免疫印迹法在实验大鼠汉坦病毒监测中的应用及与间接免疫荧光法之比较

用汉坦病毒汉滩株（７６－１１８）重组核蛋白作为免疫印迹法（ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ以下简称ＷＢ）的诊断抗原，用于实验感染大鼠血清抗体效价测定。同时与用汉城株（ＳＲ－１１）感染的Ｖｅｒｏ－Ｅ６细胞作抗原的间接免疫荧光法（以下简称ＩＦＡ）进行比较。ＷＢ法对３／４标本在大鼠接种病毒后第３天测得血清ＩｇＭ阳性，而ＩＦＡ法仅１／４标本出现阳性，ＩＦＡ效价为１：５１２０的血清，ＷＢ效价为１’：４０９６０，且在血清１：１０稀释时反应带亦清晰。两种方法分别测定６４份大鼠血清。甩ＩＦＡ法，４４份（６８．８％）出现类似阳性的荧光颗粒，而用ＷＢ法测定，无特异的反应带出现。非感染Ｖｅｒｏ－Ｅ６细胞作ＩＦＡ抗原，３０份（４６．９％）与正常细胞抗原有反应，此结果表明ＷＢ法在特异性和敏感性方面均高于ＩＦＡ法。ＩＦＡ法中的非特异性反应系血清与细胞成份之反应。

测鸭出血症病毒间接免疫荧光试验的建立

为寻求一种检测鸭出血症病毒 (duck hemorrhagic disease virus,DHDV)快速、敏感、实用的方法 ,建立了间接免疫荧光试验 ,并测定了一抗 (兔抗鸭出血症病毒阳性血清 )、二抗 (FITC标记的羊抗兔 Ig G)的最佳使用浓度及最佳感作时间分别为 1∶ 2 0、6 0 m in和 1∶ 10 0、6 0 min。以建立的间接免疫荧光试验检测了 DHDV于番鸭胚成纤维细胞中的复制动态 ,结果表明 ,接毒后 36～ 6 0 h为 DHDV大量复制期 ;6 0～ 12 0 h为 DHDV从核膜以出芽方式进入胞浆中成熟的阶段 ;12 0～ 14 4 h为大量 DHDV自胞浆中释放至胞外阶段。该方法快速、特异 ,可用于该病的实验室诊断。

大仓鼠对5种灭鼠剂的实验室选择性试验

目的实验室比较急性灭鼠剂磷化锌与4种抗凝血灭鼠剂毒饵敌鼠钠盐、杀鼠灵、杀鼠迷和溴敌隆对大仓鼠的毒效。方法将1%磷化锌、0.005%溴敌隆和0.025%敌鼠钠盐、杀鼠灵、杀鼠迷配成毒饵,对靶鼠单笼饲养进行有选择摄食试验:抗凝血鼠药摄食4d,磷化锌摄食12h;以毒杀率和摄食系数评价各种药物的毒效和适口性。结果5种鼠药对试鼠的毒杀率:敌鼠钠盐和溴敌隆均为100%,磷化锌为88.89%,杀鼠迷和杀鼠灵分别为50%和10%;摄食系数:磷化锌、敌鼠钠盐、杀鼠灵、杀鼠迷及溴敌隆分别为0.73、0.38、0.64、0.56和0.81。结论除杀鼠灵和杀鼠迷外,其他3种鼠药都适于防治大仓鼠;但从灭鼠成本和易用性考虑,敌鼠钠盐为首选。

抗卵巢癌细胞膜抗体对卵巢癌细胞体外细胞毒性试验及荷瘤小鼠的体内聚集性的实验研究

目的 :探讨抗卵巢癌细胞膜抗体作为放射免疫治疗载体的可能性 ,及对靶细胞体外裸鼠体内杀伤的相对特异性。方法 :采用补体介导细胞毒性试验 (MTT法 )测定抗卵巢癌细胞膜抗体对靶、非靶细胞比毒性 ;建立 BAL B/ C- m u裸鼠荷人卵巢癌模型 ,用 SPECT显像及病理检查分析 1 31 I标记抗卵巢癌细胞膜抗体在荷人卵巢癌裸鼠的聚集性。结果 :抗卵巢癌细胞膜纯化抗体比抗血清对卵巢癌靶细胞显示了更强的细胞毒作用 ,并且都显示了浓度梯度依赖性。抗卵巢癌细胞膜抗体对靶、非靶细胞比毒性显示了相对特异性 ,对卵巢癌细胞杀伤率高于非靶细胞 (宫颈癌、肝癌、胃癌、O型白细胞 )。并且呈时间依赖关系。1 31 I标记抗卵巢癌细胞膜抗体对荷人卵巢癌裸鼠腹腔注射 3d后 ,肿瘤区即有明显聚集 ,一直持续至第 8天。注射后第 8天 ,行病理检查 ,肉眼见有局部坏死淤血区 ;镜下见癌区组织大片状坏死 ,坏死区可见淋巴细胞浸润。结论 :抗卵巢癌细胞膜抗体对体内、体外卵巢癌细胞有相对特异性靶向性 。

计分法评价反向间接血凝抑制试验检测实验小鼠种群中流行性出血热病毒抗体的结果

一、引言流行性出血热(EHF)系自然疫源性疾病,鼠舍稍有不慎就可随野生鼠或其他病原媒介动物侵入。监测检查EHF的方法很多,最常用的当推李镐汪氏的间接免疫荧光法。该法取可疑鼠肺作冰冻切片,加上荧光素标记的抗EHF病毒的抗体,以检查标本中的抗原。或用已知EHF病毒感染鼠肺。

淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒在实验大鼠中的感染状况

目的对实验室留存的大鼠血清样本进行淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)抗体检测,调查LCMV在我国实验大鼠中的感染情况。方法依据现行国家标准中规定的免疫荧光试验(IFA)方法对我实验室保存的172份大鼠血清样本(包括48份无级别、100份清洁级和24份SPF级大鼠血清样本)进行LCMV抗体检测。结果无级别大鼠血清样本(n=48)15份阳性,阳性率为33.25%,强阳性样本滴度可达1∶1280;SPF级及清洁级大鼠血清样本全部阴性。结论大鼠可以感染LCMV,实验动物等级标准应增加对大鼠LCMV的检测。

实验大鼠仙台病毒抗体检测能力验证结果评价

目的了解全国实验动物检测相关实验室在大鼠仙台病毒抗体检测项目上的技术水平,发现并解决检验中存在的问题,促进各实验室加强质量管理,提高检测水平。方法制备标准实验大鼠血清样品,经过标定后分装,按照CNAS的要求进行均一性和稳定性验证,标定好的样品随机编号并随机发放给各参加实验室,每个实验室3个样本,在规定时间内反馈结果,结果以阳性或阴性表示,与预期结果均一致者判为满意结果,不完全一致或逾期未反馈结果者判为不满意。结果来自18个省市自治区的28家单位报名参加本次比对实验,均在规定时间反馈了结果,其中25家单位获得满意结果,占参加比对实验室的89.3%;结果不满意的3家单位,其中1家有1个样品与预期结果不符,另外2家均有2个样品与结果不符。28家单位中有27家采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测,另外1家用免疫荧光法(IFA)检测。反馈的原始记录总体真实可信,个别参加单位存在检测试剂来源不清、操作过程不详及阳性结果未进行复检等问题。结论各实验动物检测机构大鼠仙台病毒总体检测能力较高,本次能力验证计划的实施能够反映实验室的检测水平。

琼玉膏干预实验肺癌小鼠骨髓抑制的效应(英文)

背景:骨髓抑制是应用抗肿瘤药物治疗的主要副反应。目的:观察传统中药方琼玉膏对实验性肺癌小鼠化疗导致的骨髓抑制的干预效应。设计:随机对照试验。单位:暨南大学医学院。材料:实验于2001-03/10在暨南大学医学院中心试验室完成。选用48只健康的6～8周龄C57/BL小鼠。方法:使用癌细胞接种的方法制造小鼠肺癌模型,造模后随机均分3组,每组16只。①对照组,接种后次日用生理盐水0.2mL灌胃,同时以5μL/g体质量腹腔注射生理盐水,1次/d。②化疗组,顺氨氯铂20mg,用生理盐水稀释成0.2g/L,以5μL/g体质量腹腔注射,1次/d;同时以生理盐水0.2mL灌胃,1次/d。③联合组,除按化疗组用顺氨氯铂外,同时用琼玉膏0.2mL灌胃,1次/d。于用药后21d,检测外周血红细胞、白细胞、血小板数及骨髓有核细胞计数。主要观察指标:各组小鼠外周血红细胞计数、白细胞计数、血小板计数及骨髓有核细胞计数。结果:对照组有3只,化疗组有4只,联合组有4只未成瘤,被排除。在实验过程中对照组、化疗组各有2只死亡,联合组也有1只死亡,进入结果分析数对照组为11只、化疗组为10只、联合组为11只。①联合组及对照组的外周血红细胞、白细胞及血小板皆明显高于化疗组犤红细胞:(8.54±0.81),(8.65±0.77),(4.56±1.00)犦×1012L-1;白细胞:犤(9.04±0.60),(9.14±0.71),(3.31±0.96)犦×109L-1;血小板:犤(949.09±111.31),(955.54±87.13),(399.30±131.36)犦×109L-1,P<0.01犦。②化疗组骨髓有核细胞数明显低于联合组与对照组犤(5.30±1.12),(10.51±1.15),(14.36±1.02)犦×106,P<0.01)。而联合组与对照组相比,对照组又高于联合组(P<0.05)。结论:琼玉膏能提高肺癌小鼠化疗后外周血红细胞、白细胞、血小板及骨髓有核细胞计数,改善化疗所致的骨髓抑制状况,但尚不能完全拮抗化疗的骨髓抑制。

皮内试验诊断人、鼠肺吸虫病

应用斯氏肺吸虫成虫抗原对 5 2例临床诊断斯氏肺吸虫病人和实验感染小白鼠作皮内试验 ,阳性率均达 10 0 % ,其它对照组除 1例健康人为阳性反应外 ,均为阴性反应。同时以小白鼠感染前后不同时间进行试验 ,结果在感染后第 1周即出现阳性反应 ,第 3周后为 10 0 %。表明此法具有较高的敏感性和特异性 ,可供斯氏肺吸虫病的早期诊断和流行病学调查。

黄胸鼠对大隆的实验室抗药性测定

目的停止使用溴敌隆3年后,观察黄胸鼠对大隆的抗药性变化,为鼠害防制工作提供依据。方法应用无选择性试验方法,检测黄胸鼠对大隆的抗药性。结果20只黄胸鼠摄食0.005%大隆颗粒毒饵4～11d,11d内全部死亡,20只黄胸鼠摄食0.01%大隆颗粒毒饵3～6d,6d内全部死亡。经出血情况观察,证实均为抗凝血灭鼠剂所致。结论黄胸鼠对大隆未产生抗药性,可以用大隆防制害鼠。

武汉所昆明小鼠生产性能试验研究

目的 了解目前昆明小鼠的生长发育和繁殖性能。方法 从 1999年开始对武汉所昆明 (KM)小鼠体重增长和生产性能进行了统计分析。结果 昆明小鼠初配产仔率 10 0 % ,平均初生重 1 82g ,平均日增重 :0～ 42日龄 ,雄鼠 0 80g,雌鼠 0 6 0g ;42～ 112日龄 ,雄鼠 0 15g ,雌鼠 0 13g ;平均窝产仔数 9 6 9只 ,胎间隔 2 9 18d ,离乳成活率 91 0 5 %。

肺炎克雷伯氏菌在大鼠中的检出及实验感染的观察

肺炎克雷伯氏菌可正常寄居于人和动物的肠道、呼吸道及周围环境,是一种条件致病菌。本菌在实验动物中的感染较常见,但多为隐性感染。当机体抵抗力降低或在其他诱因影响下,本菌可引起动物多种疾病。如灵长类肺炎、腹膜炎、豚鼠败血症。严重感染时可引起大鼠严重肺炎而造成动物死亡。 1991年底,在本所动物繁殖场普通大鼠中,个别出现精神不振、厌食、消瘦。

83－1除草剂对大鼠繁殖生育能力影响的实验研究

本研究是＂新农药８３－１除草剂毒性研究＂课题的一个组成部分。实验采用拌饲染毒，对大鼠进行了三代繁殖试验。结果表明，８３－１除草剂对受试动物母鼠受孕率、活产率和幼鼠４日存活率、哺育成活率，在染毒剂量高达４０ｍｇ／Ｋｇ饲料的试验条件下均未受明显影响。

嘛呢骨痹液对大鼠的长期毒性试验

目的:观察嘛呢骨痹液的长期毒性。方法:四组大鼠分别给生理盐水、嘛呢骨痹液0.68g/kg、0.21g/kg和0.053g/kg,每天1次,连续给药60天,给药60天和停药14天后测定大鼠血液生化指标和血液学指标,处死大鼠后,取心、肝、脾、肺、肾、肾上腺和胸腺,测脏器系数,并观察组织形态学改变。结果:给药60天后大剂量组大鼠血小板数明显升高,停药14天后又恢复正常,个别大鼠有肝细胞水肿和脂肪变性。结论:大剂量嘛呢骨痹液对肝脏有轻度损害,在0.053～0.21g/kg剂量范围内长期应用较安全。

芪芎健肾颗粒治疗IgA肾病大鼠的实验研究

[目的]观察芪芎健肾颗粒对IgA肾病(IgAN)大鼠的治疗作用。[方法]建立IgAN大鼠模型,观察芪芎健肾颗粒对大鼠尿红细胞(URBC)计数、24 h尿蛋白定量(24 h Upr)、血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)和肾脏病理形态学的影响。[结果]芪芎健肾颗粒高剂量组(芪高组)与模型组比较,可有效降低URBC计数、24 h Upr、SCr、BUN(P<0.05),抑制肾小球系膜细胞增生和系膜基质增多,减少肾小球系膜区IgA的沉积。其中,芪高组在降低24 h Upr、SCr及改善肾脏病理损害方面疗效优于肾炎康复片组(对照组)(P<0.05),但在降低URBC计数、BUN方面与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]芪芎健肾颗粒能有效降低IgAN血尿、蛋白尿,改善肾功能,并有延缓肾小球病理进展的作用,是防治IgAN的有效方剂。

碟脉灵注射液对糖尿病大鼠周围神经病的实验研究

碟脉灵注射液具有扩张血管、改善供血、增加纤维蛋白溶解酶活性、抑制血栓形成的作用,主要用于心脑血管疾病的治疗和预防。近期临床试验报道碟脉灵注射液治疗糖尿病周围神经病变疗效显著[1～3],为此课题组研究蝶脉灵注射液对糖尿病大鼠神经病变的作用。