乳腺浸润性癌中EZH2定量表达和M2型巨噬细胞相关性及与临床病理特征的关系

目的 观察浸润性乳腺癌中EZH2蛋白的定量表达和CD163阳性巨噬细胞数目,分析上述蛋白与多个临床病理因素的关系以及二者之间的相关性。方法 采用免疫组织化学SP法检测67例原发性浸润性乳腺癌和相应的癌旁组织中EZH2和CD163的表达,用IPP图像分析软件对EZH2蛋白表达进行定量测试,计数高倍视野CD163的个数,分析EZH2和CD163与浸润性乳腺癌临床病理特征的关系,用Spearman法分析二者之间的相关性。结果 EZH2主要定位于乳腺癌细胞核内,在浸润性乳腺癌中的表达显著高于癌旁组织(P=0.000),CD163主要表达于浸润性乳腺癌癌巢周围组织间隙中,定位于组织细胞质内,巢状或散在分布,其在浸润性乳腺癌组织中阳性数目显著高于癌旁组织(P=0.000)。EZH2蛋白定量表达和CD163的阳性数目与浸润性乳腺癌的肿瘤直径、WHO分级、TNM分期、淋巴结转移状况、雌激素受体(estrogen receptor, ER)、孕激素受体(progesterone receptor, PR)表达均相关(P均<0.05)。Spearman相关性分析显示浸润性乳腺癌组织中EZH2的定量表达与CD163数目呈显著正相关(r=0.990,P=0.000)。结论 EZH2和CD163在浸润性乳腺癌中高表达,与浸润性乳腺癌的侵袭和转移有关,二者呈正相关,EZH2表达与肿瘤微环境中CD163阳性的巨噬细胞可能存在协同作用促进浸润性乳腺癌的发生发展,对浸润性乳腺癌中EZH2和CD163表达规律及相关性研究,能够为乳腺癌靶向治疗提供一定理论依据。

作物产量“三合结构”定量表达及高产分析

针对目前作物产量水平长期徘徊难以突破,产量分析理论缺乏量化指标体系,可操作性指导作用小等问题,依据"三合结构"模式二级结构层各因素间的关系,建立了"三合结构"定量表达式,并通过田间试验与模型模拟相结合的方法,对春玉米、夏玉米、水稻和冬小麦高产实例进行定量化分析,明确了限制产量进一步提高的关键因素,提出了高产突破的可能方向。结果表明,提高叶片平均净同化率(MNAR),改善群体的物质生产能力,是水稻产量进一步提升的关键;适当提高平均叶面积指数(MLAI)或经济系数(HI)可能会进一步增加冬小麦产量;春玉米籽粒产量主要伴随着MLAI和单位面积穗数(EN)的增加而提高,其实质是平均作物生长率(MCGR)的提高增加了单位面积上总粒数(TGN)。进一步研究确定了"三合结构"定量表达式参数间的函数关系式,通过公式代换可推导出某一参数与目标参数的函数关系。作物产量"三合结构"定量表达式的建立为作物群体定量化研究提供了新的思路和方法,有助于全面掌握群体参数变化与产量形成的定量关系,为指导作物生产进行有效的技术调控提供依据。

春兰AGL6基因的克隆及实时定量表达分析

本研究采用RT-PCR结合RACE技术从春兰(Cymbidium goeringii)中分离到一个AGL6基因。序列分析表明,该基因含有一个729bp长的开放阅读框(ORF),共编码242个氨基酸。系统进化树分析显示,该基因属于MADS-box基因家族AP1/AGL9组的AGL6同源基因,其编码的蛋白与其它植物AGL6类蛋白具有较高的同源性,命名为CgAGL6(基因登录号为HM208533)。实时荧光定量表达分析表明,CgAGL6基因春兰不同组织中均有表达,其中在唇瓣、花芽和子房中的表达量较高,在花瓣和萼片中的表达量次之,在根、叶和蕊柱中的表达量最低,显示了CgAGL6基因可能在春兰成花转变和花器官的形成过程中起着重要作用。

春兰GLO基因的克隆和实时定量表达分析

采用RT-PCR结合RACE技术从春兰(Cymbidium goeringii)中分离到一个GLO基因。该基因含有一个630 bp的开放阅读框(ORF),共编码210个氨基酸。系统进化树分析显示,该基因属于B类MADS-box基因的PI/GLO家族,其编码的蛋白与其他植物PI/GLO类蛋白具有很高的同源性,命名为CgGLO(登录号HM106984)。实时荧光定量表达分析表明,CgGLO主要在第二轮花器官唇瓣和花瓣中表达,在萼片、子房和叶片中表达较少,在蕊柱和根中表达量最少,这种表达模式支持了van Tunen对ABC模型的修正,也显示了CgGLO基因可能在春兰花器官以及子房的形成过程中起着重要作用。

菊花节律钟输出基因CmGI(GIGANTEA)的cDNA全长克隆、序列信息及定量表达分析

【目的】克隆菊花节律钟输出基因GIGANTEA的cDNA全长序列,进行序列信息学分析,研究其mRNA的相对定量表达。【方法】利用多聚酶链式反应(PCR)结合5′RACE、3′RACE技术,克隆节律钟输出基因GIGANTEA的cDNA全长序列,应用生物信息学软件对获得的基因核苷酸序列及编码的蛋白质序列进行分析;通过在线建模软件对蛋白质的三维结构进行建模预测;利用实时荧光定量PCR技术,用2-△△Ct法进行GIGANTEA的mRNA相对定量表达分析。【结果】从菊花品种‘Jinba’中克隆得到节律钟输出基因GIGANTEA的cDNA全长序列,核苷酸序列长度3 461 bp,开放阅读框3 453 bp,编码1 150个氨基酸。氨基酸序列分析显示,该基因编码的蛋白与植物节律钟输出基因GIGANTEA同源,命名为CmGI基因,序列提交到GenBank,登录号为JQ043439。序列比对显示与葡萄、蓖麻等的GI的相似度依次为76%、75%。构建类似蛋白系统进化树显示,菊花CmGI与拟南芥(Arabidopsis thaliana GIGANTEA,ABP96482.1)分子进化距离最近,其次是白菜(Brassica rapa GIGANTEA,AEB33730.1);预测CmGI蛋白有6个跨膜螺旋多次跨膜;为转录因子,定位在细胞核中,为非分泌性蛋白质;不具备信号肽;对CmGI三级结构建模预测表明,蛋白核心结构符合转录因子与DNA结合常见的功能域HTH、HLH;采用荧光相对定量分析,菊花CmGI的表达呈昼夜节律表达模式;不同花芽分化阶段叶片中CmGI基因mRNA水平差异大,两个高峰值分别出现在花芽分化启动期和小花原基分化中期;营养生长的组培苗、长日照条件下的叶、芽、花蕾期均是痕量表达;盛花期表达量依次为叶片>舌状花>筒状花。【结论】从菊花中克隆得到节律钟输出基因CmGI,对该基因的进一步深入研究有助于探索光周期途径菊花成花的分子调控机制,可作为切花菊花期调控分子育种的目标基因。

基于三维景观指数的城市景观美学特征定量表达——以深圳市为例

城市景观由自然元素与人工元素构成,以建筑为主体,辅以外部空间环境。对城市景观美学价值的研究有利于探讨如何提升城市形象及居民生活环境,为城市规划设计纳入了感性与理性结合的合理途径。景观美学特征以不同方式影响整体景观质量,合理运用景观指数对城市景观美学特征进行量化表达,是评估景观质量的重要前提。在整理借鉴景观美学相关研究的基础上,结合景观生态学理论基础,以城市空间内部审美者的角度将城市景观五大美学特征,包括自然性、开阔性、多样性、奇特性和协调性,转化为可定量表达的二维及三维景观指数。量化指标易使用数据进行快速评估,对于城市规划设计有着积极意义。

青海三岔河灰紫色软玉颜色定量表达与紫色成因研究

颜色是衡量宝玉石品质、价格的重要因素,对宝玉石颜色的量化研究一直是宝石科学关注的热点。在透射光条件下观察宝玉石颜色特征是珠宝行业中十分重要的手段。本研究致力于依赖光谱和光谱分析技术,建立一套依照透射法实现软玉颜色定量表达、颜色复原和确定致色机制的方法。以来自中国青海格尔木地区、具有渐变颜色特点的灰紫色软玉为例,采用紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)定量测量、结合国际照明委员会1976 CIE L*a*b*色度学模型转化及计算机软件处理(Adobe Photoshop),实现对特定厚度(1.0 mm)灰紫色软玉样品颜色的定量表达和颜色复原。样品浅色和深色区域复原的颜色与样品透射光下肉眼观察颜色较为接近,存在的色差可能与玉石样品的半透明多晶质结构有关。而对于紫色的致色机理,通过激光剥蚀电感耦合等离子质谱仪(LA-ICP-MS),我们发现微量元素Mn含量随颜色加深呈现递增规律。在较深颜色区域,光致发光光谱(PL)中检测到的以585 nm为中心的发射峰、UV-Vis光谱中以530 nm为中心的吸收峰,以及电子顺磁共振光谱(EPR)的六重超精细分裂峰都在指示Mn^(2+)是导致灰紫色软玉中紫色调的主要原因。本工作对于研究透射光条件下宝玉石样品颜色定量观测和表达提供了确切的实验方法依据,并为采用光谱学确定致色元素以及致色机理提供了有价值的实验信息。

糖尿病慢性皮肤溃疡瘦素及其受体OB-RL的定量表达

目的观察瘦素(Leptin)及其受体OB-RL在糖尿病慢性皮肤溃疡边缘皮肤组织中的定量表达,探讨Leptin及其受体在糖尿病慢性皮肤溃疡发生及难愈合机制中的意义。方法以糖尿病慢性皮肤溃疡边缘皮肤组织为观察组,以正常皮肤组织为对照组,采用HE常规染色观察两组皮肤基本组织学变化,通过反转录PCR法检测两组Leptin及OB-RL mRNA的表达。结果观察组具有典型的组织学改变,与对照组清晰的表皮复层结构,丰富且规则、致密的胶原排列形成了鲜明的组织学反差。对照组及观察组表皮厚度分别为(0.99±0.23)mm、(1.63±0.33)mm,两组真皮层厚度分别为(2.71±0.38)mm、(1.38±0.41)mm,差异均有统计学意义(P<0.01)。Leptin mRNA的表达在对照组及观察组表达分别为(0.46±0.05)%和(0.23±0.02)%,OB-RL mRNA在两组中的表达分别为(0.44±0.09)%和(0.28±0.03)%,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论糖尿病慢性皮肤溃疡Leptin及其受体OB-RL表达下调可能是其愈合延迟的重要原因之一。

互花米草NHX1基因的cDNA全长克隆、序列信息及定量表达分析

以盐生植物互花米草(Spartina alterniflora)为试验材料,利用RACE技术克隆到编码Na+/H+逆向转运蛋白的NHX1基因的cDNA全长序列。利用生物信息学软件及网站对获得的基因核苷酸序列及编码的蛋白质序列进行分析,结果发现该核苷酸序列长度为2 277 bp,开放阅读框为1 623 bp,编码540个氨基酸残基,且该基因所编码的蛋白质与植物的Na+/H+逆向转运蛋白NHX1同源,所以命名为SaNHX1基因。同时氨基酸序列比对显示,其与芦苇(Phragmites australis NHX,BAD95562.1)、玉米(Zea mays NHX,XP_008653443.1)、水稻(Oryza sativa NHX,BAA83337.1)等的NHX亲缘关系相近,同源相似性依次为94%、92%、91%。利用Qiagene Rotor Gene Q荧光实时定量PCR仪对不同时间盐处理及ABA处理的互花米草材料进行荧光定量PCR检测。结果发现,在盐处理及ABA处理的不同处理时期,该基因的相对表达量都发生了明显的变化,这表明该基因受到了盐胁迫及ABA胁迫的诱导,由此可以看出Sa NHX1基因与植物的耐盐性有着密切的关系。

血管瘤组织中p63和Fos蛋白的定量表达

目的 探讨 p6 3基因和c fos基因的蛋白与血管瘤发生发展的关系。方法 采用免疫组织化学S P法对 4 0例血管瘤和 2 0例正常皮肤组织检测 p6 3基因和c fos基因的蛋白表达 ;对所获得的检测结果进行图像分析处理。结果 在正常皮肤组、增生期与消退期血管瘤中 ,p6 3和Fos蛋白的平均光密度分别为 :0 92 3± 0 191,0 0 79± 0 0 2 4 ;8 2 71±1 95 3,0 12 4± 0 0 15 ;0 92 0± 0 187,0 0 88± 0 0 17。增生期组与消退期组、正常皮肤组分别相比 ,p6 3和Fos阳性表达的差异均有显著性 (P <0 0 5 ) ,消退期组与正常皮肤组之间 ,p6 3阳性表达的差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 p6 3基因在血管瘤中并未作为肿瘤抑制基因起作用 ,相反是作为癌基因而促进内皮细胞的增殖 ,可能与血管形成关系密切。c fos在血管瘤的增生中起着重要作用 ,可能与c fos可通过识别bFGF启动子区的特异位点TRE而启动bFGF基因的转录有关。

E2F-1和p21^(WAF1/CIP1)在良恶性多形性腺瘤中的定量表达和意义

目的 研究E2F - 1和 p2 1WAF1/CIP1在良、恶性多形性腺瘤中的表达和意义。方法 实验分为正常组、多形性腺瘤组 (PA)和恶性多形性腺瘤组 (MPA)。利用免疫组化和原位杂交的方法对三组分别进行E2F - 1和p2 1WAF1/CIP1的染色 ,并进行灰度值测量和统计学分析。结果 E2F - 1主要表达在肿瘤性上皮组织 ,软骨样细胞和粘液样组织中也有少量表达。在MPA组中的表达显著高于PA组 ,二者与正常组之间也有显著性差异。P2 1WAF1/CIP1主要在腺管状结构、上皮条索和团块鳞状化生结构的细胞浆中表达 ,在PA和MPA组中的表达均较弱 ,但MPA组比PA组更弱。结论 E2F - 1和p2

电磁感应定律的定量表达式是怎样得出的?

本文介绍Ｆ．Ｎｅｕｍａｎｎ（１８４５年）和Ｗ．Ｗｅｂｅｒ（１８４６年）是怎样从理论上先后建立电磁感应定律定量表达式的．

血管瘤组织中p63的定量表达及临床意义

为探讨皮肤血管瘤组织中 p63基因的表达与血管瘤发生、发展的关系 ,对 40例皮肤血管瘤组织和 2 0例正常皮肤组织用免疫组织化学 S-P法和图像分析技术进行了研究。结果显示 ,增生期血管瘤与消退期血管瘤、正常皮肤组分别相比 ,p63阳性表达的差异均有高度显著性差异 ( P<0 .0 0 1) ;消退期血管瘤与正常皮肤组之间 ,p63阳性表达差异无显著性 ( P>0 .0 5 )

空间点与线目标间方向关系的定量表达

针对现有多种表达模型不能定量表达空间目标间方向关系问题,采用统计模型的定量表达方法,通过AUTOLISP语言编程计算得到折线目标相对于点目标的方向值分布范围,对这组统计值进行排序,求出中值方向,实现以点为参考目标、折线为源目标的方向关系的计算.研究结果表明:该程序能确定出描述折线相对于点的方向关系的分布范围与中值这两个度量,实现方向关系的定量表达.研究结论初步突破了对传统的定性表达目标间方向关系的认识,有助于寻求定量表达算法的有效途径.

山羊激活素A型受体定量表达研究

采用定量PCR技术研究了山羊激活素A型受体在不同山羊品种的心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、卵巢和垂体7个组织中的表达情况。研究发现:ACTR A在不同品种山羊的心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、卵巢和垂体中都有表达。ACTRⅠA和ACTRⅡA在肾脏中含量最高,心、肺中含量最低;各组织中ACTRⅠA与ACTRⅡA呈极显著正相关(P<0.01)。萨能奶山羊ACTRⅠA含量极显著高于南江黄羊及大足黑山羊(P<0.01),南江黄羊、大足黑山羊与萨能奶山羊各组织中ACTRⅡA含量差异均不显著(P>0.05)。繁殖力较低的萨能奶山羊卵巢ACTRⅡA与ACTRⅠA比值显著低于高繁殖力山羊。

鸡Lats1基因在卵泡不同发育期的半定量表达研究

本实验以150日龄的海兰褐蛋鸡为试验材料,采用半定量RT-PCR方法检测海兰褐蛋鸡不同等级卵泡发育时期Lats1基因的mRNA表达水平,实验结果得出Lats1基因存在于海兰褐蛋鸡卵泡发育各个时期,并呈现一定表达规律,说明Lats1基因参与家禽开产时卵泡发育的调控,有促进细胞生长的作用。本实验为进一步研究Hippo信号通路在鸡卵泡不同发育时期控制细胞增殖时空表达模式打下基础。

hrpZ_(Psta)在转基因大豆中定量表达与疫霉根腐病和灰斑病抗性相关研究

以T5转hrpZPsta基因大豆JN29-705-15和JL30-187为材料,利用实时荧光定量PCR技术(Quantitative Real Time PCR,qRT-PCR)检测了目标基因在转基因大豆不同组织中的表达量,分别利用下胚轴侵染法和叶面喷施法鉴定疫霉根腐病抗性和灰斑病抗性,并分析目的基因表达量与疫霉根腐病和灰斑病抗性的相关性。结果表明:hrpZPsta基因在大豆的叶、茎、根、籽粒中均有表达,二个株系平均相对表达量分别为8.2/6.1、0.9/0.7、6.5/4.6和0.8/0.7;T5转hrpZPsta基因大豆抗疫霉根腐病和灰斑病能力与野生型相比均有所提高,JN29-705-15对疫霉根腐病抗性从感病提高到中抗,而JL30-187从中抗提高到抗病;hrpZPsta基因在叶中的表达量也与抗灰斑病能力呈正相关,与病情级别呈极显著负相关。试验结果初步证明了外源基因hrp ZPsta在大豆植株中的表达量与受体植株对疫霉根腐病和灰斑病抗性存在一定的相关性。

稻水象甲卵巢内β1-微管蛋白基因cDNA全长的克隆及定量表达分析

利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分别对中国的孤雌生殖型和美国的两性生殖型稻水象甲卵巢内β1-微管蛋白基因进行了克隆,获得的cDNA全长分别为1727bp和1730bp,均包含1344bp的完整开放阅读框(ORF),编码447个氨基酸,理论分子量约50kD,等电点4.54。同源性分析表明,克隆的β1-微管蛋白基因与其他昆虫的β微管蛋白基因在氨基酸水平上是高度同源的,相似性介于95%～100%。荧光定量PCR分析表明,β1-微管蛋白在孤雌生殖型稻水象甲卵巢内的表达量(3.14×107copies/μL±0.66×107copies/μL)显著高于两性生殖型稻水象甲(5.08×106copies/μL±0.47×106copies/μL)。推测该基因的差异表达对于稻水象甲孤雌生殖过程中纺锤体的组装具有重要意义。

春兰AGL6-3基因的克隆及实时定量表达分析

该研究以春兰(Cymbidium goeringii)正常花及其2枚侧瓣突变成唇瓣样的花瓣(简称:蝶花)为实验材料,采用RT-PCR结合RACE技术从春兰中分离出AGL6-3基因。序列分析表明,AGL6-3基因在春兰正常花和蝶花中序列相同,该基因含有1个720bp长的开放阅读框(ORF),共编码239个氨基酸。系统进化树进行分析表明,该基因属于MADS-box基因中AP1/AGL9组的AGL6同源基因,命名为CgAGL6-3(基因登录号为KU058679)。实时荧光定量表达分析表明,CgAGL6-3在春兰正常花和蝶花各花器官中表达存在差异。在正常春兰中CgAGL6-3基因在唇瓣中强烈表达,在主萼、侧萼及蕊柱中表达量较低,在侧瓣中则微乎其微;而在蝶花中CgAGL6-3基因在唇瓣中强表达,侧瓣中的表达量次之,在主萼、侧萼和蕊柱中的表达量相近且均较低。研究说明,CgAGL6-3基因可能在春兰蝶花侧瓣唇瓣化的过程中扮演重要角色。

河口分汊的定量表达及其基本模式

本文归纳出河口汊道间的四种交接方式:叉、合、结和口以及相应的十三种联线。并引入拓扑学中有关概念,定量表达点和线间关系。在分析河口汊道体系的拓扑学性质后,重新定义再结合因子,指出其与各种点和线、河口三角洲面积、河口汊道体系的外角等,均有一定的相关关系。在天然河口汊道体系中,最多出现的是点和口,其次是合和结;最多出现的线是fj,ff和fo,最少出现的是kk和ko线。最后,根据成因、形态和冲演特性相结合的原则,将河口分汉分成四个基本模式;少汊型、多汊型、河网型和游荡型分汊河口。并运用分汊河道体系的定量表示法,分析了各分汊模式河口汉道体系的拓扑学性质。