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输电线路故障定位中电磁波传导特性的实时分析技术研究
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作者 黄彬彬 《电力设备管理》 2024年第19期169-171,共3页
本文以浙江省某重点输电线路改造项目为例,研究了电磁波传导特性的实时分析技术在输电线路故障定位中的应用,提出了一种基于脉冲反射法(TDR)和行波定位法(TWA)相结合的故障检测方法,对电磁波信号进行去噪、特征提取,以及故障定位。研究... 本文以浙江省某重点输电线路改造项目为例,研究了电磁波传导特性的实时分析技术在输电线路故障定位中的应用,提出了一种基于脉冲反射法(TDR)和行波定位法(TWA)相结合的故障检测方法,对电磁波信号进行去噪、特征提取,以及故障定位。研究结果显示,该技术在各种故障类型下均能显著提高定位精度,平均误差控制在±30m以内,故障处理时间缩短至45min,有效提升了输电线路的维护效率和运行可靠性。 展开更多
关键词 输电线路 故障定位 电磁波传导特性 实时分析技术
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基于实时细胞电子分析技术的三七质量生物评价研究 被引量:5
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作者 孙成祥 雷飞飞 +1 位作者 王建春 潘金火 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期766-769,共4页
目的:建立三七的生物质量控制与评价方法,通过测定其细胞指数值来评价不同产地三七的品质。方法:采用实时细胞电子分析技术(Real-Time Cell-based Assay,RTCA)考察三七提取物针对特定依赖性细胞株的生物细胞活性,分析样品在一定时间内... 目的:建立三七的生物质量控制与评价方法,通过测定其细胞指数值来评价不同产地三七的品质。方法:采用实时细胞电子分析技术(Real-Time Cell-based Assay,RTCA)考察三七提取物针对特定依赖性细胞株的生物细胞活性,分析样品在一定时间内的变化趋势和作用规律,并在最佳时间点测定其细胞指数值。结果:4批不同产地三七样品中,云南楚雄三七在最佳时间点38 h的细胞指数值最高,其生物活性最强。云南文山三七在最佳时间点38 h的细胞指数值最低,其生物活性最弱。结论:建立的基于RTCA的三七生物效价检测方法可初步用于三七质量的评价。 展开更多
关键词 三七 质量评价 实时细胞电子分析技术 细胞指数值
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实时组织弹性成像定量分析技术检测病毒性乙型肝炎肝纤维化分期的初步研究 被引量:6
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作者 郑颖 孟繁坤 +1 位作者 徐晓鸾 穆晓洁 《北京医学》 CAS 2018年第4期338-341,I0003,共5页
目的探讨实时组织弹性成像定量分析技术(real-time tissue elastography,RTE)检测病毒性乙型肝炎肝纤维化分期的价值。方法利用实时组织弹性成像定量分析182例慢性乙型肝炎患者(病例组)及60例健康志愿者(对照组)肝脏弹性的11个变量,以... 目的探讨实时组织弹性成像定量分析技术(real-time tissue elastography,RTE)检测病毒性乙型肝炎肝纤维化分期的价值。方法利用实时组织弹性成像定量分析182例慢性乙型肝炎患者(病例组)及60例健康志愿者(对照组)肝脏弹性的11个变量,以肝组织取活检的病理肝纤维化分级为依据分组,通过多元回归方程,得出肝纤维化指数(LF Index)计算公式。比较LF Index与肝纤维化分级的相关性。结果LF Index=0.043AREA%+4.520SKEW+0.033MEAN-1.002KURT。对照组与病例组之间LF Index的差异均有统计学意义(P<0.05)。LF Index相隔期别的比较,S0与S2、S0与S3、S0与S4之间差异有统计学意义,S1与S3、S1与S4之间差异有统计学意义,S2与S4之间差异有统计学意义(P均<0.05)。肝纤维化分期相邻期别的比较,除S1与S2之间差异有统计学意义(P<0.05),其他相邻期别差异无统计学意义。结论 RTE定量分析可以成为判断乙型肝炎肝纤维化分期的一种无创性检查方法。 展开更多
关键词 乙肝 肝纤维化 实时组织弹性成像定量分析技术
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实时细胞电子分析应用于复方丹参滴丸质量评价的初步研究 被引量:9
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作者 雷飞飞 王建春 +2 位作者 张咏梅 孙成祥 潘金火 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1119-1123,共5页
目的建立复方药物复方丹参滴丸(CDDP)的生物活性检测方法;将细胞指数值(CI)与主要活性成分含有量进行相关性分析,为其质量控制提供研究基础。方法采用实时细胞电子分析技术(RTCA),测定样本对不同细胞株的IC50值,筛选出对复方丹参滴丸有... 目的建立复方药物复方丹参滴丸(CDDP)的生物活性检测方法;将细胞指数值(CI)与主要活性成分含有量进行相关性分析,为其质量控制提供研究基础。方法采用实时细胞电子分析技术(RTCA),测定样本对不同细胞株的IC50值,筛选出对复方丹参滴丸有特定依赖性的细胞株,对不同批次复方丹参滴丸建立时间剂量依赖性细胞反应曲线(TCRPs),以细胞指数值(CI)为考察指标,比较各批次药物的生物活性;测定复方丹参滴丸主要活性成分含有量,并与生物活性进行相关性分析。结果复方丹参滴丸在一定浓度范围内与空白相比对A549细胞株的增殖有明显的抑制作用(P<0.05),并有明显的量效关系(r>0.9);由TCRPs反映各批次滴丸质量稳定,但在特定时间点特定的浓度仍有一定差异,今后可用于同种药物不同批次间的稳定性研究;相关性结果表明复方丹参滴丸生物活性与丹参素含有量有显著性相关(P<0.05)。结论说明本技术能反映复方丹参滴丸生物活性,可与化学成分分析方法结合共同把关中药质量。 展开更多
关键词 复方丹参滴丸 实时细胞电子分析技术 质量评价 相关性
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基于RTCA技术的复方丹参片体外溶出与一致性评价研究 被引量:3
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作者 周悦 马晓斐 +7 位作者 马丽霞 张佳 庄欣雅 余亦婷 张倩 董洁 陈军 严国俊 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期730-736,共7页
目的基于实时电子分析技术(Real-time cell-based assay,RTCA),探讨以细胞生物效应评价复方丹参片体外溶出度的可行性。方法依据大鼠心肌细胞(H9C2)对复方丹参片不同时间的溶出液呈现浓度梯度依赖,利用RTCA技术监测不同时间溶出药液的... 目的基于实时电子分析技术(Real-time cell-based assay,RTCA),探讨以细胞生物效应评价复方丹参片体外溶出度的可行性。方法依据大鼠心肌细胞(H9C2)对复方丹参片不同时间的溶出液呈现浓度梯度依赖,利用RTCA技术监测不同时间溶出药液的细胞动态变化,建立一种以细胞指数(Cell index,CI)为指标的溶出动力学模型。同时计算溶出度,与传统紫外分光光度法测定的溶出曲线进行相关性与一致性评价,利用DDSolver软件进行相关性分析。结果以紫外分光光度法所得到的溶出曲线作为参比,3个不同厂家的复方丹参片溶出曲线差异因子f1均小于15,相似因子f2均大于50。并且2种评价方法下,同一厂家复方丹参片的溶出曲线最佳拟合模型均一致。结论基于RTCA细胞生物效应评价方法可以基本反映复方丹参片体外溶出度的特征。以细胞指数为指标的溶出度评价方法有望成为中药固体制剂体外溶出度新的检测手段。 展开更多
关键词 复方丹参片 体外溶出度 实时细胞电子分析技术 紫外分光光度法 溶出动力学模型
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实时细胞电子分析技术的应用研究进展 被引量:16
6
作者 严国俊 裴燕芳 +2 位作者 朱贞宏 吴洁颖 潘金火 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期169-173,共5页
目的综述实时细胞电子分析技术的研究进展,为中药研究提供参考。方法根据近年来国内外相关文献,对实时细胞电子分析技术的原理、特点及其应用进行归纳总结。结果与结论实时细胞电子分析技术是一种无标记、无侵害的实时细胞电子分析方法... 目的综述实时细胞电子分析技术的研究进展,为中药研究提供参考。方法根据近年来国内外相关文献,对实时细胞电子分析技术的原理、特点及其应用进行归纳总结。结果与结论实时细胞电子分析技术是一种无标记、无侵害的实时细胞电子分析方法。综述了实时细胞电子分析技术的应用研究进展,为其在药学领域进一步应用发展提供参考,并对其在中药及复方领域的应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 实时细胞电子分析技术 应用进展 中药 药学
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实时细胞分析技术与Alamar Blue法用于测定纳米氧化铜细胞毒性的比较研究 被引量:1
7
作者 段链 顾雯 张宏伟 《中国预防医学杂志》 CAS 2016年第7期491-495,共5页
目的通过比较研究实时细胞分析技术(real time cell analyze,RTCA)及Alamar Blue法测定纳米氧化铜体外作用于人胚肺成纤维细胞MRC-5及人正常肺上皮细胞BEAS-2B的毒性作用,探讨RTCA实时细胞分析技术用于测定纳米材料体外细胞毒性的可行... 目的通过比较研究实时细胞分析技术(real time cell analyze,RTCA)及Alamar Blue法测定纳米氧化铜体外作用于人胚肺成纤维细胞MRC-5及人正常肺上皮细胞BEAS-2B的毒性作用,探讨RTCA实时细胞分析技术用于测定纳米材料体外细胞毒性的可行性。方法分别将MRC-5及BEAS-2B细胞接种于RTCA配套16孔板中及普通96孔板中,96孔板中细胞用于Alamar Blue法测定细胞毒性。分别用剂量为0.75g/L、0.38g/L、0.19g/L、0.094g/L、0.047g/L的纳米氧化铜混悬液进行染毒。选择12h、24h、36h、48h、60h时间点计算两种方法测得的IC50值。采用SPSS 16.0分析软件,利用配对t检验,对两种方法所得相同时间点的IC50值进行统计分析,判断其相关性及是否存在差异。结果 MRC-5细胞用RTCA法测定染毒后12 h、24 h、36 h、48 h、60 h的IC50值分别为391 mg/L、249 mg/L、185 mg/L、165mg/L、147mg/L;Alamar Blue法所得相同时间点的IC50值分别为507 mg/L、206 mg/L、172 mg/L、154mg/L、95.2mg/L。两种方法所测得IC50值进行统计分析,差异无统计学意义。BEAS-2B细胞用RTCA法测定染毒后12h、24h、36h、48h、60h的IC50值分别为131 mg/L、83.78 mg/L、65.37 mg/L、53.98mg/L、51.23 mg/L;Alamar Blue法所得相同时间点的IC50值分别为148 mg/L、104 mg/L、77.3mg/L、42.5mg/L、39.2mg/L。两种方法所测得IC50值进行统计分析,差异无统计学意义。结论RTCA实时监测法与Alamar Blue法在相同时间点测定纳米氧化铜体外细胞毒性得IC50值差异无统计学意义,说明RTCA实时监测法测定体外细胞毒性结果可靠,适用于纳米材料的体外毒性研究。 展开更多
关键词 实时细胞分析技术(RTCA) Alamar Blue法 纳米氧化铜 MRC-5细胞 BEAS-2B细胞
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实时细胞电子分析技术用于水蛭、三七质量评价的初步研究 被引量:1
8
作者 梅馨 葛少波 潘金火 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期872-877,共6页
采用实时细胞电子分析技术测定水蛭、三七不同样本的时间剂量依赖性细胞反应曲线(TCRPs),对不同产地样本的TCRPs进行分析,并对生物活性强弱进行排序。同时,采用中国药典2010年版中的化学检测法和凝血酶滴定法分别对水蛭、三七各样本进... 采用实时细胞电子分析技术测定水蛭、三七不同样本的时间剂量依赖性细胞反应曲线(TCRPs),对不同产地样本的TCRPs进行分析,并对生物活性强弱进行排序。同时,采用中国药典2010年版中的化学检测法和凝血酶滴定法分别对水蛭、三七各样本进行同步分析,比较不同检测方法得出结果的相关性。可见以实时细胞电子分析技术为基础的细胞生物活性测定结果与另两法所得结果基本一致。说明本技术能反映中药生物活性,有望为中药质量标准研究提供一种新方法。 展开更多
关键词 水蛭 三七 质量评价 实时细胞电子分析技术 细胞生物活性测定法
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基于实时细胞电子分析技术的复方丹参片质量评价研究
9
作者 马晓斐 严国俊 +4 位作者 潘金火 陈军 张倩 韩星星 王建春 《国际中医中药杂志》 2020年第3期251-255,共5页
目的利用实时细胞电子分析技术(real-time cell-based assay,RTCA)检测不同浓度复方丹参片对细胞的影响,筛选出对复方丹参片反应灵敏、稳定且有明显浓度依赖的细胞株,为复方丹参片进行细胞生物效应的质量评价提供实验依据。方法采用RTC... 目的利用实时细胞电子分析技术(real-time cell-based assay,RTCA)检测不同浓度复方丹参片对细胞的影响,筛选出对复方丹参片反应灵敏、稳定且有明显浓度依赖的细胞株,为复方丹参片进行细胞生物效应的质量评价提供实验依据。方法采用RTCA分析复方丹参片对人脐静脉内皮细胞(Huvec)、大鼠心肌细胞(H9C2)和大鼠胸主动脉平滑肌细胞(RA-VSMC)的影响,形成时间剂量依赖性细胞反应曲线,测定细胞指数,筛选最优的细胞株。结果3种细胞对复方丹参片的效应均有明显反应,RA-VSMC的灵敏度相对较差,3种细胞的有效浓度范围也有差异,浓度梯度依赖性也各有不同。H9C2细胞对复方丹参片具有良好的敏感度,呈浓度梯度依赖,且有效浓度范围为0.3~1.8 mg/ml,可作为复方丹参片质量评价的细胞。结论RTCA技术可实时监测记录细胞生长状态,准确反映复方丹参片对不同细胞株的影响,数据客观可靠,为复方丹参片的质量评价研究提供了新的实验技术和方法。 展开更多
关键词 复方丹参片 实时细胞电子分析技术 细胞指数 细胞增殖 质量评价
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实时细胞分析技术结合模式识别评价祖师麻注射液类过敏反应 被引量:2
10
作者 孙岩 吴晨光 +1 位作者 韩群 黄胜阳 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期2865-2871,共7页
建立一种体外类过敏反应评价方法,快速评价不同厂家15批次祖师麻注射液的类过敏反应。采用体外嗜碱性白血病细胞株RBL-2H3细胞模型,选择Compound 48/80为阳性药,利用实时细胞分析(real-time cell analysis,RTCA)系统检测药物干预后引起... 建立一种体外类过敏反应评价方法,快速评价不同厂家15批次祖师麻注射液的类过敏反应。采用体外嗜碱性白血病细胞株RBL-2H3细胞模型,选择Compound 48/80为阳性药,利用实时细胞分析(real-time cell analysis,RTCA)系统检测药物干预后引起的细胞指数(cell index,CI)变化,并利用甲苯胺蓝染色法观察细胞形态、骨架变化验证RBL-2H3细胞的脱颗粒情况。采用聚类方法对15批祖师麻注射液作用于RBL-2H3细胞后的CI进行分析。结果表明,Compound 48/80(20μg·mL-1)使细胞形态和细胞骨架均发生明显改变,发生明显的脱颗粒现象。CI在加药30 min内快速下降,之后下降趋势变缓,提示RTCA系统可以快速敏感地评价RBL-2H3细胞脱颗粒作用。15批祖师麻注射液对RBL-2H3细胞的CI结合聚类分析(CA),提示不同厂家的祖师麻注射液对RBL-2H3细胞影响不同,S1~S8与Compound 48/80组聚为一类,提示该样品可能潜在临床类过敏反应;S9~S15与空白对照组聚为一类,提示该样品无类过敏样反应。该研究建立了一套基于RTCA系统结合模式识别的类过敏反应体外快速评价技术,可用于中药注射剂类过敏反应的体外快速评价。 展开更多
关键词 祖师麻注射液 类过敏反应 实时细胞电子分析技术 聚类分析
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鸦胆子饮片及药渣的抗肿瘤活性比较及其鸦胆子苦醇和鸦胆子苦素A的含量测定 被引量:6
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作者 严国俊 韩露 +5 位作者 谢辉 苏联麟 马晓斐 张倩 陆兔林 毛春芹 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期714-718,共5页
目的比较鸦胆子饮片及提油后药渣的抗肿瘤活性,并比较两者的苦木内酯类成分鸦胆子苦醇及鸦胆子苦素A的含量。方法采用实时电子细胞分析技术(RTCA)考察鸦胆子饮片及药渣对A549细胞的抑制效应,并采用高效液相色谱法同时测定两者的鸦胆子... 目的比较鸦胆子饮片及提油后药渣的抗肿瘤活性,并比较两者的苦木内酯类成分鸦胆子苦醇及鸦胆子苦素A的含量。方法采用实时电子细胞分析技术(RTCA)考察鸦胆子饮片及药渣对A549细胞的抑制效应,并采用高效液相色谱法同时测定两者的鸦胆子苦醇及鸦胆子苦素A的含量。结果鸦胆子饮片及药渣对A549细胞都具有一定的抑制效应,饮片和药渣的IC50值分别为4.576~7.256 mg/mL和4.115~9.766 mg/mL,鸦胆子饮片和鸦胆子药渣中鸦胆子苦醇及鸦胆子苦素A的总含量分别为0.113 9%~0.143 5%和0.110 0%~0.135 9%。结论鸦胆子饮片及药渣都具有一定的抗肿瘤活性,药渣中的抗肿瘤活性成分鸦胆子苦醇及鸦胆子苦素A的含量与饮片比较,没有显著差异,鸦胆子提油后的药渣可针对苦木内酯类成分进行深入研究开发和资源综合利用。 展开更多
关键词 鸦胆子 实时电子细胞分析技术 鸦胆子苦醇 鸦胆子苦素A 含量测定
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shRNA沉默HuR抑制肝细胞癌细胞系SMMC-7721的增殖、迁移及侵袭能力 被引量:4
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作者 湛钊 周莉莉 +4 位作者 高义沙 余畅 陈相屹 胡桐 孙达权 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期952-960,共9页
人抗原R (human antigen R,HuR)基因在肺癌、乳腺癌等多种肿瘤组织中高表达。推测HuR基因也参与肝癌的发展过程。为探索HuR对肝细胞癌细胞系SMMC-7721的增殖、迁移和侵袭的作用,本研究通过蛋白质印迹实验,检测HuR在肝细胞癌细胞系和正... 人抗原R (human antigen R,HuR)基因在肺癌、乳腺癌等多种肿瘤组织中高表达。推测HuR基因也参与肝癌的发展过程。为探索HuR对肝细胞癌细胞系SMMC-7721的增殖、迁移和侵袭的作用,本研究通过蛋白质印迹实验,检测HuR在肝细胞癌细胞系和正常肝细胞中蛋白质的表达水平。结果显示,肝细胞癌细胞系SMMC-7721 HuR的表达量显著高于正常肝细胞HL-7702。合成特异性靶向HuR基因的shRNA,转染肝细胞癌细胞系SMMC-7721,检测结果发现,HuR基因表达量下调90%。沉默HuR,实时细胞分析技术(real time cell analysis,RTCA)结果显示,细胞增殖能力降低55%,侵袭能力下降75%;细胞划痕实验结果显示,迁移能力下降80%;克隆形成实验中细胞克隆数减少85%;此外,在HuR敲低稳转肝细胞癌细胞系SMMC-7721细胞中过表达Bcl-2,其细胞学现象部分获得逆转。激光共聚焦扫描系统检测结果显示,Bcl-2主要定位于肝细胞癌细胞系SMMC-7721的核膜及胞质。蛋白质印迹法检测结果显示,沉默HuR,Bcl-2下调92%,Survivin下调55%,Twinst1下调69%,N-钙黏着蛋白(N-cadherin)下调48%,E-钙黏着蛋白(E-cadherin)上调1.5倍。以上结果表明,HuR可能通过调控定位于核膜及胞质上的Bcl-2来参与肝细胞癌细胞系SMMC-7721的增殖、迁移、侵袭及克隆形成过程,HuR基因有望成为临床上治疗肝癌的一个新的潜在靶点。 展开更多
关键词 人抗原R SMMC-7721 实时细胞分析技术 增殖 激光共聚焦系统
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牛分枝杆菌重组蛋白TB10.4对RAW264.7细胞TLR2表达和分布的影响 被引量:1
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作者 刘淑清 李平俊 +3 位作者 鑫婷 侯绍华 朱鸿飞 贾红 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期83-90,共8页
为探讨牛分枝杆菌TB10.4蛋白与RAW264.7细胞的相互作用关系,表达纯化了rTB10.4,并采用IFN-γ释放试验和Western blot检测其细胞活性。使用不同剂量rTB10.4与RAW264.7细胞共孵育后,采用实时无标记动态细胞分析技术检测rTB10.4对RAW264.7... 为探讨牛分枝杆菌TB10.4蛋白与RAW264.7细胞的相互作用关系,表达纯化了rTB10.4,并采用IFN-γ释放试验和Western blot检测其细胞活性。使用不同剂量rTB10.4与RAW264.7细胞共孵育后,采用实时无标记动态细胞分析技术检测rTB10.4对RAW264.7细胞生长影响的最佳时间点和最佳剂量。在此基础上,采用量化流式细胞仪分析重组蛋白rTB10.4对RAW264.7细胞TLR2表达的影响。结果表明,获得的rTB10.4具有较强的T细胞和B细胞活性,rTB10.4对RAW264.7细胞的作用呈剂量依赖性,作用起效时间为12~24h,诱导作用在16~18h达到最大效应值。量化流式分析仪分析结果表明,rTB10.4刺激可显著增强RAW264.7细胞的细胞膜上TLR2的表达。 展开更多
关键词 TB10.4重组蛋白 牛分枝杆菌 RAW264.7细胞 动态实时细胞分析检测技术 TLR2
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当归多糖改善大鼠急性心肌缺血损伤作用的研究 被引量:12
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作者 蒲双双 牛小伟 张钲 《心肺血管病杂志》 2020年第3期338-342,共5页
目的:确定当归多糖(ASP)对急性心肌梗死后心肌缺血损伤的作用。方法:在H9c2细胞中建立氧糖剥夺(OGD)的体外缺血模型。运用实时无标记细胞分析技术(RTCA)分析ASP对细胞指数(CI)的影响。采用冠状动脉左前降支结扎术在SD大鼠上建立体内缺... 目的:确定当归多糖(ASP)对急性心肌梗死后心肌缺血损伤的作用。方法:在H9c2细胞中建立氧糖剥夺(OGD)的体外缺血模型。运用实时无标记细胞分析技术(RTCA)分析ASP对细胞指数(CI)的影响。采用冠状动脉左前降支结扎术在SD大鼠上建立体内缺血模型,通过HE染色观察不同浓度ASP(100 mg/kg,200 mg/kg,400 mg/kg)对心肌缺血损伤面积的影响。结果:RTCA分析显示:与OGD组相比,ASP干预显著增加心肌CI(P<0.05)。HE染色结果显示:与模型组相比,ASP处理降低了心肌缺血损伤面积,且呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:ASP在急性心肌梗死中具有改善心肌缺血损伤程度的作用。 展开更多
关键词 当归多糖 实时无标记细胞分析技术 急性心肌梗死
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多壁碳纳米管致人肝癌细胞HepG2毒性及代谢酶表达变化 被引量:3
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作者 赵琢 柳明 +6 位作者 杨磊 刘伟 王华 刘美玲 张秀霞 申敬 张园 《新型炭材料》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第6期600-605,共6页
采用实时无标记细胞分析系统研究多壁碳纳米管(MWCNTs)对人肝癌细胞HepG2毒性作用,确定MWCNTs是否会影响肝脏代谢酶谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)和细胞色素P450亚酶CYP1A1的表达。利用0.12、0.25、0.5、1和2 mg/mL的MWCNTs处理HepG2细胞24... 采用实时无标记细胞分析系统研究多壁碳纳米管(MWCNTs)对人肝癌细胞HepG2毒性作用,确定MWCNTs是否会影响肝脏代谢酶谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)和细胞色素P450亚酶CYP1A1的表达。利用0.12、0.25、0.5、1和2 mg/mL的MWCNTs处理HepG2细胞24、48和72h后,采用噻唑蓝比色法(MTT)测定MWCNTs对肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用。利用实时无标记动态细胞分析(RTCA)系统动态监测不同剂量(0.25、0.5、1 mg/mL)MWCNTs对HepG2细胞生长的影响。细胞经MWCNTs处理48 h后,实时定量荧光PCR(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)检测肝脏代谢酶GSTP1和CYP1A1的mRNA水平和蛋白水平的变化情况。结果显示MWCNTs可以抑制HepG2细胞的增殖,且呈一定的剂量和时间依赖性。实时无标记细胞分析法能够准确监测MWCNTs对细胞增殖的过程,并且能避免多壁碳纳米管材料对数据的干扰。经MWCNTs处理后的细胞中肝脏代谢酶GSTP1mRNA水平和蛋白水平上调,而CYP1A1的mRNA水平和蛋白水平显著下降。 展开更多
关键词 多壁碳纳米管 HEPG2细胞 毒性研究 实时无标记细胞分析技术 肝脏代谢酶
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脐血来源NK细胞的体外扩增及其抗肿瘤细胞活性的研究
16
作者 韩强 张志刚 +4 位作者 刘坤 朱贤兑 金媛媛 张志斐 杨兆勇 《中国医药生物技术》 2022年第5期412-417,共6页
目的研究脐血单个核细胞来源NK细胞的培养方法及其对不同类型肿瘤细胞的杀伤活性。方法自脐静脉消毒后全封闭采集脐血,肝素抗凝,分离单个核细胞,用NK细胞培养基培养14 d,流式细胞仪检测其表面标志,并使用RTCA实时无标记细胞分析技术检... 目的研究脐血单个核细胞来源NK细胞的培养方法及其对不同类型肿瘤细胞的杀伤活性。方法自脐静脉消毒后全封闭采集脐血,肝素抗凝,分离单个核细胞,用NK细胞培养基培养14 d,流式细胞仪检测其表面标志,并使用RTCA实时无标记细胞分析技术检测细胞增殖曲线,观察NK效应细胞按效靶比1:1、5:1与10:1对肿瘤细胞的杀伤作用。结果培养14 d的脐血单个核细胞,细胞总数扩增294倍,其中NK细胞扩增5580倍。NK细胞CD3^(-)CD56^(+)阳性率为97.93%,与杀伤功能相关的重要分子CD16、NKG2D、NKp30、NKp44的表达阳性率均在95%以上。对A549肺癌细胞株作用6 h的杀伤活性,在1:1~10:1效靶比范围内,随着效靶比增加,杀伤活性从(78.16±2.41)%逐渐增强到(95.71±3.21)%;并且在效靶比1:1的情况下,随着作用时间从6 h延长到24 h,杀伤活性也从(78.16±2.41)%逐渐增强到(96.33±2.15)%。结论建立了无需分选细胞、无需滋养层细胞、操作简单、通用性强的脐血NK细胞培养方法,获得的NK细胞纯度高,对肿瘤细胞的杀伤作用强。 展开更多
关键词 自然杀伤细胞 脐血 表面标志 实时无标记动态细胞分析技术 体外扩增 抗肿瘤
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Damage detection of frames using the increment of lateral displacement change
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作者 王建民 陈龙珠 《Journal of Zhejiang University-Science A(Applied Physics & Engineering)》 SCIE EI CAS CSCD 2005年第3期202-212,共11页
The method proposed in this paper is based on the fact that the damage in different types of structural members has distinctive influence on the structural stiffness. The intrinsic mechanical property of the structure... The method proposed in this paper is based on the fact that the damage in different types of structural members has distinctive influence on the structural stiffness. The intrinsic mechanical property of the structure is tapped and fully utilized for damage detection. The simplified model of the flexibility of frames treats the individual storeys as springs in series and the frame as an equivalent column. It fully considers the main deformation of all beams and columns in the frame. The deformation property of the simplified model accorded well with that of the actual frame model. The obtained increment of lateral displacement change (IOLDC) at the storey level was found to be very sensitive to the local damage in the frame. A damage detection method is pro- posed using the IOLDCs as the damage identification parameters. Numerical examples demonstrate the potential applicability of this method. 展开更多
关键词 Damage detection Increment of lateral displacement change Static test FRAME Equivalent column
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尖叶假龙胆有效成分的活性追踪分离及对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用研究 被引量:8
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作者 吕丽娟 任凯 +1 位作者 那木汗 李旻辉 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1957-1963,共7页
目的从尖叶假龙胆不同极性部位中寻找对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤具有较强保护作用的化合物。方法采用活性追踪分离的方式,通过H_2O_2诱导PC12细胞损伤建立氧化应激损伤模型,利用实时细胞分析技术(real-time cell analysis,RTCA)研究... 目的从尖叶假龙胆不同极性部位中寻找对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤具有较强保护作用的化合物。方法采用活性追踪分离的方式,通过H_2O_2诱导PC12细胞损伤建立氧化应激损伤模型,利用实时细胞分析技术(real-time cell analysis,RTCA)研究尖叶假龙胆不同极性部位对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用;采用HPLC法测定具有活性的单体化合物的质量分数,并确定其化学结构。结果尖叶假龙胆正丁醇和醋酸乙酯部位对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤具有保护作用。同时,从尖叶假龙胆正丁醇和醋酸乙酯部位中分离得到的化合物1、2、3、5也对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤具有保护作用。其中化合物1和2的保护作用在3.125-50.000μmol/L呈一定剂量依赖性,浓度为50.000μmol/L时,对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用最强;而化合物3和5的保护作用在3.125-50.000μmol/L内不具有剂量依赖性,浓度分别为25.000、3.125μmol/L时,对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用最强。经结构鉴定,化合物1、2、3、5分别为雏菊叶龙胆酮、去甲基雏菊叶龙胆酮、当药醇苷及去甲基当药醇苷。结论化合物1、2、3、5对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤具有保护作用,可能是尖叶假龙胆抗氧化的主要活性成分。 展开更多
关键词 尖叶假龙胆 PC12细胞 H2O2 氧化应激 实时细胞分析技术 雏菊叶龙胆酮 去甲基雏菊叶龙胆酮 当药醇苷 去甲基当药醇苷
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基于细胞生物电传感效应的复方丹参片溶出动力学研究 被引量:10
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作者 马晓斐 王建春 +5 位作者 潘金火 谢辉 陈军 张倩 韩星星 严国俊 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第17期4131-4137,共7页
目的建立复方丹参片的细胞生物电传感效应模型,以此进行复方丹参片的溶出动力学研究。方法以实时细胞电子分析技术(real-time cell-based assay,RTCA)为手段,测定复方丹参片的体外溶出度,建立溶出动力学模型,并与紫外分光光度法进行比... 目的建立复方丹参片的细胞生物电传感效应模型,以此进行复方丹参片的溶出动力学研究。方法以实时细胞电子分析技术(real-time cell-based assay,RTCA)为手段,测定复方丹参片的体外溶出度,建立溶出动力学模型,并与紫外分光光度法进行比较验证。结果 CCK-8实验和RTCA实验联合筛选出对复方丹参片有特定依赖性的细胞株,建立基于RTCA技术的复方丹参片溶出动力学模型,得到最佳拟合模型Weibull模型ln{ln[1/(1-Q)]}=1.071 4 lnt-3.736 7;建立基于紫外分光光度法的复方丹参片溶出动力学模型,得到最佳拟合模型Weibull模型ln{ln[1/(1-Q)]}=1.0804lnt-3.7234;两者的Weibull模型比较,RTCA拟合的模型效果更佳。结论 RTCA技术应用于中药复方固体制剂溶出动力学研究,具有可行性,并为中药及中药复方质量评价提供了新思路。 展开更多
关键词 复方丹参片 体外溶出度 实时细胞电子分析技术 溶出动力学模型 CCK-8实验 Weibull模型
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脂多糖刺激多能干细胞诱导人源心肌细胞与大鼠心肌细胞的体外模型比较
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作者 朱永城 江慧琳 +4 位作者 陈美婷 林珮仪 莫均荣 茅海峰 陈晓辉 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期459-463,共5页
目的比较脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)对多能干细胞诱导的人源心肌细胞(human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes,hiPS-CMs)及原代新生大鼠心肌细胞(cardiomyocytes,CMs)的影响。方法不同浓度LPS处理hiPS-CMs... 目的比较脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)对多能干细胞诱导的人源心肌细胞(human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes,hiPS-CMs)及原代新生大鼠心肌细胞(cardiomyocytes,CMs)的影响。方法不同浓度LPS处理hiPS-CMs和原代新生大鼠CMs 24~48 h,通过实时无标记细胞分析技术(xCELLigence Real-Time Cell Analyser Cardio system RTCA)观察hiPS-CMs和原代新生大鼠CMs的电生理变化;qRT-PCR方法检测NPPB mRNA表达水平和qPCR阵列法检测炎性基因表达水平。结果不同浓度LPS刺激后,原代新生大鼠CMs的电生理变化为搏动频率增加和搏动幅度减少(P<0.01),NPPB mRNA表达水平增加(P<0.01)。在hiPS-CMs中,相对应的LPS浓度刺激未能引起搏动幅度和搏动频率显著变化(P>0.05),NPPB mRNA表达水平未显著增加(P>0.05)。进一步增加浓度(2.5μg/mL~40μg/mL),hiPS-CMs的搏动幅度和搏动频率仍未发生明显变化(P>0.05),NPPB mRNA在高浓度LPS(5μg/mL~40μg/mL)发生差异性改变(P<0.01)。最后,在炎症相关基因表达方面,原代新生大鼠CMs表现为C3、Gpnmb、Atf3、Il6r和Ly96基因水平上调至1.5倍,hiPS-CMs表现为AK4、TOLLIP、SPP1、FABP1、IL6R、LY96和C3基因水平上调至1.5倍。结论与原代新生大鼠CMs相比,hiPS-CMs受到LPS的损伤明显减轻,表现出不同的炎症基因表达模式。 展开更多
关键词 脓毒症 脓毒症性心肌病 多能干细胞诱导的人源心肌细胞 大鼠心肌细胞 实时无标记细胞分析技术 脂多糖 体外模型 炎性基因
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