阵列细丝直径实时快速检测系统设计

为实现并行化、非接触、实时的细丝直径测量,设计了一种基于复杂可编程逻辑器件(complex programmable logic device,CPLD)的阵列细丝直径实时快速检测系统。阵列化传感系统,使用CPLD解算直径,并行测量多条细丝。显著降低了系统的数据传输量,缩短了直径解算时间,提高直径检测频率至5 kHz,实现了对24根细丝阵列并行测量。在0.1 mm~0.3 mm及0.3 mm~1.0 mm的直径范围内动态测量重复精度分别为3.5μm和8.3μm,动态重复性误差百分比绝对值分别低于1.21%与1.43%,满足了实时快速检测阵列细丝直径的需求。

叠氮溴化丙锭-荧光定量PCR法实时快速检测5种乳杆菌活菌数方法的建立与应用

【背景】乳杆菌属是发酵食品中最常见的微生物之一,与食品的品质和安全密切相关,定量检测乳杆菌活菌数、解析乳杆菌群落组成对发酵乃至肠道微生物等具有重要意义。【目的】建立一种在种水平上定量检测5种乳杆菌活菌数的叠氮溴化丙锭-荧光定量PCR(propidium monoazide-quantitative PCR,PMA-qPCR)检测方法并探讨其适用性。【方法】以植物乳杆菌、发酵乳杆菌、短乳杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌等发酵食品中常见的5种乳杆菌为目标菌株,查找并筛选特异性引物用于荧光定量PCR(qPCR)检测,优化叠氮溴化丙锭(PMA)处理条件,测定PMA-qPCR检测法的特异性、灵敏度及可靠性。最后利用PMA-qPCR法检测黄酒酿造过程中5种乳杆菌的活菌数。【结果】PMA最佳处理条件为:浓度20μmol/L下暗处理15 min后曝光15 min,此时可抑制样品中99.89%的死菌DNA扩增。该方法特异性高,能够准确识别5种乳杆菌;线性关系强,R2>0.98;灵敏度高,检测限为101.8-103.2 CFU/mL;重复性好,Cq值变异系数小于1%;与平板计数相比差异不显著(统计学上),P>0.05。利用该方法检测黄酒中5种乳杆菌的活菌数,发现发酵乳杆菌、干酪乳杆菌和短乳杆菌是主要的乳杆菌(总计占比59%-89%),与已知黄酒酿造中乳杆菌群落组成相符。【结论】建立的PMA-qPCR法能够快速、准确地检测5种乳杆菌的活菌数,为解析样品中乳杆菌的实时组成及检测具有活性但不可培养(viable but nonculturable,VBNC)状态的乳杆菌提供了可靠的手段。

基于风险管理的口腔产品和化妆品原料实时微生物快速检验替代方法的方法学验证

将考察BioFirst实时微生物快速检测系统作为口腔护理产品原料和化妆品原料微生物5项检验的替代方法的可行性,选取两种不同类型的口腔护理产品原料和化妆品原料二氧化硅H型和山梨醇,参照《中国药典(2020版)》附录药品微生物检验替代方法验证指导原则的有关内容,分别从专属性、检测限、重复性以及耐用性考察BioFirst实时微生物快速检测系统方法作为2015版《化妆品安全技术规范》微生物检验方法的替代方法的可行性。实验结果表明,BioFirst实时微生物快速检测系统方法和2015版《化妆品安全技术规范》微生物检验方法无明显差异,BioFirst实时微生物快速检测系统方法可用于山梨醇和二氧化硅H型的微生物检验。

实时荧光定量PCR快速检测对虾IHHNV载量方法的创建

近年来,因感染虾肝肠胞虫,对虾生长缓慢现象频发。虾肝肠胞虫在宿主肝胰腺小管上皮细胞质内复制,目前主要通过组织学观察及LAMP检测方法诊断。为建立快速定量灵敏的PCR方法,用于对虾传染皮下及IHHIV(传染性皮下及造血组织坏死病毒)早期诊断监测,本文使用生物学软件进行序列化对比,优化实时荧光定量PCR反应条件,提高特异性灵敏度。研究表明,线性范围5×102^(5)×107拷贝/ml,灵敏度超过普通PCR的1/5。

BioFirst实时双温微生物快速检测系统在口腔护理产品原料和化妆品原料中微生物快速检验的研究

本实验采用BioFirst实时双温微生物快速检测系统与《2015版化妆品安全技术规范》对口腔护理产品原料和化妆品原料中的菌落总数、霉菌和酵母菌数、耐热大肠菌群、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌进行平行实验,实验证明,BioFirst实时微生物双温快速检测系统能够对口腔护理产品原料和化妆品原料的微生物进行准确、快速检测,与《2015版化妆品安全技术规范》检测法结果完全一致,验证了BioFirst实时双温微生物快速检测系统检测简便省时、实时快速、准确灵敏、检测量大的特点以及对口腔护理产品原料和化妆品原料微生物检测的适用性。

乳制品及婴幼儿配方食品中蜡样芽孢杆菌的快速检测

蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)是一种常见的食源性致病菌,通过产生腹泻毒素和呕吐毒素导致食物中毒。针对蜡样芽孢杆菌的特异性卵磷脂-水解磷脂酶C基因(pc-plc)进行实时荧光PCR检测,开发出一种新的快速检测方法,能够快速准确地检测乳制品及婴幼儿配方食品中的蜡样芽孢杆菌。该方法具有较高的特异性,灵敏度可达150 g-1。人工污染实验表明,在婴儿米粉中蜡样芽孢杆菌检测灵敏度可到200 g-1;在巴氏杀菌乳、酸奶、婴幼儿奶粉中检测灵敏度为103g-1。

Soleris检测技术在生乳细菌总数快速测定中的应用

通过使用Soleris仪器,建立了一种将实时光电微生物检测技术用于细菌总数快速测定的方法。实验得到了生乳细菌总数标准曲线Log CFU=7.634-0.472×DT(R2=-0.93);并用国标平板计数法对标准曲线进行了验证,结果表明Soleris法测得的结果与平板计数结果之间没有显著性差异,P<0.05,重复性实验结果RSD值均小于5%。与平板计数法相比,该方法具有检测时间短、操作简单快捷等优点,可使检测时间缩短至少38 h,是一种可行的生乳细菌总数检测方法。

Soleris实时光电微生物快速检测系统在乳品微生物检测中的应用效果研究

利用Soleris实时光电微生物快速检测系统(以下简称Soleris系统)对不同种类乳品中的微生物指标(菌落总数、大肠菌群、霉菌和酵母)的快速检测效果进行了研究。以市售的各种乳品为基质,通过接入定量的菌株进行阴性、阳性对照,同时采用传统标准方法进行了辅助验证。结果表明:对检测的各种乳品,在适宜的条件下,Soleris系统均能在较短的时间内进行快速有效的检测,最长检测时间为菌落总数18 h,大肠菌群14 h,霉菌和酵母48 h,产品中菌量越多,检测时间越短;并且与标准平板计数法具有良好的相关性。