目的探索利用实时能量代谢检测技术检测单采血小板(AP)中线粒体呼吸功能(MRF)的最佳条件参数,并研究AP在贮存过程中MRF的变化。方法收集AP标本,利用Seahorse XF检测其中MRF,通过调整AP的上样浓度、洗涤条件、线粒体呼吸调节药物浓度等...目的探索利用实时能量代谢检测技术检测单采血小板(AP)中线粒体呼吸功能(MRF)的最佳条件参数,并研究AP在贮存过程中MRF的变化。方法收集AP标本,利用Seahorse XF检测其中MRF,通过调整AP的上样浓度、洗涤条件、线粒体呼吸调节药物浓度等多项参数,最后分别研究贮存1 d和5 d的AP中MRF。结果AP上样浓度为5×10^(7)/100μL时,基础呼吸值316±65为最优;洗涤组的基础呼吸值329±120比未洗涤组的57±7更优(P<0.05);FCCP浓度以2μmol/L为最优。贮存1 d AP的基础呼吸值为683±161,而贮存5 d AP的基础呼吸值为140±23(P<0.05);贮存1 d AP的最大呼吸值为1044±82,而贮存5 d AP最大呼吸值<200(P<0.05)。2组的MRF动力曲线有明显差异。结论实时能量代谢检测技术可以实现对AP中MRF的检测。AP在贮存过程中MRF明显受损,提示这可能是血小板贮存损伤的重要新机制。展开更多
文摘目的探索利用实时能量代谢检测技术检测单采血小板(AP)中线粒体呼吸功能(MRF)的最佳条件参数,并研究AP在贮存过程中MRF的变化。方法收集AP标本,利用Seahorse XF检测其中MRF,通过调整AP的上样浓度、洗涤条件、线粒体呼吸调节药物浓度等多项参数,最后分别研究贮存1 d和5 d的AP中MRF。结果AP上样浓度为5×10^(7)/100μL时,基础呼吸值316±65为最优;洗涤组的基础呼吸值329±120比未洗涤组的57±7更优(P<0.05);FCCP浓度以2μmol/L为最优。贮存1 d AP的基础呼吸值为683±161,而贮存5 d AP的基础呼吸值为140±23(P<0.05);贮存1 d AP的最大呼吸值为1044±82,而贮存5 d AP最大呼吸值<200(P<0.05)。2组的MRF动力曲线有明显差异。结论实时能量代谢检测技术可以实现对AP中MRF的检测。AP在贮存过程中MRF明显受损,提示这可能是血小板贮存损伤的重要新机制。
