PD-L1(28-8)实验室自建平台免疫组织化学检测与性能验证

目的从PD-L1(28-8)浓缩型抗体性能验证角度出发,比较多平台的染色结果,旨在建立适宜的免疫组化染色条件,以满足PD-L1实验室自建平台检测(laboratory developed test,LDT)技术广泛运用的需求。方法设计扁桃体等多种正常组织块"羊膜卷"对照及高、中、低表达的肿瘤组织芯片对照,验证并确认PD-L1(28-8)在DAKO Omnis(1∶50+Linker)、Roche Ultra(1∶50+Linker)、DAKO ASL(1∶40+Linker)及手工(Manual)(1∶20+Linker)的染色条件,对已知PD-L1阳性的49例非小细胞肺癌存档蜡块进行测试,观察PD-L1(28-8)在上述四种平台染色的一致性。结果DAKO Omnis、Roche Ultra、DAKO ASL和手工(Manual)PD-L1(28-8)LDT表达例数为:当Cutoff值1%≤TC<50%,阳性例数分别为12、13、13、14例;Cutoff值TC≥50%时,阳性例数分别为24、23、23、11例;Cutoff值TC<1%时,在DAKO Omnis、Roche Ultra、DAKO ASL48平台上检测的阴性病例均为13例,手工(Manual)染色阴性病例则为24例。基于上述3种阈值,三种自动检测平台间的相关性分析结果显示:Roche Ultra、DAKO ASL48两者秩相关系数r=1;Roche Ultra/DAKO ASL48与DAKO Omnis的秩相关系数r=0.98;手工(Manual)与DAKO Omnis之间的秩相关系数r=0.88,手工(Manual)与Roche Ultra、DAKO ASL48之间的秩相关系数r=0.87,上述秩相关系数差异均有统计学意义(P<0.05)。结论PD-L1(28-8)LDT检测在DAKO Omnis、ASL48、Roche Ultra平台上一致性好,提示PD-L1(28-8)浓缩型抗体适用于带放大组份的检测平台,官方推荐的检测方法目前可被采纳为金标准。在可行的性能验证完善和多组织对照条件下,可推荐DAKO Omnis、Roche Ultra和DAKO ASL48三个检测平台进行LDT染色,手工(Manual)染色不适合PD-L1(28-8)的检测。