细菌半定量培养新法(十二级法)研究报告

目的建立开放部位非均质标本细菌半定量培养的新方法 （十二级法）。方法采用＂十二级法＂和传统＂四区划线法＂（即五级法）对＂无呼吸道炎症人群＂咽拭子及临床患者痰液标本进行细菌半定量培养,从重复性、区分细菌相对数量的细致性及临床诊断符合率等方面予以比较。结果重复性：＂十二级法＂和＂四区划线法＂均较差,平均变异系数分别为22.45%和20.38%,但前者受操作等因素影响较小,结果差异多在1-2个档次之内;后者受操作等因素影响明显,同一标本的同种细菌为1＋4＋。区分细菌相对数量的细致性：＂无呼吸道炎症人群＂咽拭子的非厌氧菌半定量培养;若用＂十二级法＂判读,非β-溶血性链球菌、奈瑟菌、凝固酶阴性葡萄球菌、G-杆菌和酵母样真菌的平均携带量分别为0.45、0.35、〈0.1、〈0.1和〈0.1,差别显著;若用＂四区划线法＂判读,以上各菌却有可能差别不大。诊断符合率：对于痰培养的机会致病菌,若与涂片中白细胞区域优势菌对应以＂十二级法＂菌量〉该菌口咽部正常携带量为＂可疑感染菌＂判定标准,阳性率18.92%（521/2754）,与临床确诊加疑诊的符合率〉85%;若以其＂四区划线法＂菌量大于非β-溶血性链球菌菌量为＂可疑感染菌＂判定标准,则阳性率仅5.92%（163/2754）,漏诊较多。二者比较,2χ=213.94,P〈0.001。结论 ＂十二级法＂优于＂四区划线法＂,值得选用。

尿细菌定量培养与尿亚硝酸盐定性测定的相关性探讨

目的探讨尿细菌定量培养与尿亚硝酸盐定性试验测定结果的相关性。方法尿细菌定量培养用定量加样器吸取充分混匀清洁中段尿各1μl接种于血平板和麦康凯平板,培养阳性采用VITEK2进行细菌鉴定及药敏试验。阳性者的尿采用sysmex uf 50尿分析仪进行尿亚硝酸盐定性测定。结果尿细菌定量培养阳性222例患者中尿亚硝酸盐定性测定阳性的为138例,阳性率为62.16%,尿细菌定量培养出的阳性菌主要为大肠埃希菌152例,亚硝酸盐定性试验阳性为65.79%,粪肠球菌16例,亚硝酸盐定性试验阳性为12.50%,肺炎克雷伯氏菌14例,亚硝酸盐定性试验阳性为92.86%,葡萄球菌11例,亚硝酸盐定性试验阳性为11.11%、屎肠球菌9例,亚硝酸盐定性试验阳性为36.36%。结论尿细菌定量培养常被作为诊断尿路感染的金标准,是尿路感染诊断的重要指标,尿液细菌定量培养与药敏试验对治疗时选择抗生素具有重要参考价值。但需要一定的技术条件和较长时间。尿亚硝酸盐定性测定可用作尿路感染的筛选试验,提示尿路感染存在。

尿流式沉渣分析、沉渣显微镜镜检联合细菌培养在初筛诊断尿路感染中的应用评价

对临床怀疑尿路感染患者355例，取中段尿分别作尿定量细菌培养、尿沉渣分析、干化学分析和显微镜沉渣涂片，并将结果进行统计分析，报告如下。资料与方法2011年5月～2012年3月收治疑似泌尿系统感染并作尿培养检查患者355例，男170例，女185例，年龄14～81岁，尿标本的留取均严格无菌操作并使用标准灭菌容器送检。

肺、支气管感染氮细菌量培养结果分析

肺、支气管感染临床上一般用痰培养判定感染的病菌,但痰经口咽排出会被该处细菌污染,从而无法碗定真正的病原菌;加上肺、支气管等部位无感染时并非绝对无菌区,上述部位可机会带菌,故常规痰培养无法为临床提供可靠的依据。作者引入痰细菌量的概念,并建立一种痰细菌量定量培养方法,对50例病人的80份痰标本进行检查。

喘息住院婴儿痰液半定量培养细菌数量与临床特征的相关性

目的 研究喘息住院婴儿痰液半定量细菌培养数量与临床特征的相关性。方法 收集2010年1月至2011年12月因喘息入住苏州大学附属儿童医院呼吸科且病史资料完整的婴儿957例，采集呼吸道分泌物进行痰液细菌检查，依据痰液半定量培养细菌数量分为0＋、1＋ ～2＋和3＋ ～4＋组，应用预测统计分析软件（PASW）20.0软件对3组患儿临床特征进行分析。结果 1.共有372例患儿痰液细菌培养阳性，占38.87%（372/957例）。痰液细菌0＋组共585例，1＋ ～2＋组225例，3＋ ～4＋组147例；痰液细菌1＋ ～2＋组以流感嗜血杆菌（24.89% ，56/225例）和肺炎链球菌（16.00% ，36/225例）较常见；痰液细菌3＋ ～4＋组以肺炎链球菌（54.42% ，80/147例）和流感嗜血杆菌（8.84% ，13/147例）常见。2.与痰液细菌0＋组相比，痰液细菌3＋ ～4＋组患儿有兄弟姐妹、发绀的比例较高，中性粒细胞比例和 C反应蛋白水平较高、淋巴细胞比例较低；痰液细菌1＋ ～2＋组气促比例高于痰液细菌0 ＋组。3.多项 Logistic回归分析发现兄弟姐妹、居住地、被动吸烟、病程、发绀是痰液细菌3＋ ～4＋组的影响因素；性别、热峰〉38.5 ℃ 、母乳喂养、被动吸烟、年龄、病程和发绀是痰液细菌1＋ ～2＋组的影响因素。4.痰液细菌3＋ ～4＋组以重症肺炎多见。结论 喘息住院婴儿痰液细菌培养阳性常见，痰液细菌数量与临床特征存在相关性，重症肺炎患儿多见于痰液细菌培养数量高组。

支气管黏膜活检与毛刷细菌定量培养对机械通气患者下呼吸道耐药菌感染的诊断评价

目的研究支气管黏膜活检联合保护性毛刷细菌定量培养对机械通气下呼吸道耐药菌感染的诊断价值,为临床诊治提供理论依据。方法选取2012年4月-2013年4月医院60例使用机械通气疑似下呼吸道耐药菌感染患者,根据分析评定,分成为定植组34例和感染组26例,对60例患者进行支气管黏膜活检联合保护性毛刷细菌定量培养,检测下呼吸道耐药菌感染情况,对比记录联合检测方法与常规检测方法在诊断上的差异性,数据采用SPSS 19.0软件进行分析。结果患者APACHEⅡ评分定植组为(19±5)分、感染组为(22±4)分;定植组患者中发生呼吸衰竭最高占52.94%,发生重症肺炎最低占2.94%;感染组无神经肌肉疾病患者,但发生呼吸衰竭也最高,占53.85%;联合诊断比单一诊断方法在特异性和灵敏度均有显著优势,误诊率较低。结论使用支气管黏膜活检联合保护性毛刷细菌定量培养,对机械通气患者下呼吸道耐药菌感染的诊断价值高。

UF-100和干化学筛检尿路感染的临床意义

目的 探讨UF 1 0 0尿液分析仪和干化学法筛检尿路感染的临床意义。方法 用UF 1 0 0仪和干化学法检测 32 6份尿中白细胞、细菌、LEU和NIT ,同时作尿定量细菌培养并将结果进行比较 ,用Yerushalmy模式评价两种方法的一致性及UF 1 0 0和干化学的灵敏度、特异性等。结果 尿培养结果阳性的标本占 2 0 .2 % ,其中最常见的致病菌是大肠埃希菌。与尿培养相比 ,UF 1 0 0和干化学所得的最佳灵敏度、特异性、阴性预测值、阳性预测值和假阴性率分别为 80 .6 %、80 %、91 .8%、85 .7%、3.7%。结论 UF 1 0 0和干化学法不能较准确地预测细菌培养结果 。

尿液流水线分析系统联合显微镜检对尿路感染的诊断价值

目的探讨Sysmex UC-3500尿干化学分析仪(简称UC-3500)与UF-5000尿沉渣分析仪(简称UF-5000)的相关参数联合尿沉渣显微镜检在诊断尿路感染(UTI)中的应用价值。方法对该院2021年2—3月1036例患者的清洁中段尿进行尿干化学分析、流式尿沉渣分析及尿离心显微镜检,另送尿培养鉴定,以尿培养结果作为“金标准”,分析尿中性粒细胞酯酶(LEU)、白细胞计数(WBC)、细菌计数(BACT)3项指标联合显微镜检诊断UTI的灵敏度、特异度、符合率。结果1036例尿标本中299例(28.86%)尿培养阳性,其中革兰阳性菌162例,革兰阴性菌108例,革兰染色不定的细菌仪器7例(阴道加德纳菌),真菌21例。仪器LEU+WBC+BACT 3项指标联合、显微镜检以及显微镜检联合仪器UTI报警诊断UTI的曲线下面积(AUC)分别为0.635、0.698和0.761;将显微镜检联合UF-5000的仪器UTI报警后,其诊断UTI的符合率由72.18%升高至79.90%。UF-5000的细菌革兰染色分型对革兰阴性菌的符合率(78.82%)高于革兰阳性菌的符合率(47.06%)。类酵母细胞数量(YLC)、显微镜检、YLC联合显微镜检判断真菌性UTI的AUC分别为0.943、0.918和0.941。结论显微镜检联合UC-3500、UF-5000相关参数可为疑似UTI患者的诊断提供快速且准确的参考。

尿干化学mejer-600白细胞定性检测在快速筛查尿路感染中的应用价值

目的用中段尿定量细菌培养为金标准,评价Mejer-600尿干化学仪(简称Mejer-600)白细胞定性检测在快速筛查尿路感染中的应用价值,为临床诊断、治疗提供参考。方法对408份中段尿液标本同时进行尿液细菌培养和尿液干化学白细胞检测。以尿液细菌培养菌落计数阳性为金标准,计算灵敏性、特异性、阴/阳性预测值、假阳性及假阴性率。结果 408份尿液标本中细菌培养阳性190例,占46%;以Mejer-600白细胞定性检测1+阳性为筛查尿路感染的临界值,其检测结果的灵敏度为53.19%、特异度为96.00%、阳性预测值为73.84%、阴性预测值为3.68%、假阳性率为46.81%、假阴性率为4%。Mejer-600尿液白细胞定性检测与细菌定量培养结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Mejer-600尿液干化学仪白细胞定性检测快速筛查尿路感染的可信度不高,尿路感染的诊断还需联合其他检测来提高检测的灵敏度、阴/阳性预测值。

探讨UF-100在泌尿系统感染诊断中的应用价值

为探讨UF-100尿液分析在泌尿系统感染诊断中的临床应用价值,对UF-100作重复性试验,用UF- 100检测760份尿中细菌和白细胞,同时作定量细菌培养并将结果作比较。用Yerushalmy模式评价2种方法的一致性及UF-100筛检的灵敏度、特异性等。重复试验中,UF-100细菌计数CV值低于细胞计数CV,与定量细菌培养结果比较,细菌计数的筛检灵敏度为80.0%,特异性为50.4%,阳性预计值为28.7%,阴性预计值为91.0%,假阳性率为39.7%,假阴性率为4.0%,准确率为56.3%。UF-100具有良好的分析尿液的性能,在临床尿路感染筛检时可用细菌一项指标,90%结果阴性的标本可在短时间内筛去,大大减少实验人员繁复劳动,降低检验成本,但应注意假阴性,更不可替代尿定量细菌培养。

保护性毛刷在肺部重症感染中应用价值的探讨

目的了解保护性毛刷在重症肺部感染中的应用价值。方法对57例临床诊断为重症肺部感染并机械通气的患者,经气管插管或气管套管作纤维支气管镜检查,以保护性毛刷采集下呼吸道病灶部位标本并进行细菌定量培养;临床根据细菌培养及药敏结果调整抗感染药物。结果保护性毛刷标本培养阳性率78.95%、敏感性97.73%、特异性84.62%;而且,在标本采集前后,患者的生命体征没有显著性变化;培养结果阳性患者治疗有效率达91.23%。结论经纤维支气管镜引导行保护性毛刷检查对重症肺部感染患者安全可靠,有较高的临床实用价值。

3种检测方法在尿路感染中的应用探讨

目的探讨UF-1000i尿沉渣分析、AX-4030尿干化学分析、尿液离心镜检3种检测方法在尿路感染中的应用。方法随机选择385份门诊或住院患者的中段尿标本,同时进行3种方法的检测,以定量细菌培养为金标准,比较不同方法的结果与定量细菌培养结果的一致性。结果385份尿液样本中有68例细菌培养为阳性,占17.7%（按照尿中革兰阳性菌≥104CFU/mL,革兰阴性菌≥10^-5 CFU/mL时诊断为尿路感染标准）。在UF-1000i尿沉渣分析中,细菌计量≥2 750/μL,白细胞数≥20/μL为尿路感染标准,同为阳性时灵敏度最低为60.2%,阳性预测值达最高为63.0%。在AX-4030尿干化学分析中白细胞酯酶（LEU）和亚硝酸盐试验同时为阳性,灵敏度最低为45.6%,阳性预测值最高为68.0%。在尿液离心镜检中灵敏度有所提高,其灵敏度为63.2%,但阳性预测值仅为48.9%。结论 UF-1000i尿沉渣自动分析、AX-4030尿干化学分析、尿沉渣离心镜检阴性预测值较高,在筛选泌尿系统感染时灵敏度不足,因此,在诊断泌尿系统感染时以上3种检测方法均不能替代尿定量细菌培养。

三种方法检测产气荚膜梭菌的比较研究

目的 使用荧光定量PCR法对产气荚膜梭菌进行快速检测,同时用细菌培养及涂片法为对照组,比较三种方法的敏感度及特异度,为临床气性坏疽的诊断提供快速准确的测定结果.方法 收集2009年12月～2011年12月入住广州军区总医院、广东省人民医院、南方医院、广州市第一人民医院、武警医院、空军医院等临床上严重创伤患者的伤口脓液或分泌物558例,同时用荧光定量PCR法、细菌培养及涂片法进行检测,分别比较三种方法的敏感度和特异度.结果 采用荧光定量PCR检出产气荚膜梭菌阳性31例,细菌培养则检出30例,涂片法检出65例.以细菌培养法为金标准,与荧光定量PCR法相比较,差异无统计学意义（P〉0.05,Kappa值为0.983）;与涂片法相比较,差异有统计学意义（P〈0.001,Kappa值为0.489）.结论 涂片法与细菌培养法比较,假阳性率高,特异度差.荧光定量PCR检测法与细菌培养法结果一致,但荧光定量PCR方法检测时间较培养法缩短20 h,检测结果快速准确,较培养法具有明显优势,适用于临床气性坏疽的快速诊断.

UF-1000i尿液有形成分分析仪对尿路感染诊断的价值

目的探讨UF-1000i尿液有形成分分析仪在患者尿路感染诊断中的应用价值。方法用UF-1000i检测652例疑似尿路感染(UIT)患者中段尿中的细菌数,以定量尿细菌培养作为诊断尿路感染的金标准,应用ROC曲线确立最佳临界值,评价UF-1000i诊断尿路感染的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度。结果 UF-1000i分析仪细菌计数诊断患者尿路感染的cut-off值为1 630个/微升,其敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度分别为84.0%、81.0%、42.9%、90.8%、79.3%。结论 UF-1000i分析仪可作为患者尿路感染的快速筛查工具。

苯妥英钠的抑菌活性

背景:苯妥英钠在创面愈合过程中的抑菌作用仍不明确。目的:通过体外及动物实验观察苯妥英钠在创面愈合过程中是否具有抑菌作用。方法:①体外实验:采用水解酪蛋白肉汤稀释法检测苯妥英钠的最低抑菌浓度、琼脂扩散法观察1024mg/L的苯妥英钠的体外抑菌活性。②动物实验:将30只SD大鼠随机等分为3组,在大鼠背侧脊柱旁设计一2cm×3cm矩形创面,分别用10,20mg/cm2苯妥英钠糊剂或单纯凡士林纱布进行处理,创面均外加凡士林油纱及干纱包扎固定。隔日换药,于第4,8,12,16天进行创面表面细菌定量培养。结果与结论:①水解酪蛋白肉汤稀释法结果:应用质控菌株、临床菌株进行试验,不同苯妥英钠浓度的试管中均呈现浑浊状态。②琼脂扩散法结果:应用质控菌株进行试验,未发现抑菌圈的形成。③实验动物创面细菌定量培养结果:应用10,20mg/cm2苯妥英钠糊剂处理的创面细菌定量略低于单纯凡士林纱布处理的创面,但各组之间差异均无显著性意义(P>0.05)。表明苯妥英钠尚无明确的体外及体内抑菌活性,对创面细菌的清除无明显作用。

盲式取材技术在呼吸机相关肺炎病原学诊断中的价值

目的 评价保护性毛刷盲取技术(BPSB)结合细菌定量培养(QC)在呼吸机相关性肺炎(VAP)病原学诊断中的价值。方法 采用前瞻性、自身对照临床研究设计,研究时间自1999年6月-2002年6月,研究人群为54例机械通气患者的125例次临床拟诊VAP发作,同步对照评价了BPSB-QC和纤维支气管镜引导保护性毛刷(FOB-PSB)-QC两种技术在106例次(48例)确诊VAP发作中的诊断准确度及一致性,两种技术分离细菌的诊断阳性截断点设定为≥103cfu/ml。结果 106例次(48例)临床拟诊VAP发作被确诊(84.8％),BPSB-QC和FOB-PSB-QC诊断技术的准确度分别为80.8％(101/125例次)和83.2％(104/1 25例次),二者完全一致为75.2％(94/125例次),以分布于阳性截断点103cfu/ml上下来比较,诊断一致率为84.8％(106/125例次),不同病变分布的诊断阳性率和两种诊断技术在不同病变分布的诊断阳性率比较均无显著的统计学差异。结论 BPSB-QC和FOB-PSB-QC诊断技术有相似的诊断准确度和同等的可行性,且BPSB操作简单、安全性高和费用低,可作为首选的QC取材技术。

UF-1000尿液分析仪在尿路感染诊断中的应用

目的利用UF-1000全自动尿沉渣分析仪(简称UF-1000)对尿沉渣中的细菌进行定量分析,从而对尿路感染进行快速诊断,为临床经验用药提供参考。方法对培养的标准菌株大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌进行稀释,用UF-1000进行定量检测。对148份新鲜中段尿标本做细菌培养菌落计数和UF-1000测定并将结果与图形比较分析。结果 UF-1000细菌计数和定量细菌培养之间存在很好的相关性。以定量细菌培养结果为标准,UF-1000细菌计数的灵敏度为78.9%,特异性为89.0%,阳性预测值为81.8%,阴性预测值为87.1%,假阳性率为11.0%,假阴性率为21.1%,准确率为85.1%。革兰阳性球菌与革兰阴性杆菌在图形上存在明显差别。结论 UF-1000细菌测定结果与定量细菌培养结果具有很好的相关性,许多阴性标本可在短时间内筛去,对临床经验用药也具有一定的参考价值。

免疫低下时绿脓杆菌肺部感染的实验研究

实验用大白鼠230只,随机分为正常对照组、氢可琥珀组(HSS组)、环磷酰胺组(CT×组)和联合用药组(CTX+HSS组)。绿脓杆菌攻击后,动物于规定时相点活杀。观察了免疫低下时肺组织细菌定量培养;肺组织的病理变化;药物对肺泡巨噬细胞(PAM)数量和功能的影响及支气管肺泡灌洗细胞的动态变化等。结果表明:(1)HSS组和CTX组其PAM数均明显减少。

严重烧伤病人应用抗生素的疗效观察

目的 观察伊米配能/西司他丁和头孢哌酮的临床疗效。方法 观察7例严重烧伤病人应用伊米配能/西司他丁和6例严重烧伤病人应用头孢哌酮前后创面和痂下组织细菌培养和药敏结果,观察血常规、肝肾功能及临床症状的变化。结果 两组病人创面和痂下组织细菌在治疗前后对药物敏感;治疗后,痂下组织中的细菌量明显降低,肝肾功能有所改善,临床症状好转。结论 伊米配能/西司他丁和头孢哌酮治疗G^-杆菌均有效。