质粒拷贝数对宋内氏菌I相O-抗原表达的影响

试图通过提高质粒拷贝数来提高宋内I相O 抗原的表达水平 ,先将宋内I相O 抗原基因亚克隆至高拷贝的pUC18和pGEM3Z ,但没能找到相应的阳性转化子 ,可能O 抗原基因在高拷贝质粒上表达水平太高对宿主产生毒性效应。再将其亚克隆至中等拷贝的pAT15 3,虽能找到阳性转化子 ,但表达水平仍不能满足以后实验的需要 ,表明质粒拷贝数与I相O 抗原的表达水平密切相关 ,要有效地表达宋内I相O 抗原 。

一起宋内氏菌引起的两所学校学生食物中毒案例探讨

2003年9月10日上午9时30分，卫生监督所接到举报：第一小学、第二小学部分学生发热、腹泻。9时40分卫生监督所派卫生监督人员分别赶赴现场进行调查并采取控制措施。

一起宋内氏志贺氏菌污染学校饮用水源引起的菌痢暴发的实验室分析

目的 茶陵县某乡中学发生了一起感染性腹泻暴发流行 ,为查明病因及时控制疫情 ,及时组织人员进行了流行病学调查和实验室检查。 方法 在开展流行病学、卫生学调查的同时 ,采集了患者肛拭子 48份 ,炊事员肛拭子 5份 ,井水样 1份 ,食堂生活用水 1份 ,餐具 10份用增菌培养基培养检测病原体及药敏试验。 结果 病原体为宋内氏志贺氏菌。为饮用水源污染所致的细菌性痢疾暴发流行。 结论 病原体对多种抗生素敏感。

北京市宋内氏志贺菌脉冲场凝胶电泳图谱研究

目的研究北京市2005～2006年分离的30株宋内氏志贺氏菌进行脉冲常凝胶电泳图谱特征。方法参照美国疾病预防控制中心PulseNet USA的统一方法进行脉冲常凝胶电泳,并对带型进行命名。采用BioNumerics图像分析软件做聚类分析。结果30株宋内氏志贺氏菌被分成17个带型,主要带型J16N11BJ0001到J16N11BJ0009的聚类相似性为92%,含概菌株占实验菌株总数的67%。结论建立北京市宋内氏志贺氏菌脉冲常凝胶电泳分析方法和初步带型数据库,获得了宋内氏志贺氏菌的主要克隆系。

一起学校中由宋内氏志贺菌引起的细菌痢疾暴发流行

目的:对两个小学腹泻病的住院病人病因进行细菌学检验。方法:按常法进行检验。结果:共检查住院病人、密切接触者等各类肛拭标本2 507份,阳性296份;各种相关饮用水37份,阳性4份;饮水机35台,阳性6份;餐具6份、菜肴3份均系阴性。结论:该校师生员工在早期系因被宋内志贺氏菌污染的饮水机和/或饮用水,而导致该两校的痢疾暴发流行。

宋内氏痢疾菌无毒株S7表达Vi抗原工程菌的构建

将含有编码Ｖｉ抗原ＶｉａＢ基因片断的质粒转导进入宋内氏痢菌无毒株Ｓ７中，组建了重组菌株Ｓ７Ｖｉ。质粒电泳图谱显示重组菌株Ｓ７Ｖｉ中存在被转入的外源质粒带。重组株的生化特性没有改变。菌体凝集及Ｖｉ抗血清标记的ＳＰＡ菌液凝集反应证明在重组株的菌体表面，同时表达了Ｖｉ抗原和内氏痢疾菌的Ｏ抗原。以５×１０＾８ＣＦＵ、１０×１０＾８ＣＦＵ的重组株免疫近交系的ＬＩＢＰ小鼠。

甘肃省宋内氏志贺氏菌的监测分析

目的了解志贺氏茼属在甘肃省的流行、变迁及耐药状况，给防治工作提供铱据。方法2005年5月-2007年10月对分离的宋内氏志贺氏菌株，依据细菌性痢疾、阿米巴痢疾诊断标准及处理原则进行血清学鉴定、生化试验及药幸喊验。结果共检测宋内氏志贺氏茼140株，分离菌株为多重耐药，耐药种类达8种。结论甘肃省2007年宋内氏志贺氏菌成为优势茼，耐药率逐年增加。

宋内氏志贺菌在学校食物中毒中检出及分析

目的:调查几起宋内氏志贺菌在学校中引发的食物中毒。方法:采集剩余食物、病人大便或肛拭等可疑标本,按GB/T4789.5-2003,参照《食品卫生检验方法注解微生物学部分》对发生在遂宁市大、中学校四起食物中毒进行检测。结果:2005.7～2007.4连续4例发生在市大、中学校食物中毒突发事件中,均检出宋内氏志贺菌。结论:在近3年发生在遂宁市学校由细菌引起的食物中毒事件中,主角全由宋内氏志贺菌担任。

应用脉冲场凝胶电泳技术对宋内氏志贺菌引起食物中毒的研究

目的运用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术对一起细菌性痢疾暴发分离株进行分析,了解分离株之间的遗传相关性,追溯传染源。方法对该起食物中毒中分离出的62株宋内氏志贺菌,用XbaI酶切进行PFGE分子分型,结果用BioNumerics软件UPGMA方法进行聚类分析,观察引起食物中毒的菌株是否为同源株。结果64株测试菌用XbaI酶切后产生7个PFGE带型,其中从病人分离45株和生肉分离1株带型完全相同,占分析菌株的70.31%。且流行病学资料显示有相关性,推测此食物为感染的主要来源之一;另外有病人分离11株带型完全相同,占分析菌株的17.19%,可能为感染的第二来源。结论食用未加工熟的猪肉菜肴是引发此次细菌性痢疾暴发的主要来源。

宋内氏痢疾菌侵袭相关基因的克隆与表达

用粘粒PJB8为载体,构建了宋内氏痢疾茵I相大质粒基因库,用菌落原位杂交,Western blot方法从文库中筛选到1株表达IpaA,B,C,D 4种蛋白的重组子,经重组质粒酶切和Southern blot等方法对宋内氏菌和福氏2a痢疾菌的侵袭相关基因片段作了初步比较分析。

1株与宋内氏志贺氏菌血清发生交叉凝集的类志贺邻单胞菌

目的对引起食物中毒的病原菌进行分离鉴定,为疫情的防控提供依据。方法采取腹泻患者水样便直接划线平皿上获纯培养菌、血清学试验、系统生化鉴定的方法。结果分离到一株与宋内氏志贺氏菌诊断血清发生强凝集的类志贺邻单胞菌。结论在细菌的分离鉴定中,如果仅仅以血清学反应做出判定,容易产生错误的结论,还必须做系统的生化鉴定,以保证细菌鉴定的准确性,为疫情的防控提供科学、正确的依据。

口服福氏2a和宋内氏痢疾双价活菌苗FS的研究

细菌性痢疾(菌痢)是世界范围内严重的卫生问题,据推算全世界每年约有两亿人染患痢疾,死亡人数约65万人左右.在我国,痢疾的发病率一直高居24种法定传染病之首,全国至少有200万例菌痢发生,(实际发病数为报告发病数的3～5倍),且以儿童、青壮年和老年人为主,因此,菌痢是严重危害人民健康的重要疾病.从痢疾菌流行菌型看,国内近年来一直以福氏2a型和宋内氏痢疾菌为优势流行菌,两种群型的痢疾菌引起的菌痢约占总菌痢的70%以上,因此如果能研制出同时预防福氏2a和宋内氏痢疾菌感染的菌苗,即可以显著降低和控制菌痢的发病率.

一起幼儿园宋内氏志贺菌食物中毒调查

目的查明事件的发生经过,分析引起食物中毒的原因。方法结合现场流行病学调查、现场卫生调查以及实验室检测方法,对中毒事件的原因进行分析。结果此次事件罹患率为27.56%;由于幼儿园的特殊性及未及时采集到样品,未查找到中毒食物;疾控中心实验室检出5株同源宋内氏志贺菌,医院检出1株宋内氏志贺菌。结论根据流行病学分析结果,结合实验室结果,判定此事件是一起由宋内氏志贺菌引起的食物中毒。

一起宋内氏志贺菌引起食源性痢疾爆发的耐药性分析

细菌性痢疾是肠道传染病发病较高的一种传染病,发病季节多在夏秋季,易造成痢疾爆发流行,给人民健康带来危害.通过对我市一起由宋内氏志贺菌引起的食源性痢疾爆发状况以及菌株的耐药性变化鉴定,为临床合理地适用抗菌药物和卫生防疫工作提供科学依据.

宋内氏志贺氏菌病暴发流行的血清学检测分析

1994年7月13日～8月27日，甘肃省积石山县居集乡劳动村，发生一起不明原因的流行性腹泻。为了探讨病因，有效地控制腹泻病流行。我们采用BA－ELISA（生物素──酶联免疫吸附）法测定了病人血清中宋内氏志贺氏菌IgA抗体，结果11价病人血清全部阳性，抗体滴度在1：32～1：1024之间。同时从1例未用药患者粪便中分离出1株宋内氏志贺氏菌。经血清学和病原学检测分析，这次腹泻病流行是由宋内氏志贺氏菌引起的。

抗宋内氏志贺菌脂多糖单克隆抗体对小鼠免疫保护作用的初步研究

本文用宋内氏志贺菌加热致死后的菌体免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，以纯化脂多糖筛选，获得２株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株，并以小鼠腹腔感染作为实验动物模型，进行单克隆抗体被动保护实验。结果表明，在攻击前输入单克隆抗体，对同型菌感染有显著保护作用，保护率随抗体剂量增加而增高。提示识别脂多糖分子上某一抗原决定簇的抗体，能够对感染起到良好的保护作用。脂多糖是志贺菌毒力相关因子之一。

菌体抗原“缺失”的宋内氏志贺菌研究

目的:研究O抗原"缺失"的宋内氏志贺菌其它生物学性状的变化情况。方法:检测试验菌株的生化特性和对抗生素的敏感性,以及用多种批号的诊断血清进行凝集试验。结果:具有典型的宋内氏志贺菌的生化特性;与对照菌相比,有较高抗生素耐药性,对复方新诺明等多种抗生素耐药。与效期内的多批宋内氏志贺菌诊断血清不能产生凝集反应,而对照菌凝集良好。结论:该株宋内氏志贺菌的O抗原表达减弱,同时药敏谱也产生明显的改变。

抗宋内氏志贺氏菌脂多糖单克隆抗体的制备、鉴定及其免疫保护和临床应用研究

细菌性痢疾是国内常见病、多发病。本研究用宋内氏菌加热致死后菌体抗原免疫BALB/c小鼠,纯化脂多糖筛选,通过细胞融合获得2株抗宋内氏菌脂多糖单克隆抗体杂交瘤细胞株。经鉴定,2株杂交瘤细胞染包体数目分别为91和105,抗体亚类分别为IgG3、IgG2a;腹水效价分别为1∶6.4×106、1∶3.2×106。经过连续传代四个月冻存,半年后复苏仍稳定分泌抗体。交叉反应试验表明,2株单克隆抗体与痢疾志贺氏菌、福氏菌。