确定性筛选设计在Purcise Q膜纯化抗体的应用

目的:通过确定性筛选设计(DSD)方法建立单抗的Purcise Q膜阴离子交换工艺,进一步降低残留宿主细胞蛋白(HCP)含量。方法:将亲和层析洗脱过滤液作为样品,进行Purcise Q膜层析,选取上样pH、上样电导、载量、流速、峰收集条件5个因子为输入因子,以回收率、HCP去除率、多聚体含量为输出响应值,使用确定性筛选设计DOE模型进行实验。结果:在实验参数范围内,多聚体含量没有明显的变化,HCP含量显著降低。上样电导和载量显著影响HCP去除率,而载量、流速和峰收集条件则显著影响层析回收率。利用JMP的模拟实验功能获得了稳健工艺参数组合(上样电导3 ms/cm、载量300 g/L、流速25 MV/min、峰收集50 mAU/mm),进一步利用决策树机器学习方法自动获得设计空间(上样电导3.0~3.6 ms/cm、载量300~460 g/L、流速5~25 MV/min、峰收集50~180 mAU/mm)。结论:确定性筛选设计实验方法适用于膜层析的工艺开发,能够一段式快速获得稳健工艺参数组合和设计空间,对于工艺放大、工艺转移和降低生产风险极具指导意义。

基于确定性筛选设计的膨胀烟丝填充值优化研究

在膨胀烟丝生产工艺中,填充值一直是重点关注的物理指标。本文以提升膨胀烟丝填充值为研究目标,选用干冰法膨胀烟丝生产线为研究对象,主要针对预处理和热端工序进行工艺参数梳理与数据分析,最终确定以预处理松散回潮工序、热端工序参数为突破口。结果表明,松散回潮加水比例、松散回潮回风温度、松散回潮拔风罩压力、松散回潮加蒸汽比例、冷却回潮含水率以及膨胀叶丝风选负压对填充值均值均有一定影响,通过确定性筛选试验设计方法确定最优参数组合,最终提升了成品膨胀烟丝填充值水平。

基于确定性筛选设计优化五味消毒饮多成分定量指纹图谱

目的采用确定性筛选设计建立五味消毒饮多成分定量指纹图谱分析方法。方法采用确定性筛选设计,以流动相梯度条件、体积流量、柱温为影响因素,指标成分峰分离度、对称因子为评价指标,采用逐步回归法建立评价指标与影响因素的定量模型。结果体积流量和柱温对指纹图谱的影响为极显著(P<0.01),优化后的空间范围为体积流量0.97~1.07 mL/min,柱温24.7~29℃。优化参数后的指纹图谱含共有峰42个,可用于测定紫草氰苷、新绿原酸、单咖啡酰酒石酸、绿原酸、隐绿原酸、秦皮乙素、咖啡酸、菊苣酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、蒙花苷的含量。结论该方法稳定可行,可用于五味消毒饮的指纹图谱和多成分定量检测。

药物亲和靶蛋白稳定性筛选技术在中药成分靶点鉴定中的应用

靶点的发现是阐明中药作用机制的核心,也是关联中药化学成分和药理作用的关键。然而关于中药作用靶点的研究相对较少,已成为中药现代化进程中的瓶颈问题。因此,建立有效的靶点发现与确证技术亟需被开发。目前,以药物亲和靶蛋白稳定性筛选(drug affinity responsive target stability, DARTS)为代表的无标记小分子探针技术在中药活性成分靶点鉴定领域中应用广泛,本综述对其原理与应用现状进行回顾,总结了一般步骤,探讨中药靶标的最新研究进展,以促进该方法在中药化学成分靶点鉴定中的应用。

几种简便的木质素降解真菌定性筛选方法

简要介绍几种在前人基础上作了较大改进的木质素降解真菌的定性筛选方法,列出了每种方法的具体步骤并作了讨论。

滑石粉的X射线衍射快速定性筛选方法

考察了国内不同产地纯滑石粉的X射线衍射图谱,并与JADE谱图分析软件中所提供的滑石的JCPDS卡中标准数据比对,结果表明,国内不同产地滑石粉具有相同的XRD指纹特征。考察了滑石粉快速定性筛选的可靠性和精密度,以滑石三强线的面间距d值作为定性指标,以衍射峰相对强度(I/I1)作为半定量指标,建立了滑石相含量大于70%的滑石粉的X射线衍射快速定性筛选判定方法,为出口滑石粉的检验监管提供快速准确的技术支持。

确定性筛选设计优化一种复合钙制剂的工艺

研制一种适用于孕妇服用的复合钙咀嚼片。采用确定性筛选设计(definitive screening design,DSD),对辅料用量、湿法制粒及总混工艺进行筛选及优化,确定辅料用量和最佳工艺。辅料最佳用量为羧甲基纤维素钠2.00%,聚维酮K30 2.00%,聚维酮水溶液浓度为10.00%,用赤藓糖醇补足配方量;采用湿法制粒,外加维生素D3和叶酸,用三维混合机进行混合。所制得的产品口味较好,甜味适中,香味和硬度适宜,钙、铁、铜、叶酸和维生素D3的含量均匀,质量稳定,易于工业化大生产。

火灾定性筛选分析方法研究及应用

划分好的火灾隔间必须经过一系列的筛选分析以确定对应每个隔间的火灾风险。定性筛选是这种筛选分析的第一步。定性分析的目的是根据事先确定好的准则，识别那些火灾风险相对其它隔间较低或者根本没有风险的隔间。本文主要介绍火灾定性筛选分析的方法以及在特定电厂中的实际分析应用。

军事医学类文章初步定性筛选关键点

本文总结军事医学类文章初步定性筛选的几个关键点，并针对这些关键点提出了实现途径，以规范和提高军事医学类文章的初步定性筛选质量。

基于确定性筛选设计优化柑橘皮抗氧化活性成分提取工艺

目的 基于确定性筛选设计优化柑橘皮抗氧化活性成分提取工艺研究。方法 首先采用确定性筛选设计考察料液比、碱用量、醇体积分数、提取次数、提取温度和提取时间6个因素对提取效果的影响。然后,代表性抗氧化活性成分橙皮苷、芸香柚皮苷、圣草次苷的峰面积之和作为评价指标, 6个因素作为变量因素,通过多元回归算法建立定量模型。基于模拟实验测定误差法计算获得关键因素与评价指标之间的设计空间。结果 提取过程中,抗氧化活性成分的关键影响因素有3个,分别为提取次数、提取温度和料液比,并成功验证。该3个因素推荐的操作空间是提取次数为1.5~2.9,提取温度为51~60℃,料液比为30.2:1~35.0:1 (mL:g)。结论 本研究优选了提取工艺涉及的6个参数对抗氧化活性成分提取的影响,推荐的操作空间可使代表性抗氧化活性成分的峰面积达标概率达到0.96以上,为工业化提取柑橘皮抗氧化活性成分提供了参考。

基于灰色关联分析的烟支吸阻稳定性控制研究

为探索卷烟生产流程中烟支在线吸阻的稳定性控制,本文基于Protos-M5卷烟机底层数采系统进行在线烟支吸阻的过程能力分析,围绕来料烟丝对烟支吸阻的影响效应进行研究。根据制丝与卷包的生产对应关系,建立精确的烟丝质量指标与烟支吸阻的数据对应表。基于该数据对应表,通过灰色关联分析制丝烟丝质量指标与烟支吸阻的量化表征关系,并结合确定性筛选试验对制丝的烟丝质量指标进行适应性改进与优化。通过上述措施,有效地解决了烟支吸阻过程控制不明确、来料烟丝影响无法量化和反馈的问题,进而提升了整体卷烟生产质量的控制水平。

确定性筛选设计优化钙DK咀嚼片工艺及稳定性因素研究

优化钙维生素DK咀嚼片工艺,对影响其稳定性的因素进行研究。分别以颗粒合格率和维生素D3混合均匀度为评价指标,采用确定性筛选设计对制粒和混合工艺进行筛选和优化,确定最优辅料添加量、制粒及混合工艺参数。以维生素D3、维生素K2含量为指标,进行3个月加速稳定性试验,研究颗粒水分、光照、氧气对其稳定性的影响。聚维酮K 30溶液浓度为14.4%,制粒时间为300 s时,颗粒合格率最高。装载系数和混合时间对混合均匀性影响最大:装载系数为0.4,混合时间为22 min时,混合均匀性最好。山梨糖醇添加量10%,颗粒水分5%,采用遮光包材密封包装时,产品中维生素D3和维生素K2稳定性良好。优化后的产品工艺合理,质量稳定,可用于工业化生产。

确定性筛选设计结合设计空间法优化黄芩提取物的纯化工艺

药典中对黄芩提取物的精制过程许多工艺参数不明确,该研究采用确定性筛选设计结合设计空间法优化黄芩提取物的纯化工艺。首先采用确定性筛选试验,同时研究黄芩提取物的纯化工艺过程中的药液质量分数(X1)、第一次酸沉pH(X2)和第一次保温时间(X3)等9个方法参数对黄芩水提物精制效果的影响。以黄芩苷得率为评价指标,用逐步回归法建立评价指标与方法参数的定量模型,并确定其中3个最关键的影响参数。然后以模拟实验测定误差法计算获得基于达标概率的评价指标与3个关键方法参数之间的设计空间并成功验证。最终所确定的3个关键参数为第二次静置温度,第一次静置温度和第二次酸沉pH。推荐的操作空间为第二次静置温度为5~7℃,第一次静置温度为13~15℃,第二次酸沉pH为1.5~1.7。在此操作空间范围内,黄芩提取物纯化工艺中黄芩苷得率达到80%以上,达标概率达到0.96以上。该研究优选了药典中黄芩提取物纯化工艺的各个参数对黄芩苷得率的影响,为工业生产黄芩提取物提供了参考。

确定性筛选设计优化奥氮平片的处方和工艺

目的研究奥氮平片处方和制备工艺。方法用HPLC测定奥氮平片的奥氮平和有关物质含量,用光纤药物溶出度实时测定仪测定溶出曲线,用确定性筛选设计优化奥氮平片的处方和工艺。结果微晶纤维素加入方式(内加或外加)和羟丙基纤维素用量对颗粒大小分布有显著影响,羟丙基纤维素用量和制粒搅拌速率对溶出曲线相似因子f2有显著影响。经过优化得到的奥氮平片处方为奥氮平2.5%、乳糖78%、微晶纤维素10%(内加)、羟丙基纤维素4%、交联聚维酮5%、硬脂酸镁0.5%;制粒工艺参数:切割速度30 rps、搅拌速度3 rps、制粒时间5 min。结论确定性筛选设计适用于奥氮平片处方和制备工艺的筛选和优化,根据确定性筛选设计确定的处方和制备工艺所制的奥氮平片,其溶出曲线与参比制剂相似,其含量均匀度和有关物质均符合中国药典2015年版标准。

采用确定性筛选设计优化催产素粉末的处方及制备工艺参数

采用JMP软件(版本13.0 Pro)的确定性筛选设计(DSD)模块对吸入用催产素粉末的喷雾干燥处方工艺进行了初步筛选。分别设定了6个处方或工艺参数(磷酸盐比例、亮氨酸比例、料液pH、进口温度、进料流速、压缩空气流量),进行13次试验,评价指标为微细粒子分数、产率、玻璃化转变温度、水分含量、几何中位径、催产素含量。结果表明,磷酸盐比例和亮氨酸比例显著影响微细粒子分数,亮氨酸比例显著影响产率,磷酸盐比例和进料流速显著影响水分含量。最后,以微细粒子分数、催产素含量为关键评价指标,通过联合建模获得了优化处方工艺参数。优化处方工艺的验证试验结果显示,所得喷雾干燥粉末的微细粒子分数89.14%、水分含量0.67%、催产素含量94.63%、几何中位径1.36μm、产率68.50%,基本符合催产素干粉吸入剂要求。因此,在多肽类药物干粉吸入剂研发早期,确定性筛选设计可快速衡量各处方或工艺参数对粉末性质的影响。

确定性筛选设计优化双特异性抗体细胞培养工艺

[目的]旨在快速优化双特异性抗体细胞培养工艺参数,提高蛋白表达量,改善产品关键质量属性。[方法]应用确定性筛选实验设计研究工艺参数(接种密度、培养温度和流加策略)对细胞生长、蛋白表达及关键质量属性(电荷异质性、聚体和高甘露糖型)的影响,利用一步法找出最佳工艺条件,然后放大至2L生物反应器进行工艺验证。[结果]应用JMP软件对实验数据拟合分析找出了最佳工艺条件,接种密度:(1.3±0.2)×10^(6)cells/m L,培养温度:36.5±0.5℃,补料策略:第3 d、13 d流加初始培养体积3%,第5 d、7 d、9 d、11 d流加初始培养体积3.5%。通过2L生物反应器进行了工艺验证。活细胞密度峰值提高了11%,蛋白表达量提高了15%,质量合格。[结论]通过确定性筛选实验设计一步法快速找出了表达双特异性抗体的最佳细胞培养工艺条件,并且能在生物反应器中得到重复和验证。

一株高产酒精酵母菌的筛选及特性研究

为了获得高产酒能力的功能特性酵母菌株,对白酒车间样品中分离出的数百株酵母菌株进行定性筛选,经发酵糖产气法初筛和发酵能力复筛,最终获得3株产酒精能力强的酵母菌。通过形态结构观察和生理特征分类鉴定,初步判断Q1XX-64Y和Q1XX-80Y属于酿酒酵母属,CW-65Y属于酒香酵母属。对筛选出的3株酵母菌进行产酒率及发酵产香成分的测定,结果表明,CW-65Y菌株利用糖同化碳源,发酵力和淀粉出酒率最高,分别为18.04g/100g和29.61%,是适合用于白酒强化发酵的优良酵母菌株。

基于模型平均的超高维数据特征筛选方法

结合模型平均技术和条件分位数方法,提出一种基于变量间相关度量的模型平均特征筛选方法.该方法具有无模型假设、对异常值或重尾分布稳健以及计算简单快捷等优点,并通过理论证明和蒙特卡洛数值模拟验证了该方法满足确定性筛选性质和有限样本性质.实例分析结果表明,本文所提出的方法具有优良的表现.

条件区间分位数超高维特征筛选研究

超高维数据下的特征筛选是模型降维建模的重要环节.基于条件分位数的改进超高维特征筛选方法在给定分位点有扰动情况下可能会导致筛选变量不稳定,针对该问题,引入全局条件分位数的思想,提出基于条件区间分位数的超高维特征筛选方法,并通过理论及数值模拟证明其特征筛选的确定性独立筛选性质和所提方法的有限样本性质.

基于距离相关的超高维竞争风险数据特征筛选

针对超高维竞争风险数据,提出并研究了一种新的基于距离相关的特征筛选方法.从理论和数值模拟两方面对新提出的方法进行了研究.理论上证明了新方法的确定性筛选性质.数值上的结果表明,新提出的方法比现有筛选方法有更好的表现,并将新方法应用到了一个实际问题.