定向诱导基因组局部突变技术研究及应用进展

定向诱导基因组局部突变(TILLING)技术是反向遗传学中研究功能基因的一种全新的方法。TILLING技术借助高通量检测手段,快速有效地从突变群体中鉴定出点突变。系统介绍了TILLING技术的基本原理和技术路线,同时总结了TILLING技术本身有待解决的一些问题。

TILLING技术的原理与方法述评

TILLING,即Targeting Induced Local Lesions IN Genomes(定向诱导基因组局部突变技术),是由美国Fred Hutchinson癌症研究中心Steven Henikoff领导的研究小组发展起来的,是一种全新的反向遗传学研究方法。TILLING技术借助高通量的检测手段,快速有效地从由化学诱变剂(EMS)诱变过的突变群体中鉴定出点突变。目前,TILLING已被应用于多种生物的研究中。本文系统介绍了TILLING技术的基本原理、技术路线及其技术优势,同时列举了TILLING的应用实例,并展望了TILLING技术的应用前景。

琼脂糖凝胶电泳在水稻EcoTILLING技术中的应用

为构建低成本的基于琼脂糖凝胶电泳的EcoTILLING技术体系,用于水稻及其他生物自然群体变异的检测,对基于琼脂糖凝胶的EcoTILLING技术进行了优化。结果表明,从芹菜中提取的CELⅠ核酸酶粗提物结合琼脂糖凝胶电泳检测技术,可以成功地检测到目的基因位点的突变。利用该技术,在云南地方水稻品种大吊糯中检测到2个SNPs。

TILLING在水稻育种中的应用前景

TILLING(Targeting Induced Local Lesions in Genomes)是功能基因组研究中应用的一种反向遗传学技术。它能高通量、低成本地在EMS诱变群体中鉴定出发生在特定基因上的点突变。在其基础上发展出的EcoTILLING技术可发现种质资源中的SNP位点及小插入或缺失多态性位点。水稻是非常重要的粮食作物,也是已经完成了全基因组序列测定,有丰富的生物信息学资源可以利用的基因组研究模式植物。水稻的分子标记辅助育种将在育种中扮演越来越重要的角色。在这样的背景下,从基于特定基因的种质资源鉴定、EMS诱变育种、及水稻功能标记开发等方面论述了TILLING在水稻育种中的应用前景。

一种用于水稻点突变检测的PCR引物设计方法

介绍了一种用于水稻点突变检测的PCR引物设计方法。利用该方法根据12个候选基因序列设计了12对引物,其中10对引物可以正常工作,能从基因组中扩增出特异性条带,合格率为83%,并且成功地在突变体中检测到点突变。这一方法不仅可以用于水稻,也可以用于其他动植物。同时,对引物设计过程中常见问题进行了讨论并给出了解决办法。

TILLING技术的最新进展及其在辐射诱变育种中的应用前景

定向诱导基因组局部突变技术(Targeting Induced Local Lesions IN Genomes,简称TILLINC)是一种全新的、高通量和低成本反向遗传学研究方法。近年来,随着突变筛选技术的革新,TILLING技术平台日趋多元化,使得TILLING技术的操作更为简单、快速,并广泛应用于作物育种研究领域。简要介绍了TILLING技术平台的最新发展动态,并初步探讨了将辐射诱变处理与TILLING高通量筛选相结合在诱变育种中的应用前景。