抗-A、抗-B定型血清染色剂的选择

我国的抗-A定型血清标志颜色与国际通用的颜色基本一致,都为兰色或绿色;而抗-B定型血清很多地区使用伊红将其染成红色,与国际普遍采用黄色相去甚远。针对使用吖啶类药物的人血清中可能产生抗吖啶黄抗体,定型时与用吖啶黄染色的抗-B血清接触会出现假阳性结果的说法,笔者将国内常用的美兰、伊红、吖啶黄作为染色剂分别加入抗-A、抗-B定型血清、对其颜色、亲合力、效价、特异性等指标进行了7个月的实验观察,现报告如下。

5种大肠杆菌O抗原定型血清的制备

本研究以大肠杆菌参考菌株CVCC1369(O26)、CVCC3800(O153)、CVCC1489(O157)、CVCC3739(O159)、CVCC3807(O163)为菌种制备免疫抗原并免疫家兔,获得5种大肠杆菌O抗原定型原血清,而后制备多种吸收抗原以消除5种原血清的非特异性凝集素。通过微量凝集试验的方法,确定各血清的凝集价。最终确定了5种大肠杆菌O抗原定型血清的制备方法,为进一步改进大肠杆菌O抗原定型血清的制备工艺提供了思路和依据。

用气管环培养中和试验对鸡传染性支气管炎病毒进行血清定型

用18～20口龄鸡胚气管环培养物,以纤毛运动及上皮细胞变性脱落作为指示系统,恒量病毒和变量血清作中和试验,对广西分离的、能引起不同程度肾病变的4株 IBV 进行血清定型.终点滴度结果表明,其中 G 与 C 株属 Holte 血清型,而 Z 和 Q 株属Massachusetts 型。

动物绿脓杆菌血清学定型研究

绿脓杆菌是一种条件性病原菌,在自然界分布广泛,对人畜危害严重,早已为医学界所重视,并在血清学诊断、分型等方面进行了研究。1983年美籍华人 P.V.Liu 综合德、日、法等国的分型表,提出了一个比较完整的国际抗原分型表(IATS),将绿脓杆菌分为17个血清型。我国医学界则以袁昕的分型为基础。

羊水细胞、脐血细胞ABO血型PCR-SSP法基因定型与血清学定型比较

目的探讨羊水细胞、脐血细胞ABO血型的PCR-SSP基因定型方法的可靠性。方法采集孕妇羊水细胞和新生儿脐血细胞,ABO基因定型用PCR-SSP法,血清学定型用低离子溶液常规单克隆标准血清方法。结果69例羊水细胞、脐血细胞标本均检测出ABO基因型,两者基因定型完全一致。脐血ABO血清学血型与脐血细胞及羊水细胞ABO基因型血型有显著性差异(P<0.01)。羊水细胞血清学定型与羊水细胞和脐血细胞基因定型有非常显著差异(P<0.001)。脐血细胞血清学定型与羊水细胞血清学定型有显著性差异(P<0.05)。结论PCR-SSP方法检测羊水细胞及脐血细胞ABO基因型可准确诊断胎儿及新生儿ABO血型,值得推广。

自制ABO基因定型试剂盒的应用评估

目前,国内红细胞实验室A B O血型鉴定工作主要是利用血型血清学方法,但存在一定缺陷[1]。以DNA为检材的基因分型技术克服了血型血清学方法的限制,已是一种独立简便的分型方法,为临床解决了一些疑难血型鉴定问题,得到广泛应用。从提高输血安全性方面考虑,向临床提供基因定型相符的血液产品是大势所趋,因此,ABO基因分型技术也是红细胞实验室的技术发展方向[2]。

表型为CC或Cc19名RhD(-)中国无关供血者中的RHD基因多态性

目的：探讨ＲｈＤ（－）中国无关供血者中ＲＨＤ基因的基因构成情况。方法：采用ＰＣＲ－ＳＳＰ方法对３４名ＲｈＤ（－）的中国供血者的基因组ＤＮＡ进行研究。主要扩增ＲＨＤ基因外显子２、３、４、５、６、７、９、１０和内含子４以及ＲＨＣＥ基因内含子４。结果：３４名ＲｈＤ（－）中国供血者的ＲｈＣｃＥｅ表型为４例ＣＣｅｅ，１５例Ｃｃｅｅ和１４例ｃｃｅｅ及１例ｃｃＥｅ。在所有表型为ｃｃｅｅ或ｃｃＥｅ的１５例ＲｈＤ（－）个体中，ＲＨＤ基因完全缺失；而在表型为ＣＣｅｅ或Ｃｃｅｅ的１９例ＲｈＤ（－）个体中，ＲＨＤ基因则表现出多态性：８名供血者存在大量正常的ＲＨＤ基因，占４２．１１％；７名供血者表现为部分缺失，占３６．８４％；４名供血者则完全缺失ＲＨＤ基因，占２１．０５％。其中，７名部分缺失均为同一中间缺失，只存在外显子１、２和３非编码区。ＲｈＤ（－）个体携带或部分携带ＲＨＤ基因的表型为ＣＣｅｅ或Ｃｃｅｅ，而无ｃｃｅｅ。结论：在表型为ＣＣ或Ｃｃ的中国供血者中观察到３种ＲＨＤ基因多态性，提示ＲｈＤ（－）个体携带或部分携带ＲＨＤ基因与ＲｈＣ阳性之间有某种关系。因此，将ＲＨＤ基因定型结果应用于临床医学时应特别注意。

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌氨基糖苷类抗生素耐药基因的检测

为研究河南省及临近周边地区的规模化猪场猪传染性胸膜肺炎(Porcine contagious pleuropneumonia)放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)氨基糖苷类抗生素药物的耐药情况,调查了河南省及周边地区56个规模化猪场,对猪的肺脏和气管中分离鉴定的85株APP进行了研究。血清型鉴定结果显示,分离菌株为1、3、7、8、9、10、12、15型APP,采用纸片扩散法对分离株进行了耐药表型鉴定和采用PCR方法对氨基糖苷类抗生素药物耐药基因(aac3-Ⅳ、aac3-Ⅱc、ant2-Ⅰa)进行了检测。药敏试验结果显示,APP对氨基糖苷类抗生素药物耐药基因(aac3-Ⅱc)和(aac3-Ⅳ)的耐药率分别为57.6%(49/85)、81.2%(69/85);未检测出ant2-Ⅰa耐药基因。

雏鸡绿脓杆菌病的研究

近年来在我省一些国营和专业户的养鸡场,2—5日龄雏鸡大批死亡,死因不明,死亡率高达90%。如1989年6—7月,成都地区三个国营和专业户鸡场购进1日龄鸡8120只,1周内死亡4210只。我们对此进行了调查研究,现将结果报告如下。 1.流行情况

直接抗人球蛋白阳性、自身凝集以及近期输血患者红细胞的基因分型研究

目的比较直接抗人球蛋白(以下简称直抗)阳性、自身凝集患者红细胞抗原基因定型与血清学定型结果,并观察近期有多次输血史患者血清学定型结果与基因定型结果变化情况。方法选择5例自身凝集(ctl阳性)、25例直抗阳性且ctl阴性患者血液样本(EDTA抗凝)以及23例近期有多次输血史患者输血前后血液样本,使用基因定型试剂盒与单克隆抗体试剂分析Rh系统抗原(D,C,c,E,e)、Kidd系统抗原(Jk^a,Jk^b)、Duffy系统抗原(Fy^a,Fy^b)、MNS系统抗原(M,N,S,s,Mur)、Kell系统抗原(K,k)、Diego系统抗原(Di^a,Di^b),比较抗原基因定型与血清学定型结果。结果 25例直抗阳性且ctl阴性患者的Jk^a,Jk^b,Fy^b抗原基因定型与血清学定型结果不一致(Kappa值分别为0.082、0.061、0.211);其他抗原的基因定型与血清学定型结果完全相同。5例ctl阳性患者受本身样本干扰导致所有血型抗原的血清学定型结果均呈阳性,血清学定型方法不能准确定型红细胞表面抗原,但基因定型结果不受样本本身干扰。23例输血患者输血前样本的基因定型结果与血清学定型结果完全相同,Kappa=1.0;输血前、输血后的样本基因定型结果完全相同,Kappa=1.0;输血后对比输血前样本血清学定型结果则不同,特别是Jk^b抗原(Kappa=0.281)、Fy^b抗原(Kappa=0.148)明显不同,且受输血情况干扰出现假阳性结果,导致多种抗原阳性率随着输血次数的增加而逐步增加。结论基因定型可准确应用于近期输血史、直接抗人球蛋白阳性和ctl阳性样本红细胞抗原检测,避免自身红细胞致敏IgG抗体后用IgG性质的抗体采用抗人球蛋白法定型引起假阳性导致的定型错误,避免表型鉴定受输入的红细胞干扰,无法区分是患者自身抗原还是输入性抗原带来的定型错误。

ABO疑难血型鉴定中应用PCR-SSP法的探讨

目的对ABO疑难血型鉴定中应用PCR-SSP法的临床价值进行探讨。方法选取2015年1月~2016年12月我院收治的225例ABO疑难血型受试者,分别给予PCR-SSP法和血清学定型方法进行检测,对比相关数据差异。结果 PCR-SSP法与血清学定型方法的检测结果比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 PCR-SSP法在ABO疑难血型鉴定中临床应用价值高,值得临床输血工作者关注。

天然污染兽医样品中沙门氏菌鉴定的快速培养法的评价

著者以传统方法和他们创造的快速培养法比较如下。1 传统方法 毙体组织先行选择性增菌。1份样品:10份亚硒酸盐胱氨酸肉汤,在37℃孵育48h后,以10μl铂环划线于2只煌绿琼脂平板上,在37℃孵育24h,挑不发酵乳糖的菌落经用血清学及生化试验证实的。2 环境来源