河北省2016-2021年脊髓灰质炎实验室细胞系质量监测与分析

目的 通过监测与分析河北省疾病预防控制中心脊髓灰质炎(简称“脊灰”)实验室2016-2021年使用的人横纹肌肉瘤(human rhabdomyosarcoma, RD)细胞系和转人脊灰病毒受体基因的鼠肺细胞(mouse L cells expressing the human Poliovirus receptor, L20B)系质量,确保检测脊灰病毒和非脊髓灰质炎肠道病毒(non-polio Enteroviruses, NPEV)的敏感性,为维持无脊灰状态提供可靠的技术保证。方法 采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)法对所用的RD细胞系和L20B系进行支原体检测(Mycoplasma detection);采用96孔微量培养板病毒滴定法对RD细胞系和L20B系进行细胞敏感性(cell sensitivity, CS)监测。结果 2016-2021年RD细胞系和L20B系支原体检测结果为阴性。与河北省脊灰实验室质量控制(laboratory quality control, LQC)株比较,RD细胞系和L20B系滴度波动范围为±0.5log CCID50/0.1ml, RD细胞系均值及标准差为Ⅰ型7.86±0.17,Ⅲ型7.73±0.13;L20B系均值及标准差为Ⅰ型7.05±0.10,Ⅲ型6.48±0.14。结论 2016-2021年河北省脊灰实验室使用的RD细胞系和L20B系质量控制良好,所用细胞系未受支原体污染,对Ⅰ型和Ⅲ型的脊灰病毒敏感性良好,为河北脊灰实验室脊灰病毒和非脊髓灰质炎肠道病毒分离及型别鉴定的质量提供了重要保障。

2019年河南省脊髓灰质炎病毒实验室质量控制标准毒株滴定

目的制备和滴定2019年河南省脊髓灰质炎病毒实验室质量控制标准毒株(Laboratory Quality Control Strain,LQCS)。方法中国Sabin参考毒株(China Sabin Test Reference Strain,CSTRS)扩增制备LQCS,以CSTRS为平行实验,进行三次独立实验完成LQCS滴定。结果LQCS RDⅠ型为108.48 CCID50/0.1 mL、RDⅢ型为108.57 CID50/0.1 mL、L20BⅠ型为107.82CCID50/0.1 mL和L20BⅢ型为107.20 CCID50/0.1 mL。结论河南省已制备可用于细胞敏感性实验的LQCS。

中国脊髓灰质炎实验室网络2007～2015年细胞敏感性监测与评价

目的通过对中国（未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区）脊髓灰质炎（脊灰）实验室网络（Chinese Poliomyelitis Laboratory Network,CPLN）2007年4月~2015年4月连续的细胞敏感性（Cell Sensitivity,CS）监测结果进行分析,评估其在脊灰实验室检测质量控制中的重要作用。方法全国脊灰实验室网络中所有实验室统一使用96孔微量板病毒滴定法在L20B细胞和RD细胞上对三个型别的脊灰病毒的敏感性进行检测。结果从2007~2015年,在CPLN中,有30个省级脊灰实验室已开展CS监测并按时向国家脊灰实验室上报结果,目前西藏由于实验室条件所限尚未开展CS监测。八年间的CS监测结果显示30个省级脊灰实验室的实验室质量控制（LQC）株滴度均在正常范围±0.5 logCCID_（50）/0.1ml波动。结论 2007~2015年CPLN中各个实验室所用的L20B和RD细胞对脊灰病毒敏感性处于正常范围内,细胞系状态稳定,对三个型别的脊灰病毒均敏感。CS监测作为CPLN质量控制的重要指标保证了实验室检测脊灰病毒的敏感性,为从细胞中扩增出低滴度的脊灰病毒提供了保障,对输入脊灰野病毒或疫苗衍生脊灰病毒（VDPV）的早期发现至关重要。