结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测对菌阴空洞肺结核的诊断效能分析

目的探讨结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增(Xpert)检测对菌阴空洞肺结核的诊断效能。方法选取河北省胸科医院2021年4月至2022年10月期间行手术治疗的124例肺部空洞疾病患者相关病历资料,其中菌阴空洞肺结核86例(观察组),非结核肺部空洞疾病38例(对照组)。收集患者手术标本Xpert检测和外周血结核感染T细胞斑点(T-SPOT)试验结果,分析二者对菌阴空洞肺结核的诊断效能。结果Xpert检测和T-SPOT试验诊断菌阴空洞肺结核的敏感度为68.6%、75.6%,特异度为97.4%、68.4%。Xpert检测的敏感度低于T-SPOT试验(χ^(2)=5.832,P<0.001),特异度高于T-SPOT试验(χ^(2)=21.469,P<0.001)。2种方法在观察组中的阳性检出率均高于对照组[Xpert检测:68.6%(59/86)比2.6%(1/38);T-SPOT试验:75.6%(65/86)比31.6%(12/38)](均P<0.001)。受试者工作特征曲线分析结果显示,Xpert检测诊断菌阴空洞肺结核的曲线下面积为0.830,T-SPOT试验的曲线下面积为0.729,Xpert检测的准确度高于T-SPOT试验(P<0.001)。结论Xpert检测对菌阴空洞肺结核有比较可靠的诊断效能。

荧光定量核酸扩增检测技术与环介导等温扩增技术在呼吸道感染病原体检测中的对比研究

目的对比荧光定量核酸扩增检测技术与环介导等温扩增技术在呼吸道感染病原体检测中的应用价值。方法随机在2020年1月~2023年1月天津市河东区疾病预防控制中心接收的呼吸道感染的患者中选取120例作为研究对象,分别采用荧光定量核酸扩增(PCR)检测技术与环介导等温扩增技术(LAMP)检测呼吸道病原体,并对检测结果进行比较分析。结果120例患者中使用LAMP检出细菌感染85例(阳性率为70.83%)。荧光定量PCR检出细菌感染72例(阳性率60.00%),差异无统计学意义(P>0.05);其中LAMP法对耐甲氧西林葡萄球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌的检出率高于荧光定量PCR法,差异有统计学意义(P<0.05);采用荧光定量PCR与LAMP法对呼吸道感染10种病原体进行检测,结果表明,除LAMP法对耐甲氧西林葡萄球菌、流感嗜血杆菌的检测一致性极好,荧光定量PCR对耐甲氧西林葡萄球菌的检测一致性极好(Kappa≥0.75),其余病原体采用荧光定量PCR与LAMP法检测一致性均中等(0.4≤Kappa<0.75)。结论荧光定量PCR与LAMP两种检测方法对呼吸道感染病原体检出率均较高,其中LAMP法对耐甲氧西林葡萄球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌的检出率高于荧光定量PCR法。

结核杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术联合干扰素-γ释放试验对肺结核的诊断效能

目的探讨结核杆菌利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测(Gene Xpert-MTB/RIF)技术联合干扰素-γ释放试验(IGRA)对肺结核的诊断效能,为临床治疗提供参考。方法选取2022年3月至2024年3月睢宁县中医院收治的78例疑似肺结核患者的临床资料,进行回顾性分析。所有患者均接受结核分枝杆菌(MTB)培养、Gene Xpert-MTB/RIF、IGRA检查,以MTB培养结果为金标准,分析Gene X-pert MTB/RIF联合IGRA对肺结核的诊断效能。结果MTB培养结果显示:78例疑似肺结核患者中,阳性58例,阴性20例;联合检测结果显示:阳性72例,阴性6例。联合检测准确度为85.90%,灵敏度为94.83%,特异度为60.00%,阳性预测值为91.67%,阴性预测值为66.67%,均高于各项单一检测(均P<0.05)。结论Gene Xpert-MTB/RIF联合IGRA诊断肺结核的价值较高,值得临床应用。

结核/非结核分枝杆菌核酸检测对结核性脑膜炎的诊断价值

目的探讨脑脊液中结核/非结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis/nontuberculous mycobacteria,MTB/NTM)核酸检测诊断结核性脑膜炎(tuberculous meningitis,TBM)的临床价值。方法收集120例TBM患者的临床资料,采用随机数字表法将患者分为TBM A组(n=67,进行脑脊液常规、生化、罗氏培养、涂片查抗酸菌、MTB/NTM核酸检测)和TBM B组(n=53,进行脑脊液常规、生化、罗氏培养、涂片查抗酸菌、GeneXpert MTB/RIF检测),另收集其他中枢神经系统感染患者脑脊液18例为对照组(C组,进行脑脊液常规、生化、罗氏培养、涂片查抗酸菌、MTB/NTM核酸检测、GeneXpert MTB/RIF检测)。结果TBM A组脑脊液罗氏培养、涂片查抗酸菌、MTB/NTM核酸检测阳性率分别为13.43%(9/67)、10.45%(7/67)、46.27%(31/67);TBM B组脑脊液罗氏培养、涂片查抗酸菌、GeneXpert MTB/RIF检测阳性率分别为15.09%(8/53)、11.32%(6/53)、47.17%(25/53),GeneXpert MTB/RIF检测阳性病例中利福平耐药基因检测阳性2例。C组脑脊液罗氏培养、涂片查抗酸菌、MTB/NTM核酸检测和GeneXpert MTB/RIF检测均为阴性。结论MTB/NTM核酸检测与GeneXpert MTB/RIF检测均可辅助早期诊断TBM,相较于后者更经济,并能鉴别非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)感染,及时减少NTM病误诊、误治,值得临床推广。

人乳头状瘤病毒核酸定量检测与宫颈细胞学病理特征的相关研究

目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)核酸定量检测与宫颈细胞学病理特征的相关性。方法选取2018年5月至2021年4月本院收治的82例宫颈病变患者作为研究对象。所有患者均接受HPV核酸定量检测并分析单位细胞内HPV病毒载量,分析不同宫颈病变患者病理特征与HPV阳性的关系,比较不同病理分型患者HPV病毒载量,分析HPV病毒载量与宫颈上皮内瘤变(CIN)分级的相关性。结果HPV核酸定量检测结果显示,82例宫颈病变患者中,HPV阳性人数61例,其中低级别鳞状上皮内病变(LSIL)、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)、宫颈癌患者中HPV阳性人数分别为19、18、24例。不同病理分型、宫旁侵润患者HPV阳性占比比较差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄、肿瘤最大径、淋巴结转移患者HPV阳性占比比较差异无统计学意义。随着患者宫颈病变程度提高HPV病毒载量呈升高趋势,差异有统计学意义(P<0.05);且HSIL、宫颈癌患者HPV病毒载量均高于LSIL患者,宫颈癌患者高于HSIL患者,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,HPV病毒载量与CIN分级呈正相关(r=0.767,P<0.05)。结论HPV核酸定量检测技术可对宫颈病变患者HPV感染情况及病毒载量进行准确分析,有助于临床对检查者宫颈病变程度及癌变风险做出准确诊断。

利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术对涂阴肺结核诊断价值的评价

观察利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert MTB/RIF)在涂阴肺结核诊断中的使用价值。方法 采纳门诊2021.03-2022.03的22例涂阴肺结核病例(涂阴肺结核组)、肺结核确诊病例13例(肺结核确诊者) 、其他肺结核病例15例划分到其他肺病组,依据检测手段不足分组。对患者开展痰液涂片金胺O荧光染色、Xpert MTB/RIF检测、痰固体培养以及结核菌素皮肤试验,观察Xpert MTB/RIF检测结果,观察其在涂阴肺结核诊断中的效果。结果 涂阴肺结核组XpertMTB/RIF检测阳性情况比其他肺病组高,且其TST检测阳性情况比Xpert MTB/RIF检测阳性低。涂阴肺结核组Xpert MTB/RIF检测阳性例数比痰培养检测高。Xpert MTB/RIF检测在肺结核组中检出阳性例数比其他肺病组高,组间对比存在差异(P<0.05)。结论 Xpert MTB/RIF检测阳性率较高,将其用于涂阴肺结核早期诊断中可发挥重要作用。

核酸定量检测试验应用于HIV-1感染实验室诊断的探讨

目的:探讨核酸定量检测在HIV-1感染实验室诊断中的应用。方法:选取145例第四代抗原/抗体联合诊断筛查试验为阳性反应的血浆样本,分别用Western印迹和HIV-1核酸定量方法进行检测,综合对比分析2种方法检测结果。结果:Western印迹检出阳性样本120例,不确定样本17例,阴性样本8例;HIV-1核酸定量试验检出结果大于检测限样本131例,其中包括12例Western印迹不确定样本、2例Western印迹阴性样本;有3例Western印迹阳性样本用HIV-1核酸定量检测试验未能检出。结论:核酸定量检测试验对于HIV-1感染阳性样本是一种有效的实验室诊断方法;对HIV-1核酸定量检测结果为"TND"的样本,建议加做Western印迹或结合其他补充试验结果进行综合诊断。

利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术在骨关节结核的诊断价值

目的探讨利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert MTB/RIF,简称Xpert)在骨关节结核诊断中的临床应用价值。方法选取139例可疑诊断骨关节结核患者的脓液,以改良罗氏培养或病理结果为金标准,评估比较抗酸染色、结核分枝杆菌BACTEC MGIT 960培养(简称MGIT 960)、改良罗氏培养(简称罗培)和Xpert检测结核分枝杆菌的效能。结果抗酸染色法、MGIT 960法、罗培法和xpert在骨关节结核组的阳性率分别为20.18%(22/109),37.50%(36/96),25.23(28/111),76.93%(100/130)。Xpert的阳性率均高于抗酸染色法、MGIT 960法及罗培法。结论 Xpert MTB/RIF可用于骨关节结核的快速检测具有良好的应用前景。

利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术与γ-干扰素释放试验在关节结核辅助诊断中的价值

目的探讨和评价利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术（Xpert mycobacterium tuberculosis/rifampicin,Xpert MTB/RIF;简称Xpert检测）与γ-干扰素释放试验在关节结核辅助诊断中的价值。方法选取2015年1~9月首都医科大学附属北京胸科医院住院经手术治疗,病理确诊为关节结核的患者50例,同时行脓液Xpert检测和血酶联免疫斑点技术法（T-SPOT.TB检测）检测结核分枝杆菌感染T细胞。结果 T-SPOT.TB检测在诊断关节结核中的敏感度为88%（44/50）;Xpert检测的敏感度为66%（33/50）;两种方法联合检测的敏感度为66%（33/50）。T-SPOT.TB检测的敏感度高于Xpert检测及两种方法联合检测（χ~2=6.832,P=0.009）。结论 Xpert检测和γ-干扰素释放试验采用T-SPOT.TB检测试剂盒在关节结核快速诊断方面均具有重要的价值,两者结合可提高关节结核诊断的准确度。

结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术在脊柱结核检测中的应用

目的探讨结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(GeneXpert Mycobacterium tuberculosis/Rifampin,Xpert MTB/RIF)在不同类型脊柱结核组织标本检测中的作用。方法收集127例脊柱结核患者的301份标本(脓液108份、干酪样标本94份、肉芽组织99份)进行细菌培养和Xpert MTB/RIF检测,计算阳性率。结果127例中,培养阳性60例,阳性率47.24%;301份标本中培养阳性138份,阳性率45.85%。脓液标本和干酪样标本培养阳性率均高于肉芽组织(P<0.05)。Xpert MTB/RIF检测脓液、干酪样标本和总标本阳性率高于细菌培养(P<0.05);60例细菌培养阳性的患者中,Xpert MTB/RIF法的敏感度为96.67%;利福平耐药27例,耐药率为45%,Xpert MTB/RIF检测利福平的敏感度为96.30%,特异性为94.29%;67例细菌培养阴性的患者中,36例Xpert MTB/RIF法检测阳性,敏感度为53.73%。结论Xpert MTB/RIF在脊柱结核标本检验中有较高的敏感性,收集脊柱结核患者的各种标本尤其是脓液标本,使用Xpert MTB/RIF可方便、快速、准确地诊断结核感染和耐药,值得临床推广应用。

磁珠法在120例丙型肝炎病毒核酸定量检测中的应用效果观察

[目的]观察磁珠法在丙型肝炎病毒核酸定量检测中的应用效果.[方法]选择自2018年1月至2020年1月间采集的120例丙型肝炎患者的丙型肝炎病毒(HCV)血清标本,其中低病毒载量22例,中病毒载量64例,高病毒载量34例,采用提取柱法与磁珠法核酸定量检测,根据浓度1×10^(8)样本梯度稀释结果比较2种核酸定量检测方法的灵敏度和线性范围.[结果]磁珠法HCV核酸定量检测阳性率为70.0%,与提取柱法的66.7%比较差异无统计学意义(P>0.05);22例低病毒载量的HCV血清标本磁珠法检测阳性率为40.9%,明显高于提取柱法的9.1%(χ^(2)=5.9394,P=0.0148);磁珠法灵敏度和线性范围分别为39 U/mL和3.9×(10^(1)~10^(8)),与提取柱法比较差异有统计学意义(P<0.05).[结论]磁珠法与提取柱法在中、高病毒载量的检测中一致性较好,在低病毒载量的检测中磁珠法较提取柱法核酸定量检测的灵敏度更高,线性范围更广.

建立一种高灵敏的HBV核酸定量检测方法

目的 建立一种高灵敏度的TaqMan实时荧光PCR法用于HBV核酸定量检测,并评估其临床性能。方法 针对HBV保守序列设计引物探针,收集来自国内3家医院共计631例样本,利用本文建立的方法进行HBV核酸定量检测,评估其灵敏度、特异性和重复性,并与普遍采用的对照试剂盒进行比较,评价该方法的临床性能。结果 本文建立的HBV核酸定量检测方法对5 IU/mL的HBV血清和血浆样本的检出率均为100%,且对HBV强阳性、弱阳性和临界阳性样本的阳性检出率均为100%;该方法对于可能存在交叉的15种病原体、内源干扰物及外源干扰物均无交叉反应;与对照试剂的检测结果比较基本相同,对于不一致的样本,经过复检均和本文建立的检测方法结果一致。结论 该方法具有较高的灵敏度,稳定性和重复性好,特异性强,具有较高的临床应用价值。

实时荧光定量PCR核酸检测在献血者HIV病毒筛查中的应用价值分析

目的:研究在献血者人类免疫缺陷病毒(HIV)筛查中通过实时荧光定量PCR核酸检测的应用价值。方法:抽取本站于2019年9月到2020年9月,此期间接受HIV病毒筛查的献血者共640例,对其血液样本均采用核酸测定(NAT)与酶联免疫吸附剂测定(ELISA)方式,其中核酸检测采用PCR-实时荧光定量法。结果:NAT阳性样本19例,HIV病毒筛查阳性率为2.97%;ELISA阳性样本15例,HIV病毒筛查阳性率为2.34%;ELISA阳性、NAT阴性标本7例,约占1.09%;ELISA阴性、NAT阳性标本为11例,约占1.72%。ELISA或NAT检测结果呈阳性的26例血液样本进行复检,共有23例确认为HIV感染。与ELISA(+)NAT(-)相比,ELISA(-)NAT(+)、ELISA(+)NAT(+)的HIV病毒检出率更高;且与ELISA(-)NAT(+)相比,ELISA(+)NAT(+)的HIV病毒检出率更高。结论:实时荧光定量PCR核酸检测对于提高HIV病毒筛查准确率,提高临床输血安全性等有十分重要的意义。

结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术在肺结核快速诊断中的应用价值

目的探究结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术在肺结核快速诊断中的应用价值。方法选取2016年5月至2018年5月的疑似肺结核的患者156例作为研究对象,采集其痰液标本,采用痰涂片抗酸染色显微镜进行检验,并对其使用改良罗氏固体进行培养,进行比例法药物敏感实验,采用结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert MTB/RIF)进行诊断。结果将改良罗氏固体培养的检测结果作为检测最佳标准,Xpert MTB/RIF检验的敏感度为89. 19%,特异度为100%,将痰涂片抗酸染色显微镜检测法作为检测最佳标准,Xpert MTB/RIF检验的敏感度为89. 33%,特异度为88. 89%,将比例法药物敏感实验作为检测的最佳标准,Xpert MTB/RIF检验的敏感度为87. 5%,特异度为100%。结论采用Xpert MTB/RIF法对肺结核进行检验,诊断具有较高的价值。

结核杆菌核酸定量检测与T-SPOT.TB检测在肺外结核病诊断中的应用分析

目的探究结核杆菌核酸定量检测与结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT. TB)在肺外结核病诊断中的应用。方法该研究涉及对象为肺外感染患者200例,研究时间为2018年2月-2019年2月,均行T-SPOT. TB、结核杆菌涂片、结核杆菌核酸定量检测,对比检测结果,进行统计学分析。结果 T-SPOT. TB检测阳性率(90.50%)明显高于结核杆菌涂片阳性率(21.00%),组间差异有统计学意义(χ~2=195.799,P<0.05)。结核杆菌核酸定量检测阳性率(94.00%)明显高于结核杆菌涂片阳性率(21.00%),组间差异有统计学意义(χ~2=221.409,P<0.05)。T-SPOT. TB检出阳性率(90.50%)与结核杆菌核酸定量检测(94.00%)相比,组间差异无统计学意义(χ~2=2.306,P>0.05)。结论结核杆菌核酸定量检测与T-SPOT. TB均可用于肺外结核病的诊断中,具有较高的检出率,有利于肺外结核疾病患者的治疗,值得临床上推广及使用。

乙型肝炎病毒核酸定量检测的临床应用(荧光定量PCR法)

采用相应措施对乙型肝炎患者进行临床检查,观察并分析乙型肝炎血清学相应检查指标与乙型肝炎患者病毒核酸浓度之间的存在联系。方法:从2019年1月-2019年12月这一时段中,于我院接收的乙型肝炎病人合理选择200例作为本次实验研究组,选择同期健康人群20例组成本次研究对照组,220例研究对象均实行荧光定量PCR法进行血清HBV-DNA PCR定量检测,对比两组乙肝病毒核酸检测结果,并分析荧光定量PCR法的检验效果。结果:研究结果显示:HBeAg、 HBsAg、抗-HBc均显示为阳性的病患,其HBV-DNA水平与其他患者相比更高,数据差距明显具有统计学意义(P<0.05)。结论:采用荧光定量PCR法对于检测乙型肝炎患病情况具有良好的检测效果,能够为乙型肝炎病毒感染者的早期诊断以及后续临床治疗方案的选择和实行提供可靠的参考依据,可将其广泛普及和运用于临床检验。

新疆阿克苏地区猪圆环病毒3型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

本研究在猪圆环病毒3型(PCV3)Cap基因保守区设计一对特异性引物和荧光探针,以PCV3 Cap基因阳性质粒为模板,建立PCV3的TaqMan荧光定量PCR检测方法。TaqMan荧光定量PCR检测标准曲线在3.72×10^(8)~3.72×10^(1)拷贝/μL之间有较好的结果。重复性试验结果中,组内变异系数在0.165%~0.588%之间,组间变异系数在0.013%~0.097%之间,变异系数均小于1%,表明本试验离散程度较小。在PCV3 TaqMan荧光定量PCR灵敏性试验中,灵敏性为3.72×10^(3)拷贝/μL,相较于传统PCR方法灵敏性增加10倍,本试验建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法为快速精准检测PCV3奠定了基础。

一种用于核酸绝对定量检测的高鲁棒性液滴式数字PCR芯片

为满足液滴式数字聚合酶链式反应(PCR)技术对扩增反应过程中稳定保存液滴以及反应后高效检测的核心需求,构建了一种具有过滤气泡和增强荧光信号功能的液滴式数字聚合酶链式反应芯片.该芯片可在10 min内产生20多万个半径约为21μm的液滴.利用"玻璃天花板"的方式构建了独立于芯片主体材料的液滴收集腔,为液滴提供稳定的保存与反应环境;还构建了过滤结构,可有效过滤混入液相中的空气,提高芯片鲁棒性.同时,在液滴收集腔中引入反射层,增强荧光信号,使单个视野荧光成像时间缩短约40%,提高了检测效率.利用该芯片定量检测EGFR基因第21号外显子,检测信号与DNA浓度在10~1~10~5copies/μL范围内呈现良好的线性关系(R^2=0.998).该方案在载玻片大小的芯片上实现了液滴产生、PCR扩增和荧光信号读取,并具有较高的鲁棒性与检测效率,在核酸检测等方面具有应用潜力.

结核分枝杆菌利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术在肺癌合并肺结核患者早期诊断中的应用价值

目的探讨结核分枝杆菌利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Gene Xpert-MTB/RIF)在肺癌合并肺结核患者早期诊断中的应用价值。方法选取2016年1月至2019年12月在郑州市第六人民医院住院的260例肺癌合并肺结核患者,留取痰标本后分别进行Gene Xpert-MTB/RIF、抗酸染色痰涂片、痰培养等3种方法检测。结果Gene Xpert-MTB/RIF阳性检出率高于抗酸染色痰涂片,差异有统计学意义(χ^2=33.986,P<0.001);Gene Xpert-MTB/RIF阳性检出率与痰培养比较差异无统计学意义(χ^2=0.446,P=0.504);痰培养阳性检出率高于抗酸染色痰涂片,差异有统计学意义(χ^2=26.854,P<0.001)。结论Gene Xpert-MTB/RIF在肺癌合并肺结核患者早期诊断中具有较高的阳性检出率,检测时间短,操作方法方便快捷,为临床上肺癌合并肺结核患者的早期诊断提供了一个重要的诊断手段,可在临床工作中广泛开展。

利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术及环介导等温扩增技术在结核性脑膜炎的诊断价值

目的评价脑脊液利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(GeneXpert MTB/RIF)及脑脊液环介导等温扩增技术(LAMP)在结核性脑膜炎中的诊断价值。方法收集临床诊断为结核性脑膜炎住院患者110例,随机收集60例为结核性脑膜炎A组,50例为结核性脑膜炎B组,另收集其他中枢神经系统感染患者脑脊液20例为对照组(CG组)。其中结核性脑膜炎A组患者入院后抽取脑脊液送脑脊液常规、生化、结核菌涂片、结核菌培养、GeneXpert MTB/RIF,结核性脑膜炎B组患者送脑脊液作常规、生化、结核菌涂片、结核菌培养和LAMP,CG组患者送脑脊液作常规、生化、结核菌涂片、结核菌培养、GeneXpert MTB/RIF和LAMP。结果结核性脑膜炎A组脑脊液GeneXpert MTB/RIF阳性32例,其中利福平耐药基因检测阳性3例,结核性脑膜炎A组脑脊液结核菌涂片、培养、GeneXpert MTB/RIF阳性率分别为8.3%(5/60)、16.7%(10/60)和53.0%(32/60)。结核性脑膜炎B组50例脑脊液结核菌涂片、结核菌培养、LAMP,阳性率分别为8.0%(4/50),18.0%(9/50)和58.0%(29/50),CG组脑脊液GeneXpert MTB/RIF和脑脊液LAMP均为阴性。结论脑脊液GeneXpert MTB/RIF及脑脊液LAMP均为早期诊断结核性脑膜炎的较好方法。