集胞藻ORFs侧翼序列的PCR扩增和定向基因插入失活策略

针对集胞藻ＰＣＣ６８０３的１９２７个待定编码基因进行了两侧序列的ＰＣＲ扩增。４个亚株基因组在。ｓｌｌ０２６７－ｓｌｌ０２６８－ｓｌｌ０２６９区域的 ＰＣＲ扩增产物与 Ｋａｚｕｓａ ＤＮＡ数据存在差异。以叶绿素合成基因ｃｈｌＨ和ｃｈｌＬ为例，显示三片段连接ＰＣＲ产物可有效用于集胞藻６８０３基因组定向插入失活。

小肽多拷贝基因表达载体的构建及其高效表达(英文)

介绍一种快速、高效构建小肽多拷贝基因表达载体的策略 ,并构建了相应的表达载体pETE coT .用人工合成的编码 2 8个氨基酸残基的胸腺素α1基因为模型 ,采用限制酶EcoT14I识别序列CCAAGG为小肽基因两末端序列 ,利用其酶切后可产生非镜相对称粘性末端 ,一次连接反应就构建出一系列不同基因拷贝数的表达载体 ;在小肽基因两端分别引进编码FactorXa和羟胺蛋白切割位点的序列 ,表达出的融合蛋白可被FactorXa和羟胺剪切出不残留任何外源氨基酸的小肽 .不同拷贝数的小肽融合蛋白在大肠杆菌BL2 1(DE3)中均获得高效表达 .

反义IGF－IR逆转录病毒载体的构建及抑制血管平滑肌细胞增殖的初步观察

反义ＩＧＦ－ＩＲ逆转录病毒载体的构建及抑制血管平滑肌细胞增殖的初步观察张吉辉，董薇，邱京欣，赵民清北京医科大学心血管基础研究所李岱宗，汤健，周爱儒应用重组ＤＮＡ技术，将ＩＧＦ－ＩＲβ亚基ｃＤＮＡ定向插入逆转录病毒载体ｐＤｏｌ，构建出反义ＩＧＦ－ＩＲ逆...

猪印记基因Igf2真核表达载体的构建和表达

胰岛素样生长因子2(Igf2)是第一个被发现的母源印记基因,在胎儿发育、肿瘤细胞增殖等方面具有重要的调控作用。孤雌胎儿死亡及许多遗传病,尤其是肿瘤发生,与Igf2基因异常表达存在着密切关系。本实验首先采用RT-PCR方法从猪肝脏cDNA中扩增出猪Igf2(GenBank:HQ450752.1)全长cDNA序列。经NheI和EcoRI进行双酶切后。