致力于减少动物试验的露诗(Lush)奖

由露诗美妆公司(Lush Cosmetics)和消费者伦理研究协会(Ethical Consumer Research Association)合作创办的Lush奖是目前动物试验替代领域最大的奖项。Lush奖设有科学奖、年轻研究者奖、训练奖、公共意识奖和游说奖,评选面向世界各地,以鼓励动物试验替代方法的研究及培训,并推动非动物试验法案的通过,从而确保动物试验替代方法研究领域不断的发展及进步,力求最终达到完全消除动物试验的目的。

局部应用骨保护素对鼠正畸牙移动影响的实验研究

目的探讨局部应用骨保护素(OPG)对牙移动影响。方法选用10周龄雄性SD(Spargue-Dewley)大鼠80只,实验组和对照组各40只。用40g力的拉簧牵引右上颌第1磨牙移向近中。将重组人骨保护素rhOPG-Fc和生理盐水分别注入实验组和对照组大鼠右上颌第1磨牙腭侧黏骨膜下。在1、4、8、12d分别处死实验大鼠,记录实验组与对照组右上颌第1磨牙近中的移动距离,观察右第1磨牙近中根压力侧牙周组织形态的变化和破骨细胞数量的变化。结果(1)实验组右上颌第1磨牙的移动距离在8d和12d时明显少于对照组(P<0.001)。(2)实验组大鼠右上颌第1磨牙近中根压力侧的牙槽骨骨吸收量少于对照组。(3)实验组大鼠右上颌第1磨牙近中根压力侧破骨细胞数量在4、8、12d时显著少于对照组(P<0.001)。结论局部注射OPG能抑制破骨细胞的分化,减少牙齿移动。

Caspase-1激活的细胞因子在实验性重症急性胰腺炎肺损伤中的作用

目的 探讨Caspase 1激活的细胞因子在实验性重症急性胰腺炎 (SAP)肺损伤中的作用机制。方法 采用 5 %牛磺胆酸钠逆行注入胰胆管诱发大鼠SAP模型。SD大鼠 32只 ,随机分为 4组 :正常对照组 (HC组 )和SAP 6h组、SAP 12h组、SAP 18h组。采用ELISA法测定血清IL 1β水平 ;半定量RT PCR检测肺内Caspase 1、IL 1β及IL 18mRNA的表达。结果 SAP造模后各组血清IL 1β水平与HC组相比均显著升高 (P <0 0 1) ;HC组肺内可见Caspase 1、IL 1β及IL 18mRNA表达 ;SAP各组肺内Caspase 1、IL 1β及IL 18mR NA的表达显著上调 (P<0 0 1) ,而且与急性肺损伤 (ALI)的严重程度有关。结论 Caspase 1的激活、IL 1β及IL 18的过度表达在SAP并发ALI和ARDS过程中具有重要的作用。

非协调性异种肝移植动物模型的建立

目的 :建立豚鼠至大鼠异种肝移植的动物模型。方法 :利用血管套技术和显微外科技术进行了2 3例豚鼠至大鼠肝移植。观察存活时间、谷丙转氨酶 (ALT)和移植肝病理变化、荧光染色。结果 :移植大鼠存活时间平均为 135 .10± 46 .12分钟 ,肝细胞发生弥漫性水样变性 ,IgG和IgM沉积于血管内皮细胞和肝血窦。结论 :豚鼠至大鼠异种移植模型存活时间有限 ,移植肝发生了超急性排斥反应。

重症急性胰腺炎致急性肺损伤动物模型血气分析及形态学研究

目的观察SD大鼠重症急性胰腺炎致急性肺损伤后动脉血气分析及形态学改变。方法健康成年SD大鼠20只,随机分成两组,A组10只,注射同等剂量的生理盐水;B组10只,腹腔注射脂多糖建立重症急性胰腺炎的动物模型,观察病理学改变。结果血气分析变化:①PaO2:伤后12～48 h两组SD大鼠相比较有差异(P<0.05),B组低于A组。②PaCO2:两组SD大鼠伤后12～48 h相比较均有差异(P<0.01),B组高于A组。病理学改变:B组急性肺损伤表现(中性粒细胞浸润、肺泡内炎性物质渗出),随着时间延长,视野内中性粒细胞增多。结论动脉血气指标PaO2、PaCO2在重症急性胰腺炎致急性肺损伤后可用作为判断肺组织损伤严重程度的参考指标,PaO2水平能反映肺损伤程度,在伤后24 h～48 h检测的指标更明显。

胆管癌动物模型的建立

近年来 ,人类胆管癌的发病率呈逐渐上升趋势。建立合适的胆管癌动物模型 ,无疑对人类胆管癌研究提供重要线索。

腘绳肌腱与髌腱骨重建ACL不同固定方法的生物力学研究

目的 探讨不同材料与固定方法对髌腱骨 (B PT B)和绳肌腱重建ACL抗拉强度和稳定因素的影响。方法 采用猪膝关节 35个 ,模拟交叉韧带重建 ,实验分为 :骨 髌腱 骨两端界面螺钉固定法 (n=11) ,股骨端单纯肌腱结 (n =13)和肌腱结骨栓 (n =5 )嵌压固定法 ,胫骨端固定采用肌腱编织缝合后骨桥上打结固定法(n=7)、肌腱端编织缝线界面螺钉固定法 (n =6 )和不带缝线肌腱界面螺钉固定法 (n =5 ) ;猪正常膝关节 (n =6 )ACL作为实验对照组。生物力学实验包括最大载荷拔出、抗拉刚度和位移 ,数据进行统计学处理。结果 最大载荷 :绳肌腱结和绳肌腱结骨栓嵌压固定 >B PT B界面螺钉固定 ,前者可以满足正常生理强度需求 ;胫骨固定最大载荷 :绳肌腱编织缝线骨桥打结固定 >肌腱端编织缝合 >无缝线肌腱界面螺钉固定 ;抗拉刚度 :猪正常ACL >B PT B界面螺钉固定 >绳肌腱结和绳肌腱结骨栓固定 ;最大位移 :猪正常ACL <B PT B界面螺钉固定 <绳肌腱结和绳肌腱结骨栓固定 ,后者应注意克服位移因素 ,防止术后松弛。肌腱编织缝合后界面螺钉固定与无编织缝线肌腱界面螺钉固定比较 ,只在 10 0N位移时差异无统计学意义(P >0 1) ,在其他参数上前者优于后者 ,差异均有统计学意义 (P<0 0 5 )。

局部注射不同浓度骨保护素对大鼠正畸牙移动影响的研究

目的:研究局部注射不同浓度骨保护素对大鼠牙齿移动的影响。方法:选用10周龄雄性SD大鼠60只,分为实验组与对照组,实验组分0.5mg/kg OPG组和0.05mg/kg OPG组,每组20只。在右上颌第一磨牙施加40G左右力使其移向近中。在实验组和对照组大鼠右上颌第一磨牙腭侧粘骨膜下分别注入重组人骨保护素rhOPG-Fc和生理盐水。在ld、4d、7d、14d分别处死实验组与对照组大鼠各5只,通过模型测量实验组与对照组右上颌第一磨牙的移动距离,HE染色观察右第一磨牙近中根压力侧牙周组织形态的变化和TRAP染色观察破骨细胞数量的变化。结果:1.在7天和14天时注射OPG的两组大鼠的牙齿移动量显著低于对照组,同时高浓度0.5mg/kg OPG组的移动量显著小于低浓度0.05mg/kg OPG组。2.对照组压力侧能看到显著的牙槽骨吸收,而注射OPG组大鼠牙槽骨吸收不明显。3.TRAP染色发现4天、7天和14天时第一磨牙近中根压力侧破骨细胞数量两个实验组显著少于对照组,而0.5mg/kg OPG组破骨细胞数量显著少于另外两组。结论:局部注射OPG后能显著减少破骨细胞的产生,同时能显著降低牙齿移动距离。高浓度的OPG比低浓度的OPG对抑制牙齿移动的作用更大。

金珠滴眼液治疗慢性结膜炎的动物实验研究

目的 :对金珠滴眼液治疗慢性结膜炎进行实验动物的疗效评价。方法 :采用球结膜下埋线法造成兔眼慢性结膜炎模型 ,分别以金珠滴眼液 (7 8%、3 9% )、0 2 5 %氯霉素、生理盐水治疗 ,每日手电肉眼及荧光染色裂隙灯观察、记录 ,观察期4周。结果 :金珠滴眼液 1、2、4周疗效的综合分值判定均与对照组有显著差异 ,7 8%金珠滴眼液效果更为显著 ,且均无局部刺激性。结论 :金珠滴眼液对家兔慢性结膜炎有明显的治疗作用 ,可望为临床常见多发的慢性结膜炎患者消除或缓解症状提供有效的治疗药物。

大鼠脾损伤愈合的组织学动态观察

目的 :动态观察大鼠不同形式脾损伤愈合的组织学变化 ,评估脾破裂保守及保脾治疗的理论依据。方法 :三种脾破裂模型分为 1w、2w、3w、4w、5w动态组织学观察脾脏愈合的过程。结果 :1w为血肿期 ;2w、3w为脾脏结构再生起始期 ,红细胞淤积消散 ,创面充血减少 ,T、B淋巴细胞开始聚集 ;4w、5w为再生期 ,T、B淋巴细胞归位 ,小动脉周围淋巴鞘 (periarteriolarlymphocyticshealths,PLAS)结构逐渐清晰 ,淋巴细胞密度增大 ,出现胶原纤维瘢痕。结论 :脾脏外伤有较好的自愈能力 。

改进的三袖套法大鼠原位肝移植

目的 :制作改进的三袖套法大鼠肝移植模型。方法 :参照Kamada、孙君泓等介绍的方法 ,着重对麻醉方法、肝上下腔静脉袖套制作和吻合以及受体去肝顺序等做了进一步的改进。结果 :手术时间供体为31～ 4 0min ,平均 35min ;受体为 37～ 4 5min ,平均 4 1min ;无肝期最短的 8min ,平均 12 .8min。 2 4h手术成功率为 85 % ,1w存活率为 6 3.3%。结论 :该模型术式简化了手术操作 ,缩短了无肝期 ,可用于大鼠肝移植的研究。

Dispase金属蛋白酶诱导的兔增殖性玻璃体视网膜病变模型

目的建立并评价dispase诱导的增殖性玻璃体视网膜病变(proliferativevitreoretinopathy,PVR)动物模型。方法选择健康成年的青紫蓝兔40只,右眼分别行玻璃体腔注射dispase0.05ml,按注射浓度不同,随机分成4组,A组(0.05U)、B组(0.075U)、C组(0.1U)、D组(0.2U)。左眼分别注射PBS0.05ml作为对照。术后第3小时、第1天、第7天至第70天每周进行眼部检查。检查项目包括裂隙灯、间接眼底镜和眼底照相。在处死动物后,典型的PVR眼进行组织病理学检查及增殖细胞核抗原(proliferatingcellmuclearantigen,PCNA)免疫组织化学染色。结果术后3h所有dispase眼均见视网膜前或玻璃体出血。大约在3周后,dispase眼依次出现视网膜前膜、髓线和血管抬高、固定视网膜皱折以及牵拉性视网膜脱离。组织病理学见视网膜前增殖膜对视网膜的牵拉以及视网膜结构的紊乱。在dispase注药后2周,视网膜节细胞层抗增殖细胞核抗原(PCNA)呈阳性表达,4周时内核层细胞表达阳性,至发生视网膜脱离后视网膜色素上皮开始表达PCNA。对照组未见PVR发生,也未见PCNA的阳性表达。结论Dispase可以在不使用外源性细胞、生长因子和细胞因子的情况下诱导视网膜细胞增殖从而建立PVR模型,操作简单且成功率高。

颈椎椎间融合器复合涂层及生长因子在山羊体内的融合效果评价

目的在活体山羊颈椎上比较自体三面皮质髂骨、帽式颈椎椎间融合器(hat type cervical intervertebral fusioncage,HCIFC)、表面喷涂羟基磷灰石的HCIFC及载有生长因子的羟基磷灰石涂层HCIFC的椎间融合效果。方法将32头山羊随机平均分为4组:自体骨组、HCIFC组、羟基磷灰石涂层组及生长因子组。各组均行C3～C4椎间盘切除术并植入以上内植物。于术前、术后即刻及术后1、2、4、8、12周摄颈椎正、侧位X线片,于侧位X线片上测量平均椎间高度(disc space height,DSH)、椎间角(intervertebral angle,IVA)及前凸角(lordosis angle,LA);术后12周处死动物,取C3～C4节段标本进行生物力学测定及组织学评估。结果生长因子组的颈椎屈曲、后伸和侧屈的平均刚度显著大于其他组(P<0.05);羟基磷灰石涂层组后伸、轴向旋转及侧屈的平均刚度显著大于HCIFC组和自体骨组(P<0.05)。影像学及组织学检测结果显示,3个颈椎椎间融合器组的椎间融合效果均好于自体骨组,其中生长因子组的融合效果最好。结论羟基磷灰石涂层可以改善颈椎椎间融合器的融合效果,生长因子能促进骨融合。

光化学疗法治疗615系小鼠皮下种植U14肿瘤

目的 :探讨单次光化学疗法 (photodynamictherapy ,PDT)治疗小鼠皮下种植E7+ U14肿瘤的疗效 ,为临床PDT治疗相关肿瘤提供实验依据。方法 :根据肿瘤体积决定光源输出的光斑面积和计算光照射时间 ,比较PDT治疗组与荷瘤对照组的肿瘤生物学特点及荷瘤小鼠的生存期。结果 :所有小鼠瘤细胞均成功种植 ,肿瘤体积呈对数增长 ,在局部呈浸润性生长 ;单次PDT治疗后肿瘤细胞大量坏死 ,肿瘤体积无明显增长 ,且显著小于同期荷瘤组 ;PDT治疗能有效降低肿瘤的肺和淋巴结转移率 ,并将荷瘤小鼠的平均生存期从 2 8.9d延长到 37.6d。结论 :单次光化学疗法通过损伤小鼠皮下种植E7+ U14肿瘤细胞改变瘤细胞的生物学特点 ,并有效延长荷瘤动物的生存期 ,可在相关肿瘤治疗方面进行更为深入的应用研究。

骨疏康对去卵巢雌鼠骨质疏松症防治作用的研究

目的 为验证骨疏康颗粒防治原发性骨质疏松症(POP)的疗效和探讨其治疗机理。方法 以切除卵巢雌性大鼠复制绝经后骨质疏松症模型,观察该药对去卵巢大鼠抗失骨作用。实验分为模型组、骨疏康组、尼尔雌醇组和正常对照组。术后1周开始灌胃治疗,持续12周。结果 实验性骨质疏松症大鼠一般状态、器官指数、腰椎骨矿含量、胫骨骨组织形态计量学、股骨生物力学性能等指标明显异常,病理光镜和计算机图像分析显示POP病变典型。骨疏康颗粒对上述改变有明显缓解作用,综合疗效优于对照西药。结论 骨疏康颗粒可通过体内多方位调节作用达到预防和抑制骨质疏松症的发生和发展,具有较好的应用前景。

精氨酸对全胃肠外营养肝硬化大鼠肝脏的保护作用

目的 :观察精氨酸对肝硬化大鼠全胃肠外营养时的肝保护作用。方法 :13只肝硬化大鼠随机分成 2组 ,A(TPN)组 7只 ,B(TPN +精氨酸 )组 6只。观察大鼠生存情况 ,大鼠实验前后体重、肝重 /体重比值的变化 ,大鼠氮平衡情况 ,肝功能、肝甘油三酯 (TG)、胆固醇 (CHO)含量、门静脉血胰岛素、C 肽、胰高血糖素浓度的变化及肝脏病理组织学改变情况。结果 :除TPN组一只大鼠因输液过快 ,肺水肿死亡外 ,其余大鼠均成活 ,实验前后体重无明显变化。与A组比较 ,B组血清TBIL、ALT、ALB、A/G比值差异无统计学性 (P >0 .0 5 ) ,AST明显降低 (P <0 .0 1) ,肝TG含量明显降低 (P <0 .0 1) ,肝CHO含量明显降低 (P <0 .0 5 ) ,门静脉血胰岛素、C 肽、胰高血糖素浓度明显升高 (P <0 .0 1)。肝脂肪变性程度 ,A组为Ⅳ级 ,B组Ⅱ级。电镜观察 ,A组肝细胞质内有多量的脂肪滴 ,但B组减少 ,两组肝细胞质内线粒体均轻度肿胀。结论 :精氨酸可以预防和治疗硬化肝TPN时进一步的肝损害 ,同时也需白蛋白强化。

镍钛合金组合式人工食管替代食管的实验研究

目的观察镍钛合金组合式人工食管替代一段食管的可行性。方法镍钛合金组合式人工食管是由柔性硅胶膜覆盖镍钛合金网状支架作管体,距两端1 cm处管体上带有涤纶连接环的组合式人工食管。以10只猪作实验动物,分为Ⅰ、Ⅱ两组(每组5只),行手术切除一段长约7 cm的胸段食管,应用镍钛合金组合式人工食管替代建立实验动物模型,Ⅰ组用单纯镍钛合金组合式人工食管与正常食管做套入式端端全层吻合连接,Ⅱ组在Ⅰ组连接基础上,于镍钛合金组合式人工食管套入正常食管重叠处的食管外面加用涤纶条环绕固定。术后观察动物的进食及生长情况,3个月内每月做1次x线食管造影、电子纤维食管镜检查,处死3只术后66,100和123 d脱管的实验动物进行解剖,并对新生食管行病理学检查。结果两组共10只实验猪存活超过6个月以上,最长的存活已达20个月余。全组无吻合口漏发生,所有实验动物在人工食管未脱落之前都能正常进食。7只实验猪在术后2～6个月内发生脱管,Ⅰ组3只术后3个月内脱管,脱管后发生新生食管狭窄,进食出现严重梗阻；Ⅰ组1只和Ⅱ组3只术后3个月后脱管,脱管后短时间内发生轻度新生食管狭窄,随后逐渐缓解,无进食困难。Ⅰ组1只、Ⅱ组2只实验猪超过术后10个月未发生脱管,新生食管无狭窄,进食顺畅。结论镍钛合金组合式人工食管替代猪被切除食管段,近期效果较好。

生物型人工食管的实验研究

目的生物型人工食管重建食管,探索解决术后吻合口瘘及晚期狭窄的途径。方法30只中国杂种犬经右侧开胸切除胸段食管,并以8cm长生物型人工食管进行重建,观察愈合过程。结果30只犬存活率815%(22/27),围手术期存活率933%(28/30)。吻合口瘘发生率67%(2/30)。术后平均288d人工食管脱落,术后60～75d出现不同程度狭窄,13例狭窄经扩张而缓解,5例需放置支架。病理结果显示新生食管由纤维结缔组织构成,其内面覆盖鳞状上皮,上皮下可见血供。结论生物型人工食管植入后,可短暂替代食管,并由机体修复为有上皮组织爬覆的纤维结缔组织新生食管,新生食管的后期狭窄经妥善的内科治疗可缓解,故人工食管可望成为有效的食管重建方式之一;解决植入长度及减轻狭窄是今后研究的重点。