不同品系及成熟度宁夏枸杞叶资源化学研究及抗氧化活性评价

目的分析不同品系及不同成熟度宁夏枸杞叶中多类型资源性化学成分及抗氧化活性差异,为其资源化利用提供依据。方法采用UPLC-TQ-MS技术对不同成熟度的果用和叶用2种宁夏枸杞(宁杞7号、宁杞菜1号)叶中的黄酮类、酚酸类和生物碱类等19种主要化学成分进行分析测定,利用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)及2,2'-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除能力、铁离子还原能力评价其抗氧化活性。结果叶芽和幼叶中各成分含量显著高于嫩叶和成熟叶。果用宁夏枸杞叶中芦丁含量较高,而叶用宁夏枸杞叶中槲皮素-3-O-芸香糖-7-O-葡萄糖苷和甜菜碱含量较高。所有样品均呈现良好的抗氧化性,且随着成熟度增加抗氧化活性均呈现减弱趋势。宁杞菜1号幼叶的DPPH清除能力最高,叶芽的ABTS自由基清除能力和铁离子还原能力较强,而宁杞7号叶芽3者均较高。叶用宁夏枸杞叶的抗氧化活性较果用宁夏枸杞叶高。宁夏枸杞叶抗氧化活性与隐绿原酸、5-O-阿魏酰奎宁酸、槲皮素-3-O-芸香糖-7-O-葡萄糖苷、绿原酸、甜菜碱含量呈显著正相关。结论不同品系不同成熟度宁夏枸杞叶所含资源性成分含量及抗氧化活性差异较大,果用和叶用宁夏枸杞叶芽与幼叶各成分含量均较高且均具有较好的抗氧化活性,具有较高的开发应用价值,叶用宁夏枸杞叶开发应用价值高于果用宁夏枸杞叶。研究结果可为不同品系及不同成熟度宁夏枸杞叶的资源化利用提供参考。

不同采收期宁夏枸杞叶中总黄酮含量的比较

The contents of total flavonoids in leaves of Lycium barbarum L.at different picked times were determined by RP-HPLC.It was showed that thecontent of total flavonoids in leaveswas the highest(1.99%) in May and the second(1.36%) in August,and decreased sharply after September and went down to the lowest in October(0.36%).So the best picked time in Xi′ning City,Qinghai Province was early summer.Moreover,contents of three major aglycones,such as quercetin,kaempferol and isorhamntin,were compared.Consistently for all picked times,the content of quercetin was much higher than those of kaempferol and isorhamntin.

宁夏枸杞叶对去势模型大鼠雌激素受体表达的影响

背景:前期实验发现枸杞叶主要成分枸杞多糖对成年去势雌性大鼠骨质疏松有明显的骨质改善作用。目的:观察宁夏枸杞叶对去势大鼠血清雌激素和骨组织雌激素受体表达的影响。方法:SD雌性未孕6月龄大鼠32只,分为3组。模型组和治疗组切除大鼠卵巢建立绝经后骨质疏松症动物模型。假手术组仅切除卵巢周围少许脂肪组织立即关闭切口。造模后8周后治疗组大鼠随机分为2组,分别饮水服枸杞叶500 mg/kg(治疗低剂量组)和枸杞叶1 000 mg/kg(治疗高剂量组),每天1次,连续12周;模型组和假手术组给予等量的蒸馏水。用放射免疫法(RIA法)检测大鼠血清中的雌二醇的水平变化,运用免疫组织化学方法检测雌性大鼠各组骨组织中雌激素受体的变化。结果与结论:与假手术组比较,模型组大鼠血清雌二醇明显降低(P<0.01);与模型组比较,药物治疗组可以明显提高血清雌二醇浓度(P<0.01),高剂量组明显。与假手术组比较,模型组大鼠血清雌激素受体α、雌激素受体β明显降低(P<0.01),模型组比较,治疗组雌激素受体α、雌激素受体β表达量增加,差异有显著性意义(P<0.01)。结果说明,宁夏枸杞叶能提高去卵巢骨质疏松模型大鼠血清雌二醇水平和骨细胞雌激素受体α、雌激素受体β的表达,可能是治疗骨质疏松症的重要机制。

宁夏枸杞叶总黄酮提取和纯化方法的优化

采用L9(34)正交设计,以黄酮含量为指标,确定的宁夏枸杞叶总黄酮的最佳超声提取方法为:30倍70%乙醇超声提取50 min,超声功率为250 W;纯化方法条件为:5倍柱体积70%乙醇洗脱,浓度为4 mg/mL、pH值5.0的上样液,上样速度和洗脱流速均为1 mL/min。并以吸附率、解吸率、回收率等作为考察参数,对提取和纯化方法进行了验证。实验结果表明,该方法简便节时、易操作且毒害小,各项变异系数低。

不同采摘期宁夏枸杞叶降血糖作用的研究

目的比较不同采摘期宁夏枸杞叶对糖尿病小鼠降血糖作用的差异。方法制备四氧嘧啶糖尿病小鼠模型后,将其分为5组,即春季枸杞叶组(750 mg·kg-1)、夏季枸杞叶组(750 mg·kg-1)、秋季枸杞叶组(750 mg·kg-1)、盐酸二甲双胍组(125 mg·kg-1)和对照组,14 d后测定小鼠空腹血糖。结果给药后,血糖降低值由高到低依次是春季枸杞叶组、夏季枸杞叶组、秋季枸杞叶组和盐酸二甲双胍组,血糖降低率分别为31.67%,24.91%,20.62%和27.71%。与对照组相比,各给药组血糖降低值均有差异,其中夏季、秋季枸杞叶组和盐酸二甲双胍组的降血糖作用相当,而春季枸杞叶组更为显著(P<0.05)。结论不同采摘期宁夏枸杞叶对糖尿病小鼠均有降血糖作用,春季枸杞叶的降血糖作用更明显。

宁夏枸杞叶中总黄酮含量与抗氧化活性关系

为进一步开发宁夏枸杞叶资源,研究宁夏枸杞叶抗氧化活性部位中总黄酮含量与抗氧化活性间关系.以乙醇做提取溶剂,再以不同极性溶剂对醇提液进一步萃取分离;并用DPPH法(DPPH.)测定不同极性萃取部分的抗氧化能力,用分光光度法测定不同极性萃取部分中的总黄酮含量.结果表明,除石油醚萃取部位外,其他各萃取部分在一定质量浓度时,对DPPH自由基(DPPH.)清除率均达到90%,且与总黄酮含量有极显著的相关性(P<0.01),其中,正丁醇萃取部分中的总黄酮含量最高,达到77.32mg/g,其清除自由基ρ(SC50)=0.048 3mg/mL,活性与维生素C相当.可为枸杞叶的深度开发提供参考.

宁夏枸杞叶茶中微量元素含量与其它茶叶的比较

采用原子吸收分光光度法和原子荧光法测定了宁夏枸杞叶茶和乌龙茶、茗香、观音王、黄山毛峰、龙井茶、东海龙舌6种茶叶中微量元素锌、铁、硒、镁和钙的含量。结果表明不同品种茶叶中微量元素含量差异显著(P>0.05)。5种微量元素含量总和最高的是观音王,其次为乌龙茶。宁夏枸杞叶茶中铁和锌元素含量较丰富。

宁夏枸杞叶对酒精性脂肪肝小鼠的保护作用

目的观察宁夏枸杞叶对酒精性脂肪肝小鼠的保护作用。方法成年雄性昆明种小鼠45只,随机分为3组,每组15只。空白对照组喂饲基础饲料;脂肪肝模型组喂饲高脂饲料+15%乙醇;枸杞叶干预组喂饲高脂饲料+15%乙醇+枸杞叶(枸杞叶全汁0.2mL.10g-1灌胃1次)。喂饲6周后称体重,处死小鼠,取肝脏(冰浴下制备肝组织匀浆),测定甘油三酯(triglyceride,TG)、胆固醇(cholesterol,TC),并取肝组织进行病理切片检查。结果宁夏枸杞叶对各组小鼠体重差异无统计学意义(P>0.05)。脂肪肝模型组小鼠肝脏的TC和TG含量明显高于空白对照组(P<0.01,P<0.05);枸杞叶干预组小鼠肝脏TC的含量低于脂肪肝模型组(P<0.05)。脂肪肝模型组肝细胞结构改变较为严重,并伴有炎细胞浸润及空泡样变;枸杞叶干预组肝细胞结构改变较轻,汇管区有少量炎细胞浸润。结论宁夏枸杞叶对酒精性脂肪肝小鼠有一定的保护作用。

宁夏枸杞不同品种叶的总黄酮含量及清除自由基能力分析

采用紫外分光光度法和DPPH法分别对宁夏枸杞不同品种叶的总黄酮含量及其清除自由基能力进行分析。结果表明:宁夏枸杞不同品种的叶总黄酮含量和清除自由基能力之间均存在显著性差异。其中宁杞菜1号叶的总黄酮含量极显著高于其它几个品种(**P<0.01),并且其清除自由基能力也最强,与其它品种之间差异显著(*P<0.05)。说明宁杞菜1号是开发枸杞茶的优良品种。

宁夏枸杞叶中的化学成分

目的研究中药宁夏枸杞叶中的化学成分。方法使用70%乙醇对宁夏枸杞叶进行提取,所得浸膏混悬后依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取。分别取乙酸乙酯层和正丁醇层,使用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、制备液相色谱及薄层色谱等色谱技术进行分离纯化,利用理化常数和核磁共振、质谱等波谱学技术对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果从宁夏枸杞叶70%乙醇提取物乙酸乙酯萃取层和正丁醇萃取层中分离鉴定了10个化合物,分别为对甲氧基苯甲酸(1),对甲氧基肉桂酸(2),东莨菪素(3),对羟基苯甲醛(4),对羟基苯乙酮(5),(Z)-2-亚乙基-3-甲基丁二酸(6),槲皮素(7),腺苷(8),东莨菪苷(9),芦丁(10)。结论化合物1,2,4,6,8为首次从枸杞属植物中分离得到,化合物3,5,9为首次从宁夏枸杞叶中分离得到。

宁夏无果枸杞叶改善肝肾阴虚型慢性传输型便秘的研究

目的观察宁夏无果枸杞叶对肝肾阴虚型慢性传输型便秘(STC)患者肠动力学的影响及临床疗效。方法将80例经辨证分型为肝肾阴虚型慢性传输型便秘患者按照随机数字表法分为治疗组和对照组,实验组分为宁夏无果枸杞叶低剂量组、中剂量组和高剂量组,分别予以3 g/次、6 g/次和12 g/次,每次用500 mL开水浸泡,餐后30 min温服;对照组给予六味地黄丸(8丸/次)口服,并饮水500 mL/次,2次/d。7 d为1个疗程,治疗2个疗程,比较4组治疗前后临床症状评分、肠电图变化和临床疗效。结果治疗前4组症状积分差异无统计学意义(P>0.05),无果枸杞叶治疗组患者低、中、高剂量组总有效率分别为70%、80%、85%,和对照组患者总有效率75%相比,差异无统计学意义(P>0.05)。4组治疗后各项临床症状评分均较本组治疗前降低(P<0.05),且治疗组治疗后评分均低于对照组(P<0.05)。治疗前后各组结肠的平均幅值、频率和正常慢波百分比差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,低剂量组和中剂量组结肠的平均幅值、频率和慢波百分比与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);高剂量组结肠正常慢波百分比与对照组差异无统计学意义(P>0.05),升结肠的平均频率在不同治疗剂量下的差异有统计学意义(P<0.05),且高剂量组的显著高于对照组(P<0.05);横结肠和降结肠的平均幅值在不同治疗剂量下的差异有统计学意义(P<0.05),且高剂量组的显著高于对照组(P<0.05)。结论中、高剂量宁夏无果枸杞叶可有效缓解肝肾阴虚型慢性传输型便秘患者的临床症状,高剂量宁夏无果枸杞叶改善便秘的机制可能与影响结肠传输功能有关。

宁夏无果枸杞叶提取物对衰老小鼠海马神经细胞增殖及凋亡的影响

目的:观察宁夏无果枸杞叶提取物(FLE)对衰老小鼠脑海马区神经细胞增殖、凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的影响。方法:13月龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为老年对照组和FLE低剂量组(FLE1组)、FLE中剂量组(FLE2组)、FIE高剂量组(FLE3组),6月龄为成年对照组。FLE1组、FIE2组、FLE3组分别用5 mg/kg、10 mg/kg、20 mg/kg FLE灌胃,0.2 mmol/I/(10 g·d),老年及成年对照组灌胃等量生理盐水,持续8周。流式细胞术检测海马区神经细胞凋亡率,免疫荧光组织化学方法观察小鼠海马齿状回神经细胞的增殖。免疫组化SP法及WesternBlot技术检测小鼠海马区凋亡蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达,结果:流式细胞术检测结果显示,各组均检测到早期凋亡细胞,与成年对照组比较,老年对照组早期细胞凋亡率明显增多(P<0.05);FLE2组、FLE3组早期细胞凋亡率明显低于FLEl组和老年对照组(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示:老年对照组海马齿状回神经细胞增殖率较成年对照组低(P<0.05),FLE2及FLE3组小鼠海马齿状回神经细胞增殖率较老年对照组增高(P<0.05)。免疫组化及Western Blot检测结果显示:老年对照组海马区Bcl-2蛋白的表达较成年对照组低(P<0.01);Bax、Caspase-3蛋白的表达较成年对照组高(P<0.01);FLE2及FLE3组Bcl-2蛋白的表达较老年对照组增加(P<0.01);Bax、Caspase-3蛋白的表达量较老年对照组降低(p<0.01)。结论:中、高浓度的FLE能够促进海马区神经细胞的增殖,提高凋亡蛋白Bcl-2表达,降低Bax、Caspase-3蛋白的表达,减少神经细胞的凋亡,发挥抗衰老作用。

超声提取枸杞叶中总黄酮提取工艺及其不同采收期含量变化研究

目的:优选超声辅助提取宁夏枸杞叶总黄酮的提取工艺并测定其不同采收期总黄酮含量。方法:分别研究乙醇浓度,乙醇用量,超声时间,超声温度4个单因素对提取效果的影响,并设计正交试验,所得结果采用方差分析。利用优选出的最佳超声提取工艺测定比较不同采收期枸杞叶中的总黄酮含量。结果:确定了最佳单因素水平,通过正交试验优选出超声辅助提取枸杞叶总黄酮的最佳工艺条件为乙醇体积分数65%、乙醇用量1:60、超声提取时间35 min、超声温度70℃。结论:通过比较不同采收时期枸杞叶总黄酮的含量,结果为5月中旬含量最高。

微波提取枸杞叶中总黄酮工艺及其不同采收期含量变化

目的:优选微波辅助提取宁夏枸杞叶总黄酮的提取工艺并测定其不同采收期总黄酮含量。方法:分别考察乙醇体积分数、料液比、微波时间、微波电流强度4个单因素对提取效率的影响,并设计正交试验,所得结果采用方差分析。利用优选出的最佳微波提取工艺测定比较不同采收期枸杞叶中的总黄酮含量。结果:确定了最佳单因素水平,通过正交试验优选出微波辅助提取枸杞叶总黄酮的最佳工艺条件为乙醇体积分数55%、料液比1∶45、微波提取时间40 s、微波电流强度60 mA。结论:通过比较不同采收时期枸杞叶总黄酮的含量,结果为5月中旬含量最高。