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LAMP实时浊度法检测转基因水稻Bt63品系
被引量:
9
1
作者
吴少云
唐大运
+1 位作者
李琳
石磊
《食品与机械》
CSCD
北大核心
2012年第5期79-82,共4页
采用环介导等温扩增技术(LAMP),针对转基因水稻Bt63品系外源基因与内源基因结合处序列设计4条特异性引物,利用浊度仪实时监测扩增过程,建立Bt63品系的快速检测技术体系,并对反应温度、灵敏度、特异性、稳定性和实际样品检测能力进行初...
采用环介导等温扩增技术(LAMP),针对转基因水稻Bt63品系外源基因与内源基因结合处序列设计4条特异性引物,利用浊度仪实时监测扩增过程,建立Bt63品系的快速检测技术体系,并对反应温度、灵敏度、特异性、稳定性和实际样品检测能力进行初步探索。结果表明,LAMP实时浊度法能够特异性检测转基因水稻Bt63品系,其最低检出限为0.01%,是普通PCR方法的10倍,具有广泛的应用价值。
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关键词
环介导等温扩增技术
转基因水稻
实时浊度法
外源基因
内源基因
检测
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职称材料
嗜水气单胞菌与温和气单胞菌的LAMP检测方法的建立
被引量:
5
2
作者
李嘉彬
马艳平
+5 位作者
柯浩
郝乐
刘振兴
马江耀
梁志凌
李玉谷
《南方水产科学》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期8-16,共9页
利用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)分别建立嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,AH)与温和气单胞菌(A.sobria,AS)的快速检测方法。针对嗜水气单胞菌pilin基因、温和气单胞菌zipA基因设计特异性LAMP...
利用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)分别建立嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,AH)与温和气单胞菌(A.sobria,AS)的快速检测方法。针对嗜水气单胞菌pilin基因、温和气单胞菌zipA基因设计特异性LAMP引物。在恒温条件下利用实时浊度仪对2组引物进行特异性和灵敏度试验,并以琼脂糖凝胶电泳和核酸染料颜色变化对扩增结果进行判定。结果显示,LAMP实时浊度法能够特异地检测嗜水气单胞菌和温和气单胞菌,最低检出限分别为46 fg·mL-1和320 fg·mL-1,是普通PCR方法的104倍和102倍;并能应用于已知临床样品检测。该研究建立的嗜水气单胞菌与温和气单胞菌LAMP快速检测方法具有高效、特异、灵敏的特点。
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关键词
环介导等温扩增技术
嗜水气单胞菌
温和气单胞菌
实时浊度法
检测
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职称材料
LAMP法鸟类性别鉴定的研究与应用
被引量:
6
3
作者
李巍
杨卓
+5 位作者
陈明非
高东梅
刘佳
苍真伟
程淑晶
王德强
《现代畜牧兽医》
2017年第3期12-18,共7页
本研究利用鸡W染色体中EE0.6序列上的Eco R片段为靶序列,进行引物设计,建立了基于LAMP法的快速鸟类性别鉴定方法。试验表明,该引物可用于多属种鸟类的性别鉴定,在64℃条件下,60 min即可完成检测。同时利用实时浊度法和荧光目视法两种LAM...
本研究利用鸡W染色体中EE0.6序列上的Eco R片段为靶序列,进行引物设计,建立了基于LAMP法的快速鸟类性别鉴定方法。试验表明,该引物可用于多属种鸟类的性别鉴定,在64℃条件下,60 min即可完成检测。同时利用实时浊度法和荧光目视法两种LAMP检测法对体系进行了敏感性试验,并与PCR方法进行比较,实时浊度法与荧光目视法敏感性相近,是PCR方法的100倍。方法建立后,在大连老虎滩鸟语林进行了11目14科35种鸟类的性别鉴定临床试验,符合率为100%。
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关键词
LAMP
鸟类
性别鉴定
实时浊度法
荧光目视法
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职称材料
小反刍兽疫病毒RT-LAMP检测方法的研究
被引量:
4
4
作者
杨卓
于汉勋
李巍
《现代畜牧兽医》
2015年第7期8-14,共7页
本试验利用浊度仪,采用实时浊度法进行小反刍兽疫病毒RT-LAMP方法检测。试验表明在65℃,50 min内即可完成对小反刍兽疫病毒的检测。通过敏感性试验证明了该试验方法只能检测目的病毒,而与同属病毒无交叉反应,灵敏性试验表明其灵敏度与Re...
本试验利用浊度仪,采用实时浊度法进行小反刍兽疫病毒RT-LAMP方法检测。试验表明在65℃,50 min内即可完成对小反刍兽疫病毒的检测。通过敏感性试验证明了该试验方法只能检测目的病毒,而与同属病毒无交叉反应,灵敏性试验表明其灵敏度与Real-time RT-PCR方法相当,临床样本试验表明其准确性与RT-PCR检测试剂盒相当。
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关键词
实时浊度法
小反刍兽疫病毒
检测
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职称材料
小反刍兽疫病毒RT-LAMP快速检测和鉴别方法的建立
被引量:
4
5
作者
杨卓
于汉勋
李巍
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第9期930-936,共7页
采用人工合成方法获得小反刍兽疫病毒N蛋白基因的核酸质粒,并利用该质粒进行小反刍兽疫病毒通用型引物和鉴别型引物的筛选。再经过对中国动物卫生与流行病学中心临床样品进行敏感性试验和对最佳引物进行验证,从而建立鉴别小反刍兽疫病...
采用人工合成方法获得小反刍兽疫病毒N蛋白基因的核酸质粒,并利用该质粒进行小反刍兽疫病毒通用型引物和鉴别型引物的筛选。再经过对中国动物卫生与流行病学中心临床样品进行敏感性试验和对最佳引物进行验证,从而建立鉴别小反刍兽疫病毒新疆株和西藏株的RT-LAMP方法。结果显示,在65℃50min内即可完成对小反刍兽疫病毒的检测和鉴别。特异性、灵敏性试验结果表明,建立的RT-LAMP方法中通用型引物的灵敏度与Real-time RT-PCR相当,鉴别型引物的灵敏度是RT-PCR的10倍,临床样品的检测结果表明,本研究建立的RT-LAMP的准确性高于北京世纪元亨公司研制的小反刍兽疫病毒RTPCR检测试剂盒。
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关键词
小反刍兽疫病毒
实时浊度法
检测
鉴别
原文传递
题名
LAMP实时浊度法检测转基因水稻Bt63品系
被引量:
9
1
作者
吴少云
唐大运
李琳
石磊
机构
华南理工大学生物科学与工程学院
广州迪澳生物科技有限公司
华南理工大学轻工与食品学院
出处
《食品与机械》
CSCD
北大核心
2012年第5期79-82,共4页
基金
广东省自然科学基金项目(编号:10451064101005159)
广州市科技计划项目(编号:11C12080718)
厦门市重大科技计划项目(编号:3502Z20110001)
文摘
采用环介导等温扩增技术(LAMP),针对转基因水稻Bt63品系外源基因与内源基因结合处序列设计4条特异性引物,利用浊度仪实时监测扩增过程,建立Bt63品系的快速检测技术体系,并对反应温度、灵敏度、特异性、稳定性和实际样品检测能力进行初步探索。结果表明,LAMP实时浊度法能够特异性检测转基因水稻Bt63品系,其最低检出限为0.01%,是普通PCR方法的10倍,具有广泛的应用价值。
关键词
环介导等温扩增技术
转基因水稻
实时浊度法
外源基因
内源基因
检测
Keywords
loop-mediated isothermal amplification
transgenic rice
real-time turbidimeter method
exogenous gene
endogenous gene
detection
分类号
S511 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
嗜水气单胞菌与温和气单胞菌的LAMP检测方法的建立
被引量:
5
2
作者
李嘉彬
马艳平
柯浩
郝乐
刘振兴
马江耀
梁志凌
李玉谷
机构
华南农业大学兽医学院
广东省农业科学院动物卫生研究所
出处
《南方水产科学》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期8-16,共9页
基金
广东省科技攻关项目(2010B020307003)
广东省海洋渔业科技推广专项(A201201C01)
文摘
利用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)分别建立嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,AH)与温和气单胞菌(A.sobria,AS)的快速检测方法。针对嗜水气单胞菌pilin基因、温和气单胞菌zipA基因设计特异性LAMP引物。在恒温条件下利用实时浊度仪对2组引物进行特异性和灵敏度试验,并以琼脂糖凝胶电泳和核酸染料颜色变化对扩增结果进行判定。结果显示,LAMP实时浊度法能够特异地检测嗜水气单胞菌和温和气单胞菌,最低检出限分别为46 fg·mL-1和320 fg·mL-1,是普通PCR方法的104倍和102倍;并能应用于已知临床样品检测。该研究建立的嗜水气单胞菌与温和气单胞菌LAMP快速检测方法具有高效、特异、灵敏的特点。
关键词
环介导等温扩增技术
嗜水气单胞菌
温和气单胞菌
实时浊度法
检测
Keywords
loop-mediated isothermal amplification
Aeromonas hydrophila
A. sobria
real-time turbidimeter method
detection
分类号
S941.4 [农业科学—水产养殖]
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职称材料
题名
LAMP法鸟类性别鉴定的研究与应用
被引量:
6
3
作者
李巍
杨卓
陈明非
高东梅
刘佳
苍真伟
程淑晶
王德强
机构
辽宁省大连市畜牧总站
辽宁省大连市动物疫病预防控制中心
大连老虎滩海洋公园鸟语林
出处
《现代畜牧兽医》
2017年第3期12-18,共7页
文摘
本研究利用鸡W染色体中EE0.6序列上的Eco R片段为靶序列,进行引物设计,建立了基于LAMP法的快速鸟类性别鉴定方法。试验表明,该引物可用于多属种鸟类的性别鉴定,在64℃条件下,60 min即可完成检测。同时利用实时浊度法和荧光目视法两种LAMP检测法对体系进行了敏感性试验,并与PCR方法进行比较,实时浊度法与荧光目视法敏感性相近,是PCR方法的100倍。方法建立后,在大连老虎滩鸟语林进行了11目14科35种鸟类的性别鉴定临床试验,符合率为100%。
关键词
LAMP
鸟类
性别鉴定
实时浊度法
荧光目视法
Keywords
LAMP
Bird
Sex identification
Real-time turbidmeter
Fluorescence visual method
分类号
S859.84 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
小反刍兽疫病毒RT-LAMP检测方法的研究
被引量:
4
4
作者
杨卓
于汉勋
李巍
机构
大连市动物疫病预防控制中心
大连市畜牧总站
出处
《现代畜牧兽医》
2015年第7期8-14,共7页
文摘
本试验利用浊度仪,采用实时浊度法进行小反刍兽疫病毒RT-LAMP方法检测。试验表明在65℃,50 min内即可完成对小反刍兽疫病毒的检测。通过敏感性试验证明了该试验方法只能检测目的病毒,而与同属病毒无交叉反应,灵敏性试验表明其灵敏度与Real-time RT-PCR方法相当,临床样本试验表明其准确性与RT-PCR检测试剂盒相当。
关键词
实时浊度法
小反刍兽疫病毒
检测
Keywords
Real time turbidity method
Peste des petisruminants virus
Detection
分类号
S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
小反刍兽疫病毒RT-LAMP快速检测和鉴别方法的建立
被引量:
4
5
作者
杨卓
于汉勋
李巍
机构
大连市动物疫病预防控制中心
大连市畜牧总站
出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第9期930-936,共7页
文摘
采用人工合成方法获得小反刍兽疫病毒N蛋白基因的核酸质粒,并利用该质粒进行小反刍兽疫病毒通用型引物和鉴别型引物的筛选。再经过对中国动物卫生与流行病学中心临床样品进行敏感性试验和对最佳引物进行验证,从而建立鉴别小反刍兽疫病毒新疆株和西藏株的RT-LAMP方法。结果显示,在65℃50min内即可完成对小反刍兽疫病毒的检测和鉴别。特异性、灵敏性试验结果表明,建立的RT-LAMP方法中通用型引物的灵敏度与Real-time RT-PCR相当,鉴别型引物的灵敏度是RT-PCR的10倍,临床样品的检测结果表明,本研究建立的RT-LAMP的准确性高于北京世纪元亨公司研制的小反刍兽疫病毒RTPCR检测试剂盒。
关键词
小反刍兽疫病毒
实时浊度法
检测
鉴别
Keywords
peste des petits ruminants virus
real-time turbidity method
detection
differentation
分类号
S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
LAMP实时浊度法检测转基因水稻Bt63品系
吴少云
唐大运
李琳
石磊
《食品与机械》
CSCD
北大核心
2012
9
下载PDF
职称材料
2
嗜水气单胞菌与温和气单胞菌的LAMP检测方法的建立
李嘉彬
马艳平
柯浩
郝乐
刘振兴
马江耀
梁志凌
李玉谷
《南方水产科学》
CAS
CSCD
北大核心
2014
5
下载PDF
职称材料
3
LAMP法鸟类性别鉴定的研究与应用
李巍
杨卓
陈明非
高东梅
刘佳
苍真伟
程淑晶
王德强
《现代畜牧兽医》
2017
6
下载PDF
职称材料
4
小反刍兽疫病毒RT-LAMP检测方法的研究
杨卓
于汉勋
李巍
《现代畜牧兽医》
2015
4
下载PDF
职称材料
5
小反刍兽疫病毒RT-LAMP快速检测和鉴别方法的建立
杨卓
于汉勋
李巍
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2015
4
原文传递
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