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水稻遗传转化甘露糖安全筛选体系的建立 被引量:7
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作者 王彩芬 付永彩 +3 位作者 朱作峰 徐杰 葛占宇 孙传清 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期41-45,共5页
根据genebank中公布的pmi基因序列设计引物,通过PCR扩增从大肠杆菌中分离出6-磷酸甘露糖异构酶基因。将该基因替换植物表达载体pCAMBIA1300中的潮霉素抗性基因hpt,构建了以pmi为选择标记基因的植物表达载体pPMI。对水稻进行了基因枪转... 根据genebank中公布的pmi基因序列设计引物,通过PCR扩增从大肠杆菌中分离出6-磷酸甘露糖异构酶基因。将该基因替换植物表达载体pCAMBIA1300中的潮霉素抗性基因hpt,构建了以pmi为选择标记基因的植物表达载体pPMI。对水稻进行了基因枪转化和农杆菌转化,研究了筛选培养基中甘露糖浓度对抗性愈伤组织频率的影响。部分抗性愈伤组织已获得再生植株,PCR检测初步证明外源基因已转入植物细胞。 展开更多
关键词 6-磷酸甘露糖异构酶基因(pmi) 甘露糖 安全筛选标记 水稻 遗传转化
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重组蛋白药物生产用哺乳动物细胞系构建中筛选标记的应用现状及审评思考 被引量:1
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作者 崔颖 白玉 程速远 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期2989-2993,共5页
对于重组蛋白药物开发,短时间内构建筛选高表达稳定的单克隆细胞株是工业界最主要的挑战。筛选标记是质粒载体中的关键元件,在生产细胞系的构建和筛选中发挥重要作用,通过设计筛选标记提高筛选严谨性,以获得稳定高产细胞株,是一种改进... 对于重组蛋白药物开发,短时间内构建筛选高表达稳定的单克隆细胞株是工业界最主要的挑战。筛选标记是质粒载体中的关键元件,在生产细胞系的构建和筛选中发挥重要作用,通过设计筛选标记提高筛选严谨性,以获得稳定高产细胞株,是一种改进细胞株开发工艺的有效手段。本文以中华仓鼠卵巢(Chinese hamaster overy,CHO)细胞为例,介绍筛选标记在重组蛋白药物生产用哺乳动物细胞系构建中的应用,设计筛选标记以提高筛选严谨性的方法,以及细胞基质稳定性及筛选标记安全性的审评思考,以期为药物研发机构高效开发重组蛋白药物提供参考。 展开更多
关键词 重组蛋白药物 中华仓鼠卵巢细胞 筛选标记 筛选严谨性 细胞基质稳定性 筛选标记安全
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