明:隆线溞在孤雌生殖和两性生殖状态下存在明显的蛋白质表达差异。 展开更多
关键词 隆线溞 孤雌溞 两性雌溞 蛋白质组学 双向电泳 质谱分析
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印记基因在孤雌生殖方面的研究进展
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作者 彭晟坤 张子敬 +9 位作者 张格阳 张志浩 闵佳 李欣淼 王香南 施巧婷 祁兴山 黄永震 李惠侠 王二耀 《中国畜禽种业》 2024年第1期36-41,共6页
孤雌生殖是一种独特的生殖方式,指的是卵母细胞在不经过受精的情况下,可以自发或通过物理、化学刺激发育为正常个体,而无需精子参与。在低等动物中,孤雌生殖可以仅由雌性个体完成,从而实现从单个雌性个体产生后代。然而在哺乳动物中,能... 孤雌生殖是一种独特的生殖方式,指的是卵母细胞在不经过受精的情况下,可以自发或通过物理、化学刺激发育为正常个体,而无需精子参与。在低等动物中,孤雌生殖可以仅由雌性个体完成,从而实现从单个雌性个体产生后代。然而在哺乳动物中,能够通过孤雌生殖发育为正常个体的实例极为罕见。该文介绍了孤雌激活的方式,孤雌胚胎获取方式和印记基因在孤雌生殖中的应用,以期为未来孤雌生殖的相关应用提供思路。 展开更多
关键词 生殖 印记基因 激活 胚胎
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孤雌卤虫雌激素相关受体基因(ERR)的表达特性分析
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作者 刘雪 韩学凯 +1 位作者 欧阳雪梅 隋丽英 《天津科技大学学报》 CAS 2024年第2期34-41,共8页
雌激素通过其相关受体进而影响动物的生殖发育与成熟。为了探究雌激素相关受体基因ERR在孤雌卤虫卵巢发育和成熟过程中发挥的作用,本研究对孤雌卤虫(Artemia parthenogenetica)的ERR基因进行了克隆及相关生物信息学分析,并对该基因在不... 雌激素通过其相关受体进而影响动物的生殖发育与成熟。为了探究雌激素相关受体基因ERR在孤雌卤虫卵巢发育和成熟过程中发挥的作用,本研究对孤雌卤虫(Artemia parthenogenetica)的ERR基因进行了克隆及相关生物信息学分析,并对该基因在不同组织(卵巢、头部、躯干)和卵巢在不同发育时期〔卵黄发生早期(early oocytes,EO)、卵黄发生晚期(late oocytes,LO)、早期胚胎(early embryos,EE)、晚期胚胎(later embryos,LE)〕的表达特征进行了探究。结果显示,ERR基因的开放阅读框(ORF)长1536 bp,共编码521个氨基酸,编码蛋白质的相对分子质量和等电点分别为5.7114×10^(4)和5.06,该蛋白质具有两个结构域,没有信号肽和跨膜结构。蛋白质的二级结构主要以无规则卷曲(46.97%)和α-螺旋(40.7%)为主,三级结构与二级结构的结果一致。在NJ系统进化树中,孤雌卤虫(A.parthenogenetica)与大型溞(Daphnia magna)和苏拉威西秀体溞(Diaphanosoma celebensis)最为相近,而与湿木白蚁(Zootermopsis nevadensis)、台湾乳白蚁(Coptotermes formosanus)的亲缘关系较远。表达特征结果显示,ERR基因在孤雌卤虫头部组织中的表达量显著高于卵巢组织和躯干组织中的表达量,且随着卤虫卵巢的发育,表达量逐渐上升,在EE达到最高,随后在LE显著下降(P<0.01)。 展开更多
关键词 卤虫 激素相关受体 生物信息学特征 基因表达 卵巢发育
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孤雌胚胎干细胞在细胞移植和治疗上的应用
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作者 征月良 《邵阳学院学报(自然科学版)》 2023年第5期103-109,共7页
研究发现,卵子孤雌激活后,从囊胚中获得孤雌胚胎干细胞(parthenogenetic embryonic stem cells, pESCs),pESCs表达多能性标志物,发生表观遗传修饰重编程。它们具有高度的分化潜能,在体内可产生畸胎瘤,在体外能形成类胚体。pESCs能分化... 研究发现,卵子孤雌激活后,从囊胚中获得孤雌胚胎干细胞(parthenogenetic embryonic stem cells, pESCs),pESCs表达多能性标志物,发生表观遗传修饰重编程。它们具有高度的分化潜能,在体内可产生畸胎瘤,在体外能形成类胚体。pESCs能分化成多种类型的细胞,已被用于细胞移植治疗研究。用pESCs分化来的成纤维细胞构建皮肤组织,移植到皮肤缺损处,能促进伤口愈合。源自pESCs的成骨细胞、成软骨细胞和肌腱细胞接种到支架上并移植到皮下后,能再生出骨、软骨和肌腱组织,从而可以为治疗这些组织的损伤提供细胞来源。pESCs分化产生的心肌细胞移植到患急性心肌梗死的宿主心脏后,可改善心脏功能。由pESCs分化的神经干细胞或神经元移植到受损大脑或患帕金森病的宿主大脑后,也能促进大脑皮层的修复,改善宿主的运动缺陷。因此,pESCs在临床上具有重要的应用和推广价值,从而为疾病的细胞移植治疗提供理论依据和临床应用策略。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 分化 细胞移植 细胞治疗 疾病
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孤雌产雌松毛虫赤眼蜂种群间生殖表型的比较 被引量:1
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作者 吕琳 李媛媛 +5 位作者 霍梁霄 梁洪宇 张欢欢 周金成 张礼生 董辉 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2023年第2期245-253,共9页
为明确温度、遗传背景和雌蜂日龄对孤雌产雌松毛虫赤眼蜂生殖表型和Wolbachia滴度的影响,在22℃和29℃下处理两种遗传背景(彰武、西丰)的孤雌生殖松毛虫赤眼蜂,逐日统计子代蜂生殖表型指标(雄性比,间体率)、适合度指标(日产卵量,羽化率)... 为明确温度、遗传背景和雌蜂日龄对孤雌产雌松毛虫赤眼蜂生殖表型和Wolbachia滴度的影响,在22℃和29℃下处理两种遗传背景(彰武、西丰)的孤雌生殖松毛虫赤眼蜂,逐日统计子代蜂生殖表型指标(雄性比,间体率)、适合度指标(日产卵量,羽化率)和Wolbachia滴度。结果发现,29℃下子代蜂雄性比和间体率显著高于22℃处理的子代蜂,但29℃下雌蜂体内Wolbachia滴度和日产卵量均显著低于22℃处理的雌蜂。彰武种群雄性比显著高于西丰种群,但其日产卵量显著低于西丰种群。随母代蜂日龄增加,子代蜂雄性比和间体率均上升,但日产卵量和羽化率均下降。结果表明温度、遗传背景和日龄均影响孤雌产雌松毛虫赤眼蜂生殖表型。研究结果将为改善孤雌产雌赤眼蜂规模化繁育和田间应用提供参考。 展开更多
关键词 沃尔巴克氏体 松毛虫赤眼蜂 生殖 遗传背景
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孤雌产雌食胚赤眼蜂高温敏感阶段的研究
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作者 李明睿 王震刚 +7 位作者 刘婷 匡悦 王强 李迎瑞 李博洋 刘向涛 吴雨聪 张海燕 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期100-104,112,共6页
胞内共生菌Wolbachia可诱导赤眼蜂产雌孤雌生殖,而高温可使感染Wolbachia的赤眼蜂产雄比例增加。本文以感染Wolbachia孤雌产雌生殖的食胚赤眼蜂Trichogramma embryophagum为材料,采用30℃和35℃高温处理卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫等不同... 胞内共生菌Wolbachia可诱导赤眼蜂产雌孤雌生殖,而高温可使感染Wolbachia的赤眼蜂产雄比例增加。本文以感染Wolbachia孤雌产雌生殖的食胚赤眼蜂Trichogramma embryophagum为材料,采用30℃和35℃高温处理卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫等不同发育阶段的虫体,统计子代蜂发育历期、寄生数、羽化率和性比。结果表明,与25℃对照相比,高温缩短了子代蜂各发育阶段的历期,其中蛹、成虫和全世代历期显著缩短。处理的发育阶段和持续时间不同,子代的出雄率不同,而且随着处理时间的延长,对食胚赤眼蜂子代的寄生和羽化有一定的影响。基于高温处理后子代出雄率指标分析,F3代卵和幼虫经高温处理后代子代雄蜂比率最高,达到了20.54%和23.78%,明显高于预蛹期和蛹期处理的雄蜂率。结果表明,高温处理后感染Wolbachia的食胚赤眼蜂生殖方式改变的敏感发育阶段为卵期和幼虫期,本研究可为进一步揭示Wolbachia调控赤眼蜂生殖的机理提供理论参考。 展开更多
关键词 WOLBACHIA 食胚赤眼蜂 生殖 发育阶段
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牦牛卵母细胞体外成熟培养及孤雌发育研究
9
作者 王立斌 王强龙 +4 位作者 潘阳阳 赵天 丁天翊 崔燕 余四九 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期84-90,共7页
牦牛体外胚胎培养作为辅助生殖策略,能够有效提高其繁殖能力。为研究牦牛卵母细胞体外培养过程中不同的处理方式对孤雌激活胚胎发育质量的影响,10月份采集5~8岁健康母牦牛卵巢,抽吸法收集卵母细胞进行体外成熟诱导,设置卵丘-卵母细胞复... 牦牛体外胚胎培养作为辅助生殖策略,能够有效提高其繁殖能力。为研究牦牛卵母细胞体外培养过程中不同的处理方式对孤雌激活胚胎发育质量的影响,10月份采集5~8岁健康母牦牛卵巢,抽吸法收集卵母细胞进行体外成熟诱导,设置卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexs,COCs)和裸卵2个试验组;TCM199培养时间分别为24、36 h;以及体外培养12 h的COCs,消化之后再移入TCM199培养12 h分别进行孤雌激活,在体外进行孤雌胚胎培养,统计卵裂率和囊胚率。结果显示,牦牛COCs的孤雌激活胚胎发育率显著低于裸卵(P<0.05),且后期出现脱卵丘细胞现象;COCs在TCM199中培养24 h的孤雌胚胎卵裂率明显高于培养36 h的处理组(P<0.05);裸卵再培养之后卵母细胞成熟率低、进行孤雌激活的卵裂率极低,且大部分发生贴壁。以上结果表明,体外培养24 h的COCs经透明质酸酶消化为裸卵的孤雌激活效果最佳,其卵裂率最高,囊胚率最高。研究结果为揭示牦牛卵母细胞孤雌激活前的不同处理方式与孤雌激活胚胎的发育质量提供了依据,可为优化卵母细胞体外培养、提高孤雌激活效果提供参考。 展开更多
关键词 牦牛 卵母细胞 激活 胚胎发育
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亚胺环己酮对猪卵母细胞人工孤雌激活作用的研究 被引量:17
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作者 李光鹏 孟庆刚 +3 位作者 魏鹏 李子义 孙兴参 谭景和 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期416-420,共5页
本文以体外成熟的猪卵母细胞为材料 ,以乙醇、电脉冲和氯化锶为人工刺激条件 ,研究了蛋白质合成抑制剂———亚胺环己酮 (CHX)对猪卵母细胞的孤雌激活效果的影响。结果表明 ,乙醇、电脉冲和SrCl2 均可使猪卵母细胞激活 ,而电脉冲的激活... 本文以体外成熟的猪卵母细胞为材料 ,以乙醇、电脉冲和氯化锶为人工刺激条件 ,研究了蛋白质合成抑制剂———亚胺环己酮 (CHX)对猪卵母细胞的孤雌激活效果的影响。结果表明 ,乙醇、电脉冲和SrCl2 均可使猪卵母细胞激活 ,而电脉冲的激活效果最好。当分别与CHX联合使用时 ,激活率显著高于单独的乙醇、电脉冲或SrCl2 刺激。说明 ,CHX与乙醇、电脉冲及SrCl2 联合使用对猪IVM卵母细胞激活具有显著的协同促进作用。 展开更多
关键词 亚胺环己酮 激活 卵母细胞 细胞核移植
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不同激活方法对猪体外成熟卵母细胞孤雌发育的影响 被引量:14
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作者 刘国世 曾申明 +7 位作者 吴中红 邢凤英 田见晖 林平 姜午旗 刘敬浩 朱士恩 张忠诚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期615-620,共6页
研究了猪体外成熟卵母细胞的电激活、离子霉素激活和乙醇激活的方法。3种不同激活方法筛选试验表明,猪卵母细胞电激活最佳参数为电场强度130V/min,脉冲时程80μs的1次脉冲激活,即130V/mm-80μs-1次,其囊胚(发育)率为18.92%±8.48%(P... 研究了猪体外成熟卵母细胞的电激活、离子霉素激活和乙醇激活的方法。3种不同激活方法筛选试验表明,猪卵母细胞电激活最佳参数为电场强度130V/min,脉冲时程80μs的1次脉冲激活,即130V/mm-80μs-1次,其囊胚(发育)率为18.92%±8.48%(P>0.05);离子霉素激活的最佳条件为15μmol/L、激活时间40min,其囊胚率为21.27%±8.54%(P>0.05);乙醇激活最佳参数以9%乙醇激活处理3min,囊胚率为13.33%±7.64%。进一步对比试验表明,电激活和离子霉素激活处理的囊胚率和囊胚细胞数无显著差异(P>0.05),电激活的卵裂率明显高于乙醇激活(P<0.05),而囊胚率和细胞数差异不显著(P>0.05)。 展开更多
关键词 囊胚率 猪体 激活方法 体外成熟 卵母细胞 发育 筛选试验 霉素 细胞数 乙醇
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几种不同化学激活方法对牛卵母细胞孤雌激活的影响 被引量:24
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作者 李雪峰 安志兴 +1 位作者 郭继彤 张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2002年第2期43-47,共5页
为确定牛体细胞核移植胚胎的激活条件 ,比较了几种不同化学激活方法对牛卵母细胞激活的影响。选择明显具有第一极体的成熟卵母细胞 ,随机分为 9组 :1Ionomycin(I) +6 -甲氨基嘌呤 (D) (ID) ;2 I+D+细胞松弛素 B(CCB) (IDC) ;3I+放线菌酮... 为确定牛体细胞核移植胚胎的激活条件 ,比较了几种不同化学激活方法对牛卵母细胞激活的影响。选择明显具有第一极体的成熟卵母细胞 ,随机分为 9组 :1Ionomycin(I) +6 -甲氨基嘌呤 (D) (ID) ;2 I+D+细胞松弛素 B(CCB) (IDC) ;3I+放线菌酮 (X) (IX) ;4 I+X+CCB(IXC) ;5体积分数 7%乙醇 (E) +D(ED) ;6E+D+CCB(EDC) ;7E+X(EX) ;8E+X+CCB(EXC) ;9Sr2 + +CCB(SC)。Ionom ycin和乙醇的处理时间为 5min,6 - DMAP± CCB的处理时间为 4 h,放线菌酮± CCB的处理时间为 5 h,Sr2 + +CCB的处理时间为 10 h。培养36 h后 ,各组卵母细胞的卵裂率分别为 72 .0 % ,75 .5 % ,81.3% ,85 .1% ,81.7% ,82 .4 % ,74 .4 % ,78.1%和 5 1.0 % ;培养到 196 h时 ,各组的囊胚发育率分别为 18.2 % ,2 4 .5 % ,7.2 % ,11.9% ,11.1% ,19.4 % ,6 .7% ,12 .2 %和 2 .0 %。结果表明 ,在 10 mm ol/ L Sr2 +内培养 10 h不能有效地激活牛卵母细胞 ,Ionom ycin+6 - DMAP± CCB以及乙醇 +6 -DMAP+CCB结合使用可以有效地激活牛卵母细胞。Ionom ycin比乙醇对牛卵母细胞的激活作用强 ;6 - DMAP比CHX的激活效果好 ,激活液中 展开更多
关键词 化学激活方法 牛卵母细胞 激活 影响
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猪体外受精胚胎、孤雌激活胚胎以及体细胞核移植胚胎的体外培养 被引量:10
13
作者 张运海 潘登科 +4 位作者 孙国杰 孙秀柱 李燕 戴蕴平 李宁 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期588-593,共6页
目的本研究系统比较了体外受精胚(IVFEs)、孤雌激活胚(PAEs)以及体细胞核移植胚(NTEs)的发育率和囊胚质量,同时还比较了PZM-3和NCSU-23两种培养基培养对PAEs以及NTEs发育的影响。方法利用体细胞核移植技术、体外受精技术和孤雌激活技术... 目的本研究系统比较了体外受精胚(IVFEs)、孤雌激活胚(PAEs)以及体细胞核移植胚(NTEs)的发育率和囊胚质量,同时还比较了PZM-3和NCSU-23两种培养基培养对PAEs以及NTEs发育的影响。方法利用体细胞核移植技术、体外受精技术和孤雌激活技术分别生产猪的NTEs、IVFEs和PAEs,开展体外培养。结果(1)IVFEs、PAEs和NTEs的卵裂率分别为72.0%,66.0%和63.5%,各组间没有显著差异(P>0.05);囊胚形成率分别为11.0%,22.6%和16.9%,也不存在明显不同(P>0.05);然而,在囊胚质量,即ICM细胞数/总细胞数的比例上,IVFEs和NTEs均优于PAEs(0.448%,0.356%vs 0.122%,P<0.05)。(2)对PAEs来讲,以PZM-3为基础培养基时囊胚率明显高于以NCSU-23为基础培养基时的处理组(35.4%vs.22.6%,P<0.05);而对NTEs而言,两种培养基在支持胚胎形成囊胚方面的效果相当(26.6%vs.21.1%,P>0.05),虽然PZM-3培养时胚胎卵裂率显著低于NCSU-23培养组(47.5%vs.63.5%,P<0.05)。结论(1)PAEs的囊胚质量在3种来源的胚胎中最差;(2)对PAEs理想的培养基,当用于NTEs培养时却不一定是最佳的选择。 展开更多
关键词 体外受精 体细胞核移植 激活 体外培养
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EGF和FBS对牛孤雌胚胎发育的影响 被引量:12
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作者 李向臣 丛日华 +2 位作者 安志兴 王超 张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2004年第4期51-54,共4页
 在卵母细胞体外成熟液中分别添加0,10,30,50ng/mL表皮生长因子(EGF),24h检查成熟率,将成熟的卵母细胞置于5μmol/L离子霉素(Ionomycin)中激活5min后,在含有6-DMAP和CCB的培养液中培养4h,最后移入CR1培养液中培养,并在孤雌激活后第0,2,...  在卵母细胞体外成熟液中分别添加0,10,30,50ng/mL表皮生长因子(EGF),24h检查成熟率,将成熟的卵母细胞置于5μmol/L离子霉素(Ionomycin)中激活5min后,在含有6-DMAP和CCB的培养液中培养4h,最后移入CR1培养液中培养,并在孤雌激活后第0,2,4,6天添加体积分数10%的胎牛血清(FBS),7~8d后检查囊胚率,探讨牛成熟培养液中添加EGF及FBS对牛孤雌胚体外发育的影响。结果表明,添加30ng/mL的EGF能促进卵母细胞的成熟率和孤雌囊胚的发育率;在第4天添加FBS更有利于胚胎的发育。 展开更多
关键词 EGF FBS 胚胎 体外发育 表皮生长因子 胎牛血清 囊胚率 成熟率 胚胎移植
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猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活效率影响因素分析 被引量:9
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作者 邢凤英 吴中红 +4 位作者 曾申明 刘国世 朱士恩 张忠诚 陈学进 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期125-129,共5页
研究了月龄和卵巢采集后的保存条件对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活效率的影响 ,以确立猪卵母细胞体外成熟的最佳条件。试验包括 :(1)卵巢保存的生理盐水温度 (2 2、30、37、38.5、4 0℃ )对猪卵母细胞体外成熟和发育潜力的影响。 (2 )... 研究了月龄和卵巢采集后的保存条件对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活效率的影响 ,以确立猪卵母细胞体外成熟的最佳条件。试验包括 :(1)卵巢保存的生理盐水温度 (2 2、30、37、38.5、4 0℃ )对猪卵母细胞体外成熟和发育潜力的影响。 (2 )卵巢保存时间对猪卵母细胞体外成熟和后期发育的影响。 (3)初情期前后母猪卵母细胞对体外成熟和发育潜力的影响。结果表明 ,(1) 38.5℃保存的卵巢卵母细胞激活后的卵裂率 (79.6 4 % )和囊胚率(18.11% ) ,37℃的卵裂率 (76 .18% )和囊胚率 (33.82 % )相比 ,差异不显著 (P >0 .0 5 )。当温度达到 4 0℃时 ,卵裂率(2 1.6 8% )和囊胚率 (0 )与 37℃相比差异极显著 (P <0 .0 1)。 30℃与 37℃相比 ,卵裂率和囊胚率之间差异不明显 (P>0 .0 5 )。而当温度降低到 2 2℃时 ,卵裂率和囊胚率明显降低 (P <0 .0 5 )。 (2 )猪卵巢在体外保存 2和 6h对卵母细胞激活后的卵裂率 (6 8.86 %VS 6 8.74 % )和囊胚率 (16 .12 %VS 16 .0 9% )无显著影响 (P >0 .0 5 )。 (3)初情期前、后母猪卵母细胞激活后的卵裂率没有显著差异 (72 .90 %± 7.0 4 %VS 77.35 %± 8.2 9%P >0 .0 5 ) ,但初情期后母猪卵母细胞激活后的囊胚发育率显著高于初情期前 (2 2 .5 2 %± 7.4 8%VS 36 .6 2 %± 10 .2 5 % 。 展开更多
关键词 卵母细胞 体外成熟 激活效率 影响因素
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褪黑素对牛卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响 被引量:6
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作者 王淑娟 刘文举 +4 位作者 庞训胜 刘宝如 王立克 闻爱友 杨利国 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期-,共6页
褪黑素对生殖系统发挥着重要调节作用,本研究旨在探究褪黑素对牛卵母细胞体外成熟和孤雌胚胎发育的影响及作用机制。本试验用化学激活法对牛卵母细胞孤雌激活,且在卵母细胞体外成熟液和胚胎体外培养液中添加不同浓度(0 pmol/ml、10 pmol... 褪黑素对生殖系统发挥着重要调节作用,本研究旨在探究褪黑素对牛卵母细胞体外成熟和孤雌胚胎发育的影响及作用机制。本试验用化学激活法对牛卵母细胞孤雌激活,且在卵母细胞体外成熟液和胚胎体外培养液中添加不同浓度(0 pmol/ml、10 pmol/ml、20 pmol/ml、30 pmol/ml)的褪黑素,以检测牛卵母细胞成熟率和孤雌胚胎发育效果,同时利用DCHF-DA染色方法检测卵母细胞中ROS水平,采用免疫荧光技术检测褪黑素受体MT1在牛早期胚胎发育过程中的表达。结果表明,外源褪黑素可促进卵母细胞体外成熟,卵母细胞成熟率随褪黑素浓度的增加而升高。褪黑素显著降低了卵母细胞中的ROS水平(P<0.05),且卵母细胞中的ROS水平随着褪黑素浓度增加而降低。褪黑素可显著提高孤雌胚胎的卵裂率、桑葚胚率和囊胚率(P<0.05),促进胚胎发育。相比对照组,10pmol/ml褪黑素剂量更有利于胚胎发育,桑葚胚率和囊胚率都显著高于其他试验组。另外,本研究首次探究了褪黑素受体MT1在早期胚胎发育过程中的表达分布。MT1在未卵裂的激活卵母细胞中主要分布于细胞膜上,随着孤雌胚胎卵裂的进行,受体表达量逐渐增加,主要表达定位于细胞膜上,随着胚胎发育的进行,MT1在卵裂球内部开始表达和分布,退化胚胎中MT1表达水平较低。可见,褪黑素可促进卵母细胞成熟和胚胎发育,且褪黑素受体MT1在胚胎发育早期已开始表达。 展开更多
关键词 褪黑素 卵母细胞 活性氧(ROS) 胚胎 MT1
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孤雌活化诱导恢复的小鼠减数分裂期间细胞骨架的动态与作用 被引量:7
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作者 朱子玉 文端成 +6 位作者 韩之明 雷蕾 刘忠华 寇朝辉 徐营 王敏康 陈大元 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第5期819-823,共5页
减数分裂的顺利完成是胞质分裂和核分裂在时间和空间上的协调结果,细胞骨架系统在减数分裂的一系列事件中具有重要的调节作用.实验通过孤雌活化诱导小鼠MⅡ期卵减数分裂恢复,采用激光共聚焦显微术检测了减数分裂期间的微管、微丝和核的... 减数分裂的顺利完成是胞质分裂和核分裂在时间和空间上的协调结果,细胞骨架系统在减数分裂的一系列事件中具有重要的调节作用.实验通过孤雌活化诱导小鼠MⅡ期卵减数分裂恢复,采用激光共聚焦显微术检测了减数分裂期间的微管、微丝和核的动态变化,并通过细胞骨架药物处理,以分析微管和微丝在减数分裂事件中的不同作用.结果显示:纺锤体微管为核的定位、分离和运动所必需;纺锤体从与质膜平行旋转至与质膜垂直是极体排放的前提;微丝是控制纺锤体旋转的关键因素;纺锤体旋转完成后微丝随即解聚,不参与极体的最后排出。 展开更多
关键词 活化 诱导恢复 小鼠 减数分裂 细胞骨架
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卵丘细胞对辽宁绒山羊卵母细胞体外成熟与孤雌发育的影响 被引量:12
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作者 田长永 杨景晁 +1 位作者 马泽芳 宋连喜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期543-548,共6页
为了进一步探索辽宁绒山羊卵母细胞体外成熟的方法,本试验以屠宰场绒山羊卵巢为材料,采用抽吸法收集直径大于2 mm卵泡的卵母细胞,研究卵丘细胞对卵母细胞体外成熟和孤雌发育的影响。试验1,将一部分COCs经机械吹打脱除卵丘细胞成为机械裸... 为了进一步探索辽宁绒山羊卵母细胞体外成熟的方法,本试验以屠宰场绒山羊卵巢为材料,采用抽吸法收集直径大于2 mm卵泡的卵母细胞,研究卵丘细胞对卵母细胞体外成熟和孤雌发育的影响。试验1,将一部分COCs经机械吹打脱除卵丘细胞成为机械裸卵(DOs),然后以4种方式培养,即COCs单独培养、DOs与COCs共培养(DOs(COCs))、DOs与卵丘颗粒细胞共培养(DOs(CCs)),以及DOs单独培养。试验2,根据包裹卵母细胞的卵丘细胞的完整性分为3组,有3层卵丘细胞紧密包围的卵母细胞复合体COCs3,有1-3层卵丘细胞包围的卵母细胞COCs1-3,无卵丘细胞包围的裸露卵母细胞NOs,3组各自单独培养。结果表明:COCs组的成熟率、孤雌卵裂率和囊胚率最高,分别为83.25%、41.75%和29.25%,卵丘细胞的存在有利于卵母细胞体外成熟和随后的发育,COCs3组成熟率、孤雌卵裂率和囊胚率分别为83.25%、42.50%和29.75%,显著高于COCs1-3和NOs组,卵丘细胞的完整性也影响着卵母细胞的体外发育,自然裸卵已失去体外发育能力。 展开更多
关键词 卵丘细胞 卵母细胞 体外成熟 发育 辽宁绒山羊
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化学激活对猪体外成熟卵母细胞孤雌发育的影响 被引量:6
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作者 田见晖 蔡元 +5 位作者 刘国世 曾申明 成文敏 朱士恩 刘焕营 吴常信 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期1029-1033,共5页
探索了离子霉素结合细胞松驰素B(cytochalasinB,CB)、放线菌酮(cycloheximide,CHX)以及6-二甲基嘌呤(6-dimethylaminopurine,6-DMAP)等化学物质,对猪卵母细胞激活后发育的影响。试验1,体外成熟卵母细胞分别用15、20、25、30μmol·... 探索了离子霉素结合细胞松驰素B(cytochalasinB,CB)、放线菌酮(cycloheximide,CHX)以及6-二甲基嘌呤(6-dimethylaminopurine,6-DMAP)等化学物质,对猪卵母细胞激活后发育的影响。试验1,体外成熟卵母细胞分别用15、20、25、30μmol·L-1的离子霉素处理40min或电激活(1.3kV·cm-1,80μs,1次脉冲),结果表明,20μmol·L-1组的激活率(69.93±5.80)%显著高于15μmol·L-1组(P<0.05),但与其它各组差异不显著(P>0.05)。试验2,卵母细胞采用20μmol·L-1离子霉素分别激活10、20、30、40、50min,再用2mmol·L-16-DMAP处理6h,其中,40min组的卵裂率、囊胚率[(72.40±13.02)%、(25.37±11.43)%]较高,但与其它各组差异不显著(P>0.05)。试验3,卵母细胞经离子霉素(20μmol·L-1、40min)激活后,分别用7.5μg·ml-1CB、10μg·ml-1CHX、2mmol·L-16-DMAP、7.5μg·ml-1CB+10μg·ml-1CHX和7.5μg·ml-1CB+2mmol·L-16-DMAP处理6h,2mmol·L-16-DMAP组的激活率、卵裂率和囊胚率[(86.05±4.29)%、(61.77±8.10)%和(21.62±3.31)%]显著高于7.5μg·ml-1CB组(P<0.05)与另外几组差异不显著(P>0.05)。试验4,卵母细胞由离子霉素(20μmol·L-1、40min)激活后,用2mmol·L-16-DMAP分别处理3.5、5.5、7.5h,5.5h组的卵裂率和囊胚率[(66. 展开更多
关键词 化学激活 体外成熟 卵母细胞 发育 离子霉素
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牛孤雌生殖胚与体外受精胚体外发育比较 被引量:7
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作者 张琇 李雪峰 +2 位作者 安志兴 郭继彤 张涌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期612-614,共3页
从卵巢采集的卵丘-卵母细胞复合体(COCs)经体外成熟培养24h后,随机分为2组分别用于孤雌激活与体外受精。在相同培养条件下,比较孤雌生殖胚与体外受精胚的发育率和发育速度。结果表明:将牛孤雌生殖胚与体外受精胚分别置于mSOFaa和mBECMa... 从卵巢采集的卵丘-卵母细胞复合体(COCs)经体外成熟培养24h后,随机分为2组分别用于孤雌激活与体外受精。在相同培养条件下,比较孤雌生殖胚与体外受精胚的发育率和发育速度。结果表明:将牛孤雌生殖胚与体外受精胚分别置于mSOFaa和mBECMaa培养液中培养,卵裂率(89.3%vs.80.1%;83.2%vs.82.5%)、囊胚发育率(27.5%vs.24.0%;28.9%vs.21.9%)和孵化率(58.7%vs.56.7%;51.5%vs.53.3%),均无显著差异(P>0.05);孤雌生殖胚与体外受精胚在体外发育的速度基本相同。对孤雌生殖胚胎进行培养可以代替体外受精胚胎筛选最佳体外培养系统。 展开更多
关键词 生殖 体外受精胚胎 体外发育 囊胚发育率 发育速度 孵化率 激活 体外培养系统 复合体 卵巢
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