定量荧光原位杂交测定端粒长度

目的:应用定量荧光原位杂交(Q-FISH)方法测定端粒长度。方法:选取4种端粒长度均一的标准细胞株采用Q-FISH的方法做出荧光亮度与端粒长度的标准曲线,从而得出实验细胞株的端粒长度,与DNA印迹法测定末端限制性片段(TRF)长度进行二者之间的相关性分析。结果:检测荧光强度的最佳线性曝光时间为400ms,相对于DNA印迹法,定量荧光原位杂交(Q-FISH)法所需标本量少,实验周期短,端粒长度结果与Southern杂交法具有很好的相关性。结论:采用定量荧光原位杂交方法测端粒长度具有重复性好、精确可靠的特点,适用于对珍贵标本的端粒改变进行分析。

外周血白细胞特定染色体相对端粒长度的测定

目的:建立一套以相对长度为单位的测量人类单个染色体端粒长度的标准,测定正常人特定染色体长臂和短臂末端上的端粒长度。方法:采用荧光原位杂交定量法(Q-FISH)测定所有单个染色体端粒的信号强度,并转化为相对端粒长度(relative telomere length,RTL)进行比较。结果:对20例正常人外周血白细胞每条染色体上RTL值的测定显示,不同染色体臂上的端粒长度呈非随机分布并差异有统计学意义(F=8.923,P<0.01),其中2q、16p、17p、17q、19p、20q、22q、Yq的端粒最短(P<0.05),而3p、5p、Xp和Yp的端粒最长(P<0.05)。结论:用Q-FISH测定单个染色体RTL的方法易标准化,便于推广;正常人外周血白细胞中46条不同染色体上的端粒长度呈现特定的分布模式。