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安徽乌菜DNA提取与InDel引物筛选
被引量:
3
1
作者
马福萌
王明霞
+4 位作者
刘童光
张其安
方凌
王本勤
刘雪静
《中国瓜菜》
CAS
2014年第2期36-38,共3页
利用改良的SDS法提取了153个品种的安徽乌菜DNA,并进行2次重复,均获得了较理想的DNA产物。通过试验确定了安徽乌菜InDel-PCR的10μL最佳反应体系:1×PCR Buffer 1μL,dNTP 0.2μL,引物1μL,Taq E 0.1μL,DNA 1μL,ddH2O 6.7μL;最佳...
利用改良的SDS法提取了153个品种的安徽乌菜DNA,并进行2次重复,均获得了较理想的DNA产物。通过试验确定了安徽乌菜InDel-PCR的10μL最佳反应体系:1×PCR Buffer 1μL,dNTP 0.2μL,引物1μL,Taq E 0.1μL,DNA 1μL,ddH2O 6.7μL;最佳PCR扩增反应程序:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,55℃退火40 s,72℃延伸40 s,共36个循环,最后72℃延伸10 min,10℃保存。从供试的66对InDel引物中筛选出31对适合安徽乌菜、条带清晰、重复性高、多态性好的引物,为安徽乌菜品种鉴定、遗传多样性分析等奠定了基础。
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关键词
安徽乌菜
DNA提取
INDEL
引物筛选
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职称材料
安徽乌菜SRAP技术体系的优化
2
作者
王明霞
严从生
+2 位作者
江海坤
马绍鋆
方凌
《中国瓜菜》
CAS
2013年第2期30-32,共3页
以合肥黄心乌为试材,利用正交试验设计,对SRAP-PCR反应体系中的Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq聚合酶浓度和模板DNA浓度进行5因素4水平的筛选分析,用me3-em3引物组合进行PCR扩增以确定最佳反应体系。结果表明,安徽乌菜SRAP-PCR最...
以合肥黄心乌为试材,利用正交试验设计,对SRAP-PCR反应体系中的Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq聚合酶浓度和模板DNA浓度进行5因素4水平的筛选分析,用me3-em3引物组合进行PCR扩增以确定最佳反应体系。结果表明,安徽乌菜SRAP-PCR最佳反应体系为:10×PCR buffer 1μL,Mg2+ 3.0mmol·L-1,dNTPs 0.2mmol·L-1,引物各0.5mol·L-1,模板DNA 4.0ng·μL-1,Taq聚合酶0.05U·μL-1,总体积为10μL。利用此反应体系对安徽乌菜进行PCR扩增并电泳检测,其结果清晰、稳定、可靠,可用于安徽乌菜的遗传分析。
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关键词
安徽乌菜
SRAP
正交
体系优化
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职称材料
题名
安徽乌菜DNA提取与InDel引物筛选
被引量:
3
1
作者
马福萌
王明霞
刘童光
张其安
方凌
王本勤
刘雪静
机构
安徽农业大学园艺学院
安徽省农业科学院园艺研究所
出处
《中国瓜菜》
CAS
2014年第2期36-38,共3页
基金
国家大宗蔬菜产业技术体系(GARS-25-G-18)
安徽省蔬菜产业技术体系(皖农科[2011]6)
+1 种基金
安徽省重大科技专项(1201a0301009)
安徽省农业科学院种子工程(13D0303)
文摘
利用改良的SDS法提取了153个品种的安徽乌菜DNA,并进行2次重复,均获得了较理想的DNA产物。通过试验确定了安徽乌菜InDel-PCR的10μL最佳反应体系:1×PCR Buffer 1μL,dNTP 0.2μL,引物1μL,Taq E 0.1μL,DNA 1μL,ddH2O 6.7μL;最佳PCR扩增反应程序:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,55℃退火40 s,72℃延伸40 s,共36个循环,最后72℃延伸10 min,10℃保存。从供试的66对InDel引物中筛选出31对适合安徽乌菜、条带清晰、重复性高、多态性好的引物,为安徽乌菜品种鉴定、遗传多样性分析等奠定了基础。
关键词
安徽乌菜
DNA提取
INDEL
引物筛选
Keywords
Anhui Wucai
DNA extraction
InDel
Primer screening
分类号
S634.4 [农业科学—蔬菜学]
下载PDF
职称材料
题名
安徽乌菜SRAP技术体系的优化
2
作者
王明霞
严从生
江海坤
马绍鋆
方凌
机构
安徽省农业科学院园艺研究所
出处
《中国瓜菜》
CAS
2013年第2期30-32,共3页
基金
安徽省农业科学院院长青年创新基金(11B0322)
文摘
以合肥黄心乌为试材,利用正交试验设计,对SRAP-PCR反应体系中的Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq聚合酶浓度和模板DNA浓度进行5因素4水平的筛选分析,用me3-em3引物组合进行PCR扩增以确定最佳反应体系。结果表明,安徽乌菜SRAP-PCR最佳反应体系为:10×PCR buffer 1μL,Mg2+ 3.0mmol·L-1,dNTPs 0.2mmol·L-1,引物各0.5mol·L-1,模板DNA 4.0ng·μL-1,Taq聚合酶0.05U·μL-1,总体积为10μL。利用此反应体系对安徽乌菜进行PCR扩增并电泳检测,其结果清晰、稳定、可靠,可用于安徽乌菜的遗传分析。
关键词
安徽乌菜
SRAP
正交
体系优化
Keywords
Anhui Wucai
SRAP
Orthogonal design
Optimization
分类号
S565.4 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
安徽乌菜DNA提取与InDel引物筛选
马福萌
王明霞
刘童光
张其安
方凌
王本勤
刘雪静
《中国瓜菜》
CAS
2014
3
下载PDF
职称材料
2
安徽乌菜SRAP技术体系的优化
王明霞
严从生
江海坤
马绍鋆
方凌
《中国瓜菜》
CAS
2013
0
下载PDF
职称材料
已选择
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