糖化血红蛋白实验室检测技术及方法学进展

糖化血红蛋白A1c(Haemoglobin A1c,Hb A1c)是人体血液中葡萄糖与血红蛋白β链N-末端缬氨酸(βN-1-去氧果糖基血红蛋白)残基以共价键结合的稳定的一类化合物。目前Hb A1c是评价糖尿病患者长期血糖控制状况的"金标准",在糖尿病治疗及其并发症监测中具有重要价值。临床实验室采用的Hb A1c检测技术方法达30多种。根据其实验原理一般分为两类:一类是基于糖基化与非糖基化血红蛋白所携带的电荷不同,如离子交换层析法、电泳法;另一类是基于糖基化与非糖基化血红蛋白的化学结构不同,如免疫法、酶免法以及亲和层析法等。论述了糖化血红蛋白A1c实验室检测技术及方法学评价新的进展。

恒温扩增荧光检测技术在基层结核病实验室的应用价值

目的探讨在基层结核病实验室采用恒温扩增荧光检测技术检测可疑肺结核患者痰标本诊断结核病的价值。方法搜集河南省4个项目点县级结核病实验室2014-2015年期间可疑肺结核患者的痰标本4242例，分别进行痰涂片、痰培养和恒温扩增荧光检测技术检测，比较恒温扩增荧光检测技术和传统痰涂片、痰培养方法的敏感度、特异度等。计数资料采用χ2检验，以P〈0．05为差异有统计学意义。结果纳入的4242例患者中，痰涂片检出阳性者351例，阳性检出率为8．21％（351／4276）；痰培养检出阳性者576例，阳性检出率为13．47％（576／4276）；恒温扩增荧光检测技术检出阳性者733例，阳性检出率为17．14％（733／4276）。3种检测技术的阳性检出率比较，差异有统计学意义（χ2=153．412，P〈0．001）。以痰培养试验结果为标准，恒温扩增荧光检测技术的敏感度和特异度分别为86．81％（500／576）、93．64％（3433／3666）；阳性预测值为68．21％（500／733），阴性预测值为97．83％（3433／3509），与痰培养有较高的一致性（Kappa值为0．722）。痰涂片检测的敏感度为57．29％（330／576），特异度为99．43％（3645／3666），阳性预测值为94．02％（330／351），阴性预测值为93．68％（3645／3891）；Kappa值为0．679。痰涂片与恒温扩增荧光检测技术检测痰标本的敏感度比较，差异有统计学意义（χ2=153．336，P〈0．001）。结论恒温扩增荧光检测技术检测的敏感度和特异度均明显高于传统的痰涂片，且其具有检测快速、操作简便等优势，便于在我国基层结核病实验室中推广应用。

发热伴血小板减少综合征实验室诊断方法的比较与评价

目的比较不同检测方法在发热伴血小板减少综合征(SFTS)病例诊断中的结果差异,为快速、准确诊断新布尼亚病毒(SFTSV)感染提供依据。方法选取2014年河南省SFTS专项监测系统收集的158例SFTS患者的急性期血清标本,分别应用Real-time PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)-Ig M法进行检测;选取其中有急性期和恢复期双份血清的109对标本,应用ELISA-Ig M和ELISA-Ig G法进行检测。比较3种方法对SFTS阳性检出率的差异,同时分析采血时间对检测结果的影响。结果 158例SFTS患者的急性期血清标本,Real-time PCR的阳性检出率(76.58%)高于ELISA-Ig M(47.47%),差异有统计学意义(χ~2=34.13,P<0.05);109例有急性期和恢复期双份血清标本的病例,ELISA-Ig G的阳性检出率(75.23%)与Real-time PCR的阳性检出率(72.48%)差异无统计学意义(χ~2=0.18,P>0.05);无论在急性期还是恢复期,Ig M抗体的阳性检出率均高于Ig G,差异有统计学意义(χ~2分别为41.68和6.25,均P<0.05);随着采血时间的延长,Ig M和Ig G抗体的阳性检出率均有增加的趋势(Z分别为6.42和10.08,均P<0.05)。结论 Real-time PCR法适用于SFTS病例的早期诊断,ELISA-Ig G法适用于SFTS恢复期标本的检测,ELISA-Ig M法可作为一种辅助方法指导临床诊断。

四种实验室检测技术对利福平和异烟肼耐药性检测的临床价值

目的探讨微孔板法、实时荧光PCR熔解曲线技术(简称“熔解曲线法”)、多色巢式实时荧光定量PCR技术(简称“Xpert法”)和罗氏药物敏感性试验(L-J药敏试验,简称“比例法”)用于快速筛查耐多药结核病(MDR-TB)的临床价值。方法从医院信息系统(hospital information system,HIS)连续收集2014年7月至2018年3月重庆市公共卫生医疗救治中心收治的确诊为结核病,且具有微孔板法、比例法、熔解曲线法、Xpert法检测MTB对利福平、异烟肼耐药性诊断结果的2792例患者资料;其中微孔板法、比例法采用阳性分离菌株检测,熔解曲线法和Xpert法采用患者标本直接检测。纳入同时具有微孔板法和比例法耐药性检测结果的1488例患者作为研究对象,其中341例行微孔板法+比例法+Xpert法检测利福平耐药性,87例行微孔板法+比例法+熔解曲线法检测利福平耐药性,66例行微孔板法+比例法+熔解曲线法检测异烟肼耐药性。以比例法为标准,采用SPSS13.0软件分别计算微孔板法、熔解曲线法、Xpert法检测利福平和(或)异烟肼耐药性的敏感度、特异度、符合率、Kappa值等。结果以比例法为标准,微孔板法、Xpert法、熔解曲线法检测利福平耐药性的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率、Kappa值分别为97.2%(731/752)、96.9%(713/736)、96.9%(731/754)、97.1%(713/734)、97.0%(1444/1488)、0.94,97.2%(140/144)、94.9%(187/197)、93.3%(140/150)、97.9%(187/191)、95.9%(327/341)、0.92,97.1%(33/34)、84.9%(45/53)、80.5%(33/41)、97.8%(45/46)、89.7%(78/87)、0.79;微孔板法和熔解曲线法检测异烟肼耐药性的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率、Kappa值分别为94.8%(751/792)、95.7%(667/697)、96.3%(751/780)、94.2%(667/708)、97.9%(1418/1448)、0.91,97.3%(36/37)、86.2%(25/29)、90.0%(36/40)、96.2%(25/26)、92.4%(61/66)、0.84。结论微孔板法、熔解曲线法、Xpert法检测利福平和(或)异烟肼耐药性均具有较高的敏感度和特异度,适合快速筛查耐多药结核病;微孔板法还能获得各药物最低药物浓度,为临床用药剂量的选择提供参考依据。

结核性脑膜炎患者行脑脊液实验室检测方法的现状与进展

结核性脑膜炎（tuberculous meningitis，TBM）是最常见的肺外结核之一，约占全部结核病患者的1％；但死亡率可达26．8％，死亡多发生在患病最初的6个月，早期诊断及治疗是改善TBM预后的重要因素。临床上对TBM的诊断是通过临床表现、脑脊液检测、头颅影像学检查及是否并发颅外结核等综合分析后作出的。脑脊液检测是诊断TBM的重要指标，通过检测脑脊液中的结核分枝杆菌及其特异性的标志物，可以为TBM的诊断提供重要帮助。

人类疱疹病毒6、7、8型实验室诊断方法的研究进展

疱疹病毒是一类在分子生物学和医学上有重要意义的病毒,它们是典型的双链DNA病毒,在自然界中分布广泛。其中人类疱疹病毒（HHV）6、7、8型是近年来发现与幼儿急疹、移植性疾病和神经性疾病等相关的疱疹病毒。目前国内外对此3种病毒感染的致病机制、流行病学特征以及检测方法的研究比较活跃。疱疹病毒大约有100种之多,

结核分支杆菌的实验室快速诊断技术

近年来结核病患者日益增多,但是传统的诊断方法耗时,并且敏感性与特异性均不理想。目前迫切需要更快速、准确的实验室诊断技术来分离和鉴定结核分支杆菌,及时明确诊断。现综述近年来结核分支杆菌的实验诊断新技术。

HIV实验室检测技术进展

HIV实验室检测技术对AIDS的诊断、治疗及疫情监测极其重要。随着AIDS防治工作的不断深化,实验室检测技术也在不断发展,不仅抗原抗体检测、核酸检测及免疫学检测等常规技术得到了进一步完善,还出现了BED捕获酶免疫试验、滤纸干血片技术、新生儿早期诊断及超敏反应基因检测等以更好监测、更早诊断及更好治疗为目的的新技术。本文对HIV实验室检测技术进展进行了阐述。

腰椎椎间盘退变的临床及实验室评价方法研究进展

随着人口老龄化的发展,腰椎退变性疾病日益多见,主要包括椎间盘、骨质、小关节突、周围韧带以及软组织等的退变,其中引起腰痛的主要原因是腰椎椎间盘的退变。腰椎椎间盘退变的原因十分复杂,主要为遗传易感性、衰老、机械负荷及营养供应障碍因素的共同作用[1]。早期评价腰椎椎间盘退变状况对进一步明确退变机制、选择合适的治疗方案以及评价治疗效果有重要作用,

幽门螺旋杆菌实验室诊断方法

对目前幽门螺旋杆菌实验室诊断方法及其进展进行综述。感染幽门螺旋杆菌可引起胃炎、消化道溃疡、胃癌等疾病,幽门螺旋杆菌感染的早期诊断日益引起人们的重视,其检测技术也在不断进步。幽门螺旋杆菌实验室诊断方法包括传统的微生物培养、病理学检测和各种核酸扩增技术,但国外学者已将研究重点转向标本取材。一些不需获得胃黏膜组织检测方法逐渐成熟,包括粪便幽门螺旋杆菌抗原检测、血清中幽门螺旋杆菌抗体检测、尿素呼气试验和粪便及其他标本中幽门螺旋杆菌基因测定等,这些方法更适合高危人群的筛查。

甲真菌病3种实验室检查方法的比较分析

目的:评价3种真菌检查方法在诊断甲真菌病中的应用。方法:分别采用直接镜检法、恒温加热溶甲法和培养法对110例甲真菌病的病甲标本进行处理后镜检。结果:直接镜检法检出真菌59例,阳性率为53.64%;恒温加热溶甲法检出真菌98例,阳性率为89.0%;培养法检出真菌85例,阳性率为77.27%。直接镜检法与恒温加热溶甲法差异有显著性(χ2=35.37,P<0.05)。结论:直接镜检法快速,但检出率低,恒温加热溶甲法检出率最高,但需对标本预处理;培养法耗时长,但可以作菌种鉴定,可以指导临床用药。

非结核分枝杆菌病的实验室诊断技术进展

目前,非结核分枝杆菌(NTM)病的发病率在全球逐年提高,NTM与结核分枝杆菌均可引起肺部以及其他部位病变,而且临床症状相似,鉴别诊断困难,所以分枝杆菌菌种鉴定对于疾病的诊断、治疗及预后意义重大。传统生化鉴定方法费力耗时,不能很好地满足临床需要。近年来,以免疫层析技术为基础的MPB64抗原胶体金法、以色谱技术为基础的气相及高效液相色谱法、以基因探针、限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)及PCR-基因测序方法为代表的分子生物学技术等各种新技术的引入,为NTM的菌种鉴定提供了更为科学的方法。作者就上述3种技术为基础开展的菌种鉴定方法,综合国内外近年来的文献,介绍了各种方法的原理、应用情况、性能指标等,同时对方法的优点及局限性进行初步评价。相信随着新技术不断完善,能够逐步形成快速可靠、成本低廉的标准化NTM菌种鉴定体系。

结核性脑膜炎实验室诊断方法对比

目的 :比较 5种实验室诊断结核性脑膜炎 (结脑 )方法的特异性和敏感性 ,探讨更实用的实验诊断结脑方法 ,以有效降低结脑的误诊率。方法 :选择确诊患者为检测对象 ,采集 CSF为标本 ,其中结脑组 115份、对照组 5 0份。对同一份 CSF平行进行改良罗氏法培养结核杆菌、PCR法检测 TB- DNA、离心涂片一步法检测 AFB、常规沉渣涂片法检测 AFB、斑点免疫金渗滤试验法检测 L AM- Ig G。结果 :结脑组的阳性率分别为 ,培养结核杆菌 4 .3%、检测 TB- DNA81.7%、常规方法检测 AFB 13.9%、离心涂片一步法检测 AFB 6 4 .3%、检测 L AM- Ig G 5 0 .4 %。对照组均无阳性发现。结论 :在实验诊断结脑方面 ,PCR法和离心涂片一步法既具有较高的特异性 (10 0 % ) ,也具有较高的敏感性 (81.7%和6 4 .3% ) ,应用价值高于其他方法 ;适当的联合试验可以提高敏感性。

非结核分枝杆菌的实验室鉴定方法学进展

非结核分枝杆菌（NTM）是指除结核分枝杆菌复合群（人型、牛型、非洲和田鼠分枝杆菌）及麻风分枝杆菌以外的其他分枝杆菌,是一种条件致病菌,极易导致院内感染。NTM可以侵犯人体肺脏、淋巴结、骨骼、关节、皮肤和软组织等组织器官,并可引起全身播散性疾病。近年来,由于AIDS患者、

县级实验室应用结核分枝杆菌-交叉引物核酸恒温扩增技术检测结果分析

目的 探讨基层实验室应用结核分枝杆菌交叉引物核酸恒温扩增技术(cross-priming amplification,CPA)在结核病诊断中的效果.方法 收集四川省武胜县疾病预防控制中心2015年7月1日至2016年2月29日登记的217例疑似肺结核患者治疗前痰标本,采用涂片法、培养法、GeneXpert MTB/RIF(简称“GeneXpert”)与CPA进行检测,计算各方法的阳性检出率,同时以培养法为金标准,计算CPA的敏感度与特异度,并与GeneXpert进行比较.结果 217例样本中排除1例培养污染与2例非结核分枝杆菌,纳入214例进行分析.涂片法、培养法、GeneXpert与CPA的阳性检出率分别为20.6％(44/214)、27.1％(58/214)、30.4％(65/214)与29.4％(63/214),两种分子检测方法的效果明显高于涂片法(x2 =5.43,P=0.020;x2=4.50,P=0.034).以培养法为金标准,CPA的敏感度与特异度分别为89.7％ (95％ CI:78.8％～96.1％)与92.9％(95％ CI:87.7％～96.4％).CPA与GeneXpert结果一致率为97.2％ (208/214).CPA每个标本检测完成时间为9.5 min,远低于GeneXpert(37.5min).结论 CPA用于结核病检测的效果与GeneXpert相似,但每个标本检测完成时间相对较短,适合在我国基层实验室应用.

新型分子检测技术在基层实验室诊断肺结核的效能分析

目的分析与比较GeneXpert MTB/RIF(简称“GeneXpert”)与交叉引物核酸恒温扩增(cross-priming amplification,CPA)技术在基层实验室结核病快速诊断中的效能。方法连续收集黑龙江省五常市结核病防治所2014年4月至2017年7月初诊肺结核可疑患者的痰标本,分别进行改良罗氏固体培养基培养法(简称“固体培养法”)与快速分子检测(A组采用GeneXpert检测了787例;B组采用CPA检测了501例)。以固体培养法为标准,计算2种分子检测技术的敏感度、特异度、Kappa值。结果A组共检测787例患者痰标本,其中培养阳性229例,GeneXpert阳性300例,GeneXpert检测的敏感度、特异度分别为99.1%(227/229)、86.9%(485/558),Kappa=0.788。B组共检测501例患者痰标本,其中培养阳性129例,CPA检测阳性125例。CPA检测的敏感度、特异度分别为81.4%(105/129)、94.6%(352/372),Kappa=0.768。2种分子检测技术与固体培养法检测结果的一致率比较,差异无统计学意义[90.5%(712/787)vs91.2%(457/501);χ^2=0.204,P=0.652)]。结论CPA检测的准确性与GeneXpert相当,但其成本低、无需检测仪器、允许每批次大量样本同时操作,更适用于基层实验室对肺结核患者的早期诊断。

实验室检测技术在肺结核活动性判断中的应用进展

我国肺结核疫情十分严峻,临床上确诊活动性肺结核的"金标准"是结核分枝杆菌病原学检查,但对病原学阴性肺结核活动性的判断存在困难。作者介绍了目前用于病原学阴性肺结核活动性判断的实验室评价指标,包括结核分枝杆菌抗原、炎性和急性期反应标志物、免疫学指标、血液转录标志物等,指出了目前实验室检测技术在肺结核活动性判断及临床应用中存在的问题,并对其未来发展进行了论述与展望。

基层医院梅毒实验室检测方法初探

目的探讨基层医院实验室梅毒检测方法的选择,评价几种梅毒实验室检测方法在基层医院应用价值。方法用SYP胶体金快速检测法对1 851例标本进行检测,共检测出阳性标本56例(A),从SYP胶体金法检测的1 795例阴性标本中随机抽取100例标本作为(B)。以TP-ELISA为金标准。用TP-ELISA法和TRUST法同时对C组(A+B)进行复测。结果 TPELISA法:40例阳性,116例阴性。相对于金标准:SYP胶体金法在C组检测出17例假阳性,1例假阴性。误诊率为14.66%,漏诊率为2.50%,特异度85.34%,灵敏度为97.50%,约登指数82.84%;TRUST法在C组检测出10例假阳性,16例假阴性。误诊率为8.62%。漏诊率为40.0%,灵敏度为60%,特异度91.38%,约登指数51.38%。结论 SYP胶体金法有较高的灵敏度(97.5%)和特异度(85.34),可适合手术和输血筛查患者,以及基层医院梅毒螺旋体测定的初筛试验,TRUST法及滴度试验,适合临床疗效的观察。

难度可调的仪器分析实验:气相色谱法测定风油精中薄荷脑、水杨酸甲酯等主要成分的含量

风油精是一种常见的家庭用药,其中含有桉油精、樟脑、薄荷脑、水杨酸甲酯及丁香酚5种主要成分。教师可根据实验条件及教学目标确定检测其中一种或多种成分。该研究推荐一个气相色谱测定风油精中各成分含量的实验。它既可以设计为高职院校的简单实验,也可设计为本科院校难度较高的实验;设计课时4h或8h,适合化学、药学或其他相关专业本、专科学生选用。