为探讨Bla g 2的E233A突变对抗原抗体相互作用的影响,从RCSB数据库下载德国小蠊致敏原Bla g 2野生型及其单克隆抗体4C3的NMR结构,运用Swiss PDB Viewer将Bla g 2野生型(E233-93Q)构建为突变型(E233A-93Q)三维结构;并将Bla g 2野生型和...为探讨Bla g 2的E233A突变对抗原抗体相互作用的影响,从RCSB数据库下载德国小蠊致敏原Bla g 2野生型及其单克隆抗体4C3的NMR结构,运用Swiss PDB Viewer将Bla g 2野生型(E233-93Q)构建为突变型(E233A-93Q)三维结构;并将Bla g 2野生型和突变型分别与其单克隆抗体4C3进行分子动力学模拟和蛋白-蛋白对接.结果表明:突变体E233A与单克隆抗体4C3结合能力下降,进而增加了与Ig E的结合力,可能加重过敏反应的发生.展开更多
TILLING(Targeting Induced Local Lesions in Genomes)是功能基因组研究中应用的一种反向遗传学技术。它能高通量、低成本地在EMS诱变群体中鉴定出发生在特定基因上的点突变。在其基础上发展出的EcoTILLING技术可发现种质资源中的SNP...TILLING(Targeting Induced Local Lesions in Genomes)是功能基因组研究中应用的一种反向遗传学技术。它能高通量、低成本地在EMS诱变群体中鉴定出发生在特定基因上的点突变。在其基础上发展出的EcoTILLING技术可发现种质资源中的SNP位点及小插入或缺失多态性位点。水稻是非常重要的粮食作物,也是已经完成了全基因组序列测定,有丰富的生物信息学资源可以利用的基因组研究模式植物。水稻的分子标记辅助育种将在育种中扮演越来越重要的角色。在这样的背景下,从基于特定基因的种质资源鉴定、EMS诱变育种、及水稻功能标记开发等方面论述了TILLING在水稻育种中的应用前景。展开更多
目的:建立适用于筛选伽马射线诱发突变的、基于高分辨率熔解曲线(high-resolution melting,HRM)技术的高通量定向诱导基因组局部突变技术(Targeting Induced Local Lesions IN Genomes,TILLING)体系。创新点:建立起了基于HRM技术、适用...目的:建立适用于筛选伽马射线诱发突变的、基于高分辨率熔解曲线(high-resolution melting,HRM)技术的高通量定向诱导基因组局部突变技术(Targeting Induced Local Lesions IN Genomes,TILLING)体系。创新点:建立起了基于HRM技术、适用于伽玛射线诱发的小片段插入/缺失突变的高通量TILLING体系(HRM-TILLING)。方法:通过不同野生型/突变型比例混池DNA的HRM分析,确定HRM检测不同类型插入/缺失突变的能力,确定M2植株突变检测的适宜混池比例,并用一个伽玛诱变M2群体(n=4560)筛选Os LCT1和SPDT两个基因的突变体,确定实际效果。结论:以4株M2植株混样,采用HRM可以有效检出突变。建立的基于HRM的TILLING体系适用于伽玛射线诱发突变的高通量筛选。展开更多
定向诱导基因组局部突变技术(Targeting Induced Local Lesions IN Genomes,简称TILLINC)是一种全新的、高通量和低成本反向遗传学研究方法。近年来,随着突变筛选技术的革新,TILLING技术平台日趋多元化,使得TILLING技术的操作更为简单...定向诱导基因组局部突变技术(Targeting Induced Local Lesions IN Genomes,简称TILLINC)是一种全新的、高通量和低成本反向遗传学研究方法。近年来,随着突变筛选技术的革新,TILLING技术平台日趋多元化,使得TILLING技术的操作更为简单、快速,并广泛应用于作物育种研究领域。简要介绍了TILLING技术平台的最新发展动态,并初步探讨了将辐射诱变处理与TILLING高通量筛选相结合在诱变育种中的应用前景。展开更多
文摘为探讨Bla g 2的E233A突变对抗原抗体相互作用的影响,从RCSB数据库下载德国小蠊致敏原Bla g 2野生型及其单克隆抗体4C3的NMR结构,运用Swiss PDB Viewer将Bla g 2野生型(E233-93Q)构建为突变型(E233A-93Q)三维结构;并将Bla g 2野生型和突变型分别与其单克隆抗体4C3进行分子动力学模拟和蛋白-蛋白对接.结果表明:突变体E233A与单克隆抗体4C3结合能力下降,进而增加了与Ig E的结合力,可能加重过敏反应的发生.
文摘TILLING(Targeting Induced Local Lesions in Genomes)是功能基因组研究中应用的一种反向遗传学技术。它能高通量、低成本地在EMS诱变群体中鉴定出发生在特定基因上的点突变。在其基础上发展出的EcoTILLING技术可发现种质资源中的SNP位点及小插入或缺失多态性位点。水稻是非常重要的粮食作物,也是已经完成了全基因组序列测定,有丰富的生物信息学资源可以利用的基因组研究模式植物。水稻的分子标记辅助育种将在育种中扮演越来越重要的角色。在这样的背景下,从基于特定基因的种质资源鉴定、EMS诱变育种、及水稻功能标记开发等方面论述了TILLING在水稻育种中的应用前景。
基金Project supported by the National Key Research and Development Program of China(No.2016YFD0102103)
文摘目的:建立适用于筛选伽马射线诱发突变的、基于高分辨率熔解曲线(high-resolution melting,HRM)技术的高通量定向诱导基因组局部突变技术(Targeting Induced Local Lesions IN Genomes,TILLING)体系。创新点:建立起了基于HRM技术、适用于伽玛射线诱发的小片段插入/缺失突变的高通量TILLING体系(HRM-TILLING)。方法:通过不同野生型/突变型比例混池DNA的HRM分析,确定HRM检测不同类型插入/缺失突变的能力,确定M2植株突变检测的适宜混池比例,并用一个伽玛诱变M2群体(n=4560)筛选Os LCT1和SPDT两个基因的突变体,确定实际效果。结论:以4株M2植株混样,采用HRM可以有效检出突变。建立的基于HRM的TILLING体系适用于伽玛射线诱发突变的高通量筛选。
文摘定向诱导基因组局部突变技术(Targeting Induced Local Lesions IN Genomes,简称TILLINC)是一种全新的、高通量和低成本反向遗传学研究方法。近年来,随着突变筛选技术的革新,TILLING技术平台日趋多元化,使得TILLING技术的操作更为简单、快速,并广泛应用于作物育种研究领域。简要介绍了TILLING技术平台的最新发展动态,并初步探讨了将辐射诱变处理与TILLING高通量筛选相结合在诱变育种中的应用前景。