安络小皮伞菌丝体多糖的提取及其抗脂质过氧化作用的研究

通过单因子和正交实验确定安络小皮伞菌丝体粗多糖提取的最优条件为:料水质量体积比1∶30、提取温度70℃、提取时间2h、提取次数1次,在此条件下粗多糖的提取率达到11.45%。纯化后的多糖用硫代巴比妥酸(TBA)法测定EDTA-2Na-Fe2+-H2O2系统诱导大鼠肝匀浆的脂质过氧化物丙二醛(MDA)的含量,结果表明,纯化的多糖对脂质过氧化有明显的抑制作用,以0.4倍体积沉淀多糖的效果最佳,达到98%。

安络小皮伞胞外及胞内多糖体外抗氧化性的研究

为了充分利用安络小皮伞菌资源,通过液体深层发酵获得安络小皮伞菌丝体及发酵滤液,采用水提醇沉法提取菌丝体胞内多糖,采用醇沉法提取发酵滤液胞外多糖。通过体外实验研究安络小皮伞胞外及胞内多糖对羟自由基、超氧阴离子、DPPH的清除作用以及对H2O2诱导的红细胞氧化溶血和大鼠肝匀浆脂质过氧化的抑制作用。结果表明,胞外、胞内多糖对羟自由基均具有显著的清除作用,对超氧阴离子、DPPH的清除作用以及对大鼠肝匀浆脂质过氧化的抑制作用良好,对H2O2诱导的红细胞氧化溶血抑制作用较弱,相同浓度时胞内多糖的抗氧化活性高于胞外多糖。

安络小皮伞醇提物中镇痛成分麦角甾醇和肉桂酸的含量测定

目的:建立一种测定安络小皮伞醇提物中麦角甾醇、肉桂酸含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。结果:本法线性关系良好。平均加样回收率麦角甾醇为98. 21 ,RSD为1. 12 (n=5);肉桂酸为99. 54 ,RSD为1. 63 (n=5)。结论:本法操作简便,结果准确,分离效果好。

安络小皮伞菌丝体多糖提取条件的研究

目的:探索安络小皮伞菌丝体粗多糖水浸提的最佳条件。方法:在单因子试验的基础上,采用合理的试验设计方案,应用响应面法(RSM)优化安络小皮伞粗多糖的提取条件。结果:依据回归分析确定粗多糖提取率的影响因子,求得最佳水浸提条件为:提取温度78℃、浸提时间1.5 h、液料比36∶1,粗多糖的提取率为11.59%。结论:在单因子试验的基础上采用响应面法对多糖提取条件优化合理可行,为提高安络小皮伞菌丝体多糖提取率提供理论依据。

安络小皮伞对大鼠的长时效镇痛作用

真菌安络小皮伞Marasmiusandrosaceus有镇痛作用 ,本实验旨在寻找其中的有效成分。电刺激 钾离子透入 甩尾法实验表明 ,安络小皮伞菌丝体水提醇沉物 (ANA)的镇痛效果与临床结果一致 ,即起效慢、时效长 ,并呈量效关系。每日腹腔注射10 0mg/kg ,连续 4天 ,其显著性药效 (P <0 .0 1)出现于第 3天 ,持续 8天。ANA中分子量小于 1万的多肽可能同镇痛有关。

安络小皮伞(Marasmius androsaceus)Mun141菌株的选育

作者采用分离、纯化和诱变等方法，运用液体发酵，筛选出安络小皮伞（Ｍａｒｓｍｉｕｓａｎｄｒｏｓａｃｅｕｓ）Ｍｕｎ１４１高产菌株经３０ｔ发酵罐放大试验，结果显示，平均氯仿提取物含量为１２．３８％（标准差±４５．３８），较原菌株（ＭａＡ）提高５０．２４％，且性能稳定．同时，筛选出适宜Ｍｕｎ１４１生长的７＃固面培养基．Ｍｕｎ１４１菌株在７＃固体培养基上，菌丝萌发早，生长速度快，粗壮浓密，色泽纯正，其生长量高出原１＃固面培养基５－７％

安络小皮伞提取物特征图谱研究

目的:采用高效液相色谱法建立安络小皮伞提取物的特征图谱。方法:通过对安络小皮伞提取物1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化,采用高效液相色谱法进行单糖组成分析。结果:安络小皮伞提取物特征图谱共检出5个峰,其中已通过对照品确定5个色谱峰的归属,安络小皮伞提取物水解产物中含有甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖。结论:该方法简单,快速,灵敏度高,重现性良好,可作为控制安络小皮伞提取物内在质量的标准。

安络小皮伞液体发酵过程中还原糖与pH值、菌丝干重及产量的关系

作者通过对安络小皮伞的液体发酵过程进行研究发现 :在安络小皮伞液体发酵过程中还原糖的变化呈一定规律性。在发酵过程中 ,随着总糖的逐渐消耗 ,还原糖含量呈下降趋势 ,且与pH值的变化呈正相关 ,与菌丝干重及产量的增加呈负相关 ,为安络小皮伞发酵的生产提供了重要的依据。

安络小皮伞菌糖肽理化性质与镇痛作用

目的研究安络小皮伞菌糖肽理化性质与镇痛作用。方法以镇痛作用为指导,通过乙醇沉淀、大孔树脂、凝胶柱层析等方法对安络小皮伞菌丝体发酵物水溶性成分进行分离,得到具有镇痛作用的纯化糖肽。以甲基化的方法研究其中糖苷键的连接方式。结果该糖肽中糖的部分是由Glc为非还原末端,以1→4连接的Glc为主链,在6位连接着Man、Glc和微量的Gal组成的侧链;该糖肽的肽部分由10种氨基酸组成。结论安络小皮伞菌丝体中分离得到的糖蛋白类成分具有镇痛作用,该部分含量占菌丝体的20%以上,是其镇痛作用的药效物质基础。

安络小皮伞〔Marasmius Androsaceusc(L.:Fr.)Fr.〕中水溶性多糖的研究——Ⅲ.多糖Fp_1与其中蛋白质结合方式的研究

用水提取的安络小皮伞多糖粗品中,含蛋白质15％,经Fchling试剂分级和甲醇分级,得含蛋白质6.5％的甘露聚糖F_(P1),再经sevag法脱去游离蛋白质,含结合蛋白质为6.3％。结合蛋白质经氨基酸分析含15种氨基酸;用温和碱处理实验,结果表明结合蛋白是由两条肽链组成,分别通过糖——丝氨酸苷键和糖——苏氨酸苷键与糖结合。

安络小皮伞镇痛作用糖蛋白纯化方法研究

目的探讨安络小皮伞镇痛作用糖蛋白纯化的方法。方法采用水溶醇沉法得到的安络小皮伞糖蛋白经离子交换柱层析、大孔树脂柱层析、超滤分离,并结合小鼠醋酸扭体抑制实验。结果不同分离方法得到的样品未见活性有明显差异,表明可能多种糖蛋白均具有镇痛作用。结论安络小皮伞的镇痛作用可能来自这些糖蛋白均具有的共同结构部分。

安络小皮伞［Marasmius androsaceus （L：Fr）Fr］中水溶性多糖的研究Ⅳ总糖及糖蛋白的分布、分级与测定

用水提取的安络小皮伞的多糖．经醇析．真空干燥后，用ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱层析，酚一Ｈ２ＳＯ４法检测其多糖分布，紫外吸收法（２８０ｎｎ）检测其蛋白质分布，表明提取物为多糖和糖蛋白的混合物，总糖含量为３０．５％。ｌｏｒｒｙ法和克氏定氮法测定蛋白质含量１５％。采用Ｐ．Ｃ和Ｇ．Ｃ法测定，结果提取物中的多糖由三种中性单糖组成．其摩尔比为：ＧＬＣ：Ｍａｎ，ＦＵＣ＝１．２：３：１．７。用Ｆｅｈｌｉｎｇ试剂法测定，表明混合物中有甘露聚精。Ｆｅｌｌｌｉｎｇ试剂法与甲醇、乙醇分级法相结合，从提取物中分出六个糖蛋白级分：Ｆｐ１、Ｆｐ２、Ｆｓ１、Ｆｓ２、Ｆｓ３和Ｆｓ４，其中Ｆｐ１、Ｆｓ１和Ｆｓ３经ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱测定为多糖分子量单一的级分。

安络小皮伞提取物对运动外伤的镇痛作用

为研究安络小皮伞提取物对运动外伤的镇痛作用,对其所含生物碱、多糖和麦角甾醇类等物质进行了定性检测并进行了小鼠醋酸扭体和小鼠热板镇痛试验。结果表明,安络小皮伞提取物中含有的成分能够消除并缓解小鼠各种神经疼痛,具有抗炎镇痛的功效。

安络小皮伞中水溶性多糖的研究——Ⅱ.甘葡聚糖FS3的纯化与结构研究

安络小皮伞（Marasmius androsaces L.Fr.）是一有药用价值的真菌,我们曾对其水溶性多糖进行系统研究(陈西广,等。真菌学报,1990,9（2）:155;白日霞,等。

安络小皮伞固体培养菌丝化学成分研究

自安络小皮伞Marasmius androsaceus(L.ex Fr.)Fr.固体培养菌丝中分得6种结晶性单体。经熔点测定和光谱分析,证实晶Ⅰ为三十碳酸,晶Ⅱ为2,3,5,6-四氯-1,4-二甲氧基苯,晶Ⅲ为β谷甾醇棕榈酸酯,晶Ⅳ为5,8-过氧麦角甾醇,晶Ⅴ为β-谷甾醇,晶Ⅵ为麦角甾醇。均系自安络小皮伞固体培养物中首次得到。其中晶Ⅰ和晶Ⅵ经药理实验证明有镇痛作用。

安络小皮伞菌丝体多糖的提取及其抗氧化性研究

研究将正交试验应用于安络小皮伞菌丝体多糖水浸提工艺的探索,求得最佳水浸提工艺条件为料水比1∶15、提取温度70℃、提取时间2h、提取次数2次。提取的粗多糖用乙醇对其进行分级沉淀,以各级乙醇沉淀所得多糖和为100%计,当乙醇的体积为提取液体积的4倍时,多糖沉淀量最大为39.61%。对·OH和·O-2的清除作用试验表明,安络小皮伞多糖对·OH、·O-2均有较好的清除作用。4倍醇沉多糖对·OH的清除率可达49.72%。1倍醇沉多糖对·O-2的清除率可达42.22%。

径向基神经网络结合近红外光谱技术分析安络小皮伞发酵组分的研究

采用径向基神经网络(RBFNN)结合近红外光谱(NIRS)技术建立一种分析安络小皮伞发酵菌丝体中甘露醇、多糖和腺苷三种组分的定量分析模型。收集164个安络小皮伞液体发酵菌丝体样本的近红外光谱数据,采用常规方法分别测定样本中甘露醇、多糖和腺苷的含量。在应用蒙特卡罗偏最小二乘法(MCPLS)识别异常样本、确定校正集样本数量的基础上,以逼近度(Da)为评价指标,采用可移动窗口径向基神经网络(MWRBFNN)筛选特征波长变量,筛选最佳光谱预处理方法、隐含层节点数(NH)等模型参数。建立甘露醇、多糖和腺苷组分定量分析模型,最佳RBFNN-NIRS模型中校正集和预测集样本实验测定值与预测值间相关系数分别为0.9274、0.9009、0.9440和0.9354、0.9018、0.8847,表明模型具有很好的拟合度和预测性能。

安络小皮伞中水溶性多糖的研究——Ⅰ.甘露聚糖 FP_1 的纯化与结构研究

从安络小皮伞水溶性多糖中分离纯化得一甘露聚糖 FP_1。分子量约为24万。经红外光谱、^+H-NMR 谱和亲和层析指明为β-甘露聚糖。结构分析采用高碘酸氧化、Smith 降解、完全甲基化 GC、GC-MS 与^(13)C-NMR 分析,分子的主链是β-D-(1→6)连接的甘露糖,支链为β-(1→3),β(1→2)甘露糖,分别连接在主链的 O-3和 O-2上。

碱提水溶性安络小皮伞多糖的研究——B_1 与 B_2 的分离纯化及结构研究

从曾用水提取过水溶性多糖的安络小皮伞残渣中用稀碱液提取了二种水溶多糖 B_1和B_2。它们分别给 Sepharose 4B 柱,2B 柱层析,超离心分析,醋酸纤维薄膜电泳鉴定,表明 B_1和 B_2均为纯多糖。采用气相色谱,红外光谱,淀粉酶解,甲基化分析等方法确定了它的基本结构。