比较分析血清学鉴定与全面生化反应在沙门氏菌检验中的应用

目的比较血清学鉴定与全面生化反应在沙门氏菌检验中的应用效果。方法选取2022年9月—2023年7月赣州经济技术开发区疾病预防控制中心收集的80例疑似沙门氏菌感染患者标本为研究对象,对所有患者均实施血清学鉴定及全面生化反应检测,以细菌培养结果作为沙门氏菌感染检测“金标准”,对比2种检测方式的检测价值及效能。结果全面生化反应检验出39例真阳性患者,27例真阴性患者;血清学鉴定检验出42例真阳性患者,29例真阴性患者;全面生化反应+血清学鉴定检验出46例真阳性患者,31例真阴性患者。血清学鉴定检验灵敏度、特异度及准确度高于全面生化反应,全面生化反应+血清学鉴定检验灵敏度、特异度及准确度高于血清学鉴定、全面生化反应检验,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论在沙门氏菌检验中实施血清学鉴定与全面生化反应方式检验,均有一定的价值。与单项全面生化反应检验或单项血清学鉴定检验方式相比,两者联合检验的方式准确度及诊断效能高,值得推广应用。

血清学鉴定与全面生化反应在沙门氏菌检验中的效果及准确度评价分析

探讨在沙门氏菌检验中使用血清学鉴定与全面生化反应的效果。方法 选取时间是2023年1月至2023年12月,辖区内从公共场所从业人员健康体检肛拭子样本中选择152例,进行数据研究,抽签分组,每组76例,研究组使用血清学鉴定与全面生化反应,对照组使用常规检验,对比两组数据。结果 对比对照组,研究组的沙门氏菌阳性率明显更高,P<0.05。研究组中,准确度包括灵敏度、特异度,分别是100.00%(15/15)、97.67%(42/43)。结论 在沙门氏菌检验中使用血清学鉴定与全面生化反应的效果理想,沙门氏菌阳性率明显更高,而且准确度高。

对比血清学鉴定与全面生化反应在沙门氏菌检验中的应用分析

目的分析在沙门氏菌检验中用血清学鉴定与全面生化反应的应用价值。方法将开封某医院近两年(2021.1~2022.12)收治的沙门氏菌感染者30例作为本次观察对象,在经酶联免疫吸附试验测定后确定为沙门氏菌感染,另将同一时期接收的健康志愿者30例作为对照组观察对象,均采取血清学鉴定与全面生化反应,比较分析在不同检验方式下的准确性(灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值)。结果血清学鉴定准确性(灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值)更高于全面生化反应,但两种联合检验方式更高于单项检验,对比有统计学意义(P<0.05)。结论在沙门氏菌检验过程中,血清学检验的诊断价值略高于全面生化反应,而联合检验则更有利于提高疾病诊断的灵敏度与特异度,对此,临床应根据患者实际情况选择更合理的检验方案。

红珊瑚及其制品的生物学鉴定

通过列举红珊瑚和易混淆其他属种珊瑚的生物学鉴定特征,并对上述特征进行对比分析,总结出红珊瑚与常见仿品的生物学鉴定要领,同时与常见仿品的鉴定实操相结合,得出以下结论:红珊瑚的生物学鉴定方法包括色泽观察、特征性纹理、瑕疵特征、显微镜镜检、有机溶剂擦拭、稀盐酸试验、热针刺探试验等;红珊瑚细密的同心圆放射状结构及白芯、虫孔等瑕疵特征是其独有的生物学鉴定特征,基于此可区别于其他仿品。通过实践证明,该套红珊瑚生物学鉴定方法具有简便、快速、精准的优点,一般可免去繁琐的宝石学鉴定流程,凸显成效。

1例自身抗LW的血清学鉴定及基因分析

目的鉴定1例淋巴瘤患者的抗体类型和基因型。方法采取盐水法、凝胶卡法、二硫苏糖醇(DTT)处理和木瓜酶处理等方法进行抗体筛查和鉴定;用成人和新生儿RhD阳性、阴性红细胞分别与患者血清反应;患者细胞进行自身酸放散试验、用新生儿RhD阴性红细胞吸收患者血清后酸放散。患者血清与RhD阳性、阴性红细胞交叉配血。提取患者DNA,PCR扩增,检测ICAM4基因外显子1~3序列,与标准序列比对,确定患者Landsteiner⁃Wiener(LW)基因型,并观察是否存在突变。结果患者抗筛呈抗D格局,DTT处理可破坏抗原抗体反应,木瓜酶处理对反应有所增强;患者血清与新生儿RhD阳性、阴性红细胞凝集强度无差别。患者自身放散液、新生儿RhD阴性红细胞吸收患者血清后放散液,与成人RhD阳性红细胞反应均强于成人RhD阴性红细胞。患者血清与RhD阴性献血员红细胞配血凝集最弱,选择RhD阴性红细胞输注,输注效果安全有效。患者ICAM4基因第299位核苷酸为A纯合子,基因型为LWa/LWa,未发现突变。结论血清学和分子生物学的结果证明该患者基因型为LWa/LWa,含有自身抗LW抗体,而非抗D。

四川葡萄病毒病田间普查及血清学鉴定

对四川葡萄主产区病毒病的发生和危害状况进行田间普查,并采集了48份葡萄枝条样本进行病毒病的血清学检测和鉴定。经双抗体和三抗体夹心酶联免疫法测试后,从采自四川的这批样本中分别检测出了葡萄茎沟病毒(GVA)、葡萄栓皮病毒(GVB)、葡萄扇叶病毒(GFLV)、葡萄斑点病毒(GFkV)、葡萄卷叶病毒-2(GLRaV 2)和葡萄卷叶病毒-3((GLRaV 3)6种危险性的病毒(株系),它们的检出率分别为14 6%、8 3%、10 4%、27 1%、14 6%和20 8%,另外两种靶标病毒(株系)葡萄卷叶病毒-1(GLRaV 1)和南芥菜花叶病毒(ArMV)则未被发现。在四川省内一些老龄葡萄园内,以及部分引进的葡萄新品种上,病毒病的发生和流行极为普遍,并给葡萄的正常生长和生产造成了严重危害。

2型猪链球菌的血清学鉴定

本试验首次证实了２型猪链球菌在我国的存在。采用玻片凝集、琼脂扩散及毛细管沉淀等３项试验，对１９９０年以来广东某猪场断奶仔猪暴发流行的败血症、脑膜炎及关节炎病猪中分离的１５株链球菌进行了血清学鉴定。结果表明：１５株链球菌均为２型猪链球菌；用高压法提取抗原进行沉淀反应，其结果比酸热法提取抗原具有简便、敏感、特异性强的特点。

一株高效溶藻放线菌的分子生物学鉴定

实验室从土壤中分离筛选得到了一株具有高效溶藻能力的放线菌,命名为AN02。对这株具有高效溶藻效果能力的放线菌AN02分别进行了形态特征、培养特征及生理生化特性的分析,分析结果表明放线菌AN02菌株的上述几个特征与细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)的高度一致,与此同时,聚类分析结果也同样表明,放线菌AN02菌株与细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)的高度一致,后经过比对,发现二者的16SrDNA序列的同源性高达近100%,因此,可将溶藻放线菌AN02定名为细黄链霉菌AN02(Streptomyces microflavus AN02)。

人骨保护素成熟肽表达载体的构建、表达及重组蛋白免疫学鉴定

目的 :构建人骨保护素 (OPG)成熟肽cDNA重组表达载体 ,实现其在毕赤酵母中的高效表达。方法 :由人成骨细胞提取总RNA ,经RT -PCR扩增得到人OPG成熟肽cDNA ,克隆入分泌型表达载体 pPIC9K ,转化酵母细胞 ,G418筛选多拷贝整合的重组子进行甲醇诱导表达 ,产物行Westernblotting 鉴定。结果 :成功构建了人OPG成熟肽表达载体 ,该载体能在酵母细胞中获得分泌表达 ,诱导96h的表达量占上清总蛋白的30 %。重组蛋白相对分子质量约55ku ,可被OPG抗体识别。结论 :重组人OPG成熟肽在酵母表达系统获得较高水平表达 ,为进一步研究开发基因工程药物准备了条件。

灰色链霉菌RX-17溶菌酶R2的纯化及其酶学鉴定

从灰色链霉菌 (Streptomycesgriseus)RX 1 7的发酵液中 ,通过硫酸铵分级沉淀 ,CM SephadexC 5 0和CM SepharoseFastFlow离子交换层析 ,纯化得到了溶菌酶R2 .该酶分子量约为 2 4 8kD ,等电点约为 9 7,N端 1 5个氨基酸的顺序为DTSGVQGIDVSHWQG .R2酶溶解变链球菌Ingbritt(StreptococcusmutansIngbritt)的最适作用温度为 5 5℃ ,最适pH为 7 0 .5 0℃处理 1h ,R2酶残存酶活74 % ,碱性条件 (pH >9)下该酶保持稳定 .Zn2 + 、Cu2 + 、Fe2 + 、Cd2 + 、Pb2 + 可使酶完全失活 ,螯合剂、盐酸羟胺、溴替丁二酰亚胺及离子型去垢剂SDS抑制R2酶的溶菌作用 ,而非离子型去垢剂TritonX 1 0 0等则能促进溶菌 .R2酶溶菌谱广泛 ,能够溶解多种鸡卵清溶菌酶不能作用的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌 .从对金黄色葡萄球菌 (Staphylococcusaureus)的高活性来看 ,该酶应分类为 β 1 ,4 N ,6 O 二乙酰胞壁质酶 (β 1 ,4 N ,6 O diacetylmuramidase) .

耐力训练对大鼠骨骼肌比较基因组学鉴定蛋白-58,脂滴包被蛋白基因表达的影响

目的:研究不同强度耐力训练对大鼠骨骼肌比较基因组学鉴定蛋白-58(CGI-58)基因和脂滴包被蛋白(perilipin)基因的表达,分析其变化规律,为运动时维持机体能量的动态平衡和代谢健康提供理论依据。方法:选用SD雄性大鼠48只,随机分为4组,每组12只,即安静对照组(N组);低强度耐力组(L组);中等强度耐力组(M组);大强度耐力组(H组)。运动负荷采用Bedford设定的大鼠运动强度等级,大鼠在跑台上进行不同坡度的递增负荷耐力训练;5周耐力训练结束后,宰杀大鼠。通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测定腓肠肌、比目鱼肌CGI-58基因和perilipin基因表达。结果:在腓肠肌组织中,CGI-58基因的表达随着运动强度的增加出现上升的趋势,其中在H组CGI-58表达达到最大并且高于U组(P<0.01),其次是M组和L组。在比目鱼肌组织中,各组大鼠CGI-58基因的表达为:L组、M组和H组的表达都高于N组,其中在M组时表达最强并且高于U组和H组(P<0.05)。在相同训练方式下,H组腓肠肌CGI-58 mRNA表达高于比目鱼肌(P<0.01)。在腓肠肌组织中,perilipin基因的表达随着运动强度的增加出现上升的趋势,在H组表达达到最大并且高于U组和L组(P<0.01),其次是M组。在比目鱼肌组织中,L组、M组和H组的perilipin基因表达都高于N组,在M组和H组均高于N组(P<0.05)。腓肠肌和比目鱼肌在相同训练方式下,两种肌肉perilipin mRNA表达差异也不明显(P>0.05)。结论:5周不同强度的耐力训练可以诱发大鼠骨骼肌CGI-58基因和perilipin基因发生差异表达,表明CGI-58基因和perilipin基因在不同强度的耐力训练下参与了不同程度的脂肪水解调控。

日本血吸虫磷酸丙糖异构酶Th1型表位的免疫学鉴定

目的筛选和鉴定日本血吸虫磷酸丙糖异构酶(SjTPI)的Th1型细胞表位,为构建短肽疫苗奠定基础。方法用BLAST比对并预测SjTPI的T细胞表位SjTPI-P18及其对照表位SjTPI-P9。设计并合成其编码DNA,重组入原核表达载体pET-32c(+)后进行表达,获得纯化的重组融合蛋白rSjTPI-P18和rSjTPI-P9。用rSjTPI、rSjTPI-P18及rSjT-PI-P9刺激经照射致弱尾蚴免疫、rSjTPI加强免疫的C57BL/6和C3H/HeJ小鼠淋巴细胞,3H-TdR掺入法检测淋巴细胞的增殖效果及细胞培养上清中IL-2水平;分别用重组rSjTPI-P18和合成SjTPI-P18刺激rSjTPI-P18、SjTPI-P18或PBS加弗氏佐剂两次免疫的C57BL/6小鼠淋巴细胞,并检测其细胞培养上清中IFN-γ及IL-4水平。结果参照曼氏血吸虫TPI T细胞表位预测的SjTPI-P18及SjTPI-P9,获得了与Trx融合表达的重组肽rSjTPI-P18及rSjTPI-P9。与rSjTPI-P9相比,rSjTPI及rSjTPI-P18均可刺激辐照致弱尾蚴免疫、rSjTPI加强免疫的C57BL/6或C3H/HeJ小鼠的淋巴细胞增殖且IL-2分泌量增加(P均<0.05);SjTPI-P18及rSjTPI-P18刺激经rSjTPI-P18或SjTPI-P18免疫两次的C57BL/6小鼠淋巴细胞分泌IFN-γ水平升高(P均<0.05),而IL-4水平较低。结论筛选和鉴定出的SjTPI-P18是C57BL/6小鼠特异的Th1型表位。

问号钩端螺旋体属特异性外膜蛋白LipL41抗原表位预测及免疫学鉴定

目的:预测及筛选问号钩端螺旋体(简称钩体)属特异性外膜蛋白LipL41有效T和B细胞(T/B)联合表位,了解不同基因型LipL41s差异T/B联合表位的免疫反应性差别。方法:采用生物信息学方法预测LipL41/1和LipL41/2分子中T/B联合表位。采用PCR扩增候选T/B联合表位片段,采用噬菌体展示及SDS-PAGE等技术获得含不同T/B联合表位的重组P。分别以rLipL41/1和rLipL41/2抗血清、黄疸出血群赖型赖株全菌抗血清和钩体患者血清为一抗,采用Western Blot检测各抗血清与各重组P免疫杂交反应性。结果:根据预测结果选择了LipL41s中8个共有或差异T/B联合表位。经PCR扩增获得了上述T/B联合表位片段。各T/B联合表位片段均准确插入噬菌体P蛋白N端并有效表达。各抗血清均能识别上述8个T/B联合表位,但其WesternBlot杂交信号强度存在差异,其中共有T/B联合表位LipL41/1-30和LipL41/1-233与不同抗血清的信号较强且稳定。结论:所选择的8个T/B联合表位均为LipL41的有效抗原表位。共有T/B联合表位LipL41/1-30和LipL41/1-233可作为钩体MAP疫苗的首选抗原表位。差异T/B联合表位LipL41s-89和LipL41s-299与不同抗血清有免疫交叉现象。

山西省鸡肾型传染性支气管炎的血清学鉴定

用鸡传染性支气管炎标准毒株Ｍ４１、Ｇｒａｙ、Ｈｏｌｔｅ、Ａｕｓｔ－Ｔ株以及ＭＡ５，通过气管环组织培养中和试验，采用病毒固定、血清变量法，对山西主要养鸡区１５个鸡场分离的１０个毒株进行了血清学鉴定。结果表明，待测毒株中１株属Ｍ４１血清型，５株属Ａｎｓｔ－Ｔ型，２株属Ｇｒａｙ型，２株属Ｈｏｌｔｅ型，其中属Ｇｒａｙ、Ｈｏｌｔｅ型的４株待测毒均与ＭＡ５有相似的抗原性。

新疆出血热病毒分类地位的血清学鉴定

1983年通过病毒形态学的鉴定,证明了新疆出血热病毒是布尼安病毒科(Bunyaviridae)的成员。本次通过血清学方法与布尼安病毒属的西姆波组SMB-48株和内罗病毒属的刚果病毒K2/61株的免疫腹水进行比较。采用补体结合试验、反向被动血凝抑制试验和双抗体夹心抑制ELISA试验进行鉴定的结果,发现新疆出血热病毒与布尼安病毒属的代表毒株SMB-48株没有血清学联系,而与内罗病毒属的刚果病毒有显著的抗原关系。从而证明新疆出血热病毒与布尼安病毒属无关。其抗原性与内罗病毒属克里米亚-刚果出血热病毒一致。

广西鸭病毒性肝炎研究Ⅱ报——广西鸭肝炎病毒地方毒株的血清学鉴定

目前世界上流行的鸭病毒性肝炎(DVH)是由三个血清型的鸭肝炎病毒(DHV)所致。Ⅰ型的DHV分布于世界许多国家,它主要引起三周龄以下的雏鸭发病,成年鸭不受影响。雏鸭发病率高,死亡率多在20～60％,有时亦低至10％或高至90％,临床上表现特征性的神经症状,解剖病变主要是肝脏肿大并出现程度不一的出血点。Ⅱ型DHV在要流行于英国。

日本血吸虫副肌球蛋白合成肽的免疫学鉴定

目的鉴定日本血吸虫副肌球蛋白合成肽Sj97-P22。方法27只雌性C57BL/6小鼠随机均分为合成肽Sj97-P22免疫组、无关肽免疫组和PBS免疫组,分别于尾基部皮下注射与完全福氏佐剂等体积充分混匀的合成肽Sj97-P22(100μg)乳化物、无关肽(100μg)乳化物和PBS乳化物,抗原免疫剂量为100μg/(只.次),共免疫2次,间隔1周。于免疫后7～10d分离各组小鼠脾单个核细胞,运用流式细胞技术三色标记法检测其CD4+T细胞胞内因子干扰素γ(IFN-γ)和白介素4(IL-4)。将Sj97-P22免疫小鼠或PBS免疫小鼠的脾单个核细胞分别与Sj97-P22、无关肽或PBS共培养,采用3H-TdR掺入法观察细胞增殖效果,并用ELISA法检测细胞培养上清中IL-2、IFN-γ和IL-4的浓度。结果Sj97-P22免疫组小鼠脾脏CD4+T细胞中胞内分泌IFN-γ的细胞百分率为(8.05±0.54)%,显著高于无关肽免疫组[(4.74±1.04)%]和PBS免疫组[(6.51±0.49)%](P<0.05);而分泌IL-4的细胞百分率[(0.60±0.11)%]显著低于PBS免疫组[(1.31±0.27)%](P<0.05),与无关肽免疫组[(0.84±0.08)%]间的差异则无统计学意义(P>0.05)。Sj97-P22可明显刺激Sj97-P22免疫小鼠脾单个核细胞增殖,增殖指数达到3.12±1.59,细胞培养上清中IL-2和IFN-γ浓度分别为(9.13±1.54)和(39.75±9.69)pg/ml,与无关肽和PBS刺激相比显著升高(P<0.05),而IL-4浓度在3个刺激物间的差异无统计学意义(P>0.05)。Sj97-P22不能刺激PBS免疫鼠脾单个核细胞增殖及培养上清中IL-2、IFN-γ及IL-4浓度变化。结论Sj97-P22可能是C57BL/6小鼠特异的Th1型表位。

大肠杆菌表达的乙型肝炎表面抗原124aa分子的纯化和免疫学鉴定

目的 探索大肠杆菌表达的乙型肝炎表面抗原 (HBsAg) 12 4aa分子作为疫苗成分应用的可能性。方法 以超声破碎法获取包涵体 ,用HisTrapTM试剂盒亲和层析纯化目的蛋白 ,加入聚乙二醇 (PEG40 0 0 )以提高变性蛋白的复性效率 ;以抗HBsAga抗原决定簇单克隆抗体 (McAb)和抗HBsAg多克隆抗体 (PcAb)作为包被抗体 ,采用夹心ELISA法分析其抗原性 ;以纯化产物免疫BALB/c小鼠 ,RIA法测定小鼠血清中抗HBs抗体。结果 通过HisTrapTM 试剂盒亲和层析纯化的HBsAg12 4aa分子经反相高效液相色谱 (RP HPLC)分析 ,纯度达 95 %以上 ;经复性后的蛋白具有抗原性和免疫原性。结论 HBsAg12 4aa分子在大肠杆菌中的成功表达 。