基于定向固定化抗体的侧向流免疫检测试纸建立食用油中玉米赤霉烯酮的检测方法

目的基于定向固定化抗体的侧向流免疫检测试纸建立食用油中玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)的检测方法,并考察市售食用油中ZEN污染状况。方法通过链球菌蛋白G将ZEN抗体定向固定化在铕荧光微球上制备了免疫探针,构建侧向流免疫检测(lateral flow immunoassay,LFIA)试纸,并建立了食用油中ZEN含量的快速检测方法,并对65个市售食用油样品中的ZEN含量进行了检测。结果采用抗体定向固定化方式制备免疫探针可以使检测曲线线性范围收窄,提高试纸的检测精密度。建立的食用油中ZEN快速检测方法前处理步骤只需1步,检测用时仅15 min。方法的检出限为3.93μg/kg,线性范围为22.40~800.00μg/kg。市售食用油样品中ZEN的检出率为58.5%,其中,玉米油中的ZEN检出率为100%,且ZEN含量最高。结论本研究成功制备了可以快速、准确检测食用油中ZEN含量的侧向流免疫层析试纸,并且所探究的抗体定向固定化技术对于提高其他小分子污染物免疫检测技术的分析性能具有参考价值。

基于蛋白A定向固定抗体的触珠蛋白压电免疫传感器的研究

用蛋白A-金电极法将触珠蛋白抗体固定在9 MHz镀金石英晶体比表面,研制了一种简单、灵敏的压电免疫传感器,用于溶血性贫血与严重肝病标志物-触珠蛋白的高特异性检测.比较了传感器采用直接金电极吸附法、牛血清白蛋白吸附-戊二醛交联法和蛋白A法三种固定抗体的方法.研究了蛋白A的定向自组装、抗体的固定化浓度和免疫反应时间等主要因素对免疫传感检测灵敏度的影响,并考察了传感器响应与再生性能.测得该免疫传感器检测人血清中触珠蛋白的线性浓度范围为1.27～31.7 mg/L.